用于增强免疫反应的药物组合物包括TREM样转录本
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】Receptor 4Contributes to Drug Reinforcement,”J.Neuorosci.,2012,32(33):11187
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11200)。根据本专利技术的一些实施例，药物组合物可还包括抗原而作为疫苗，其中，TREML1 ECD或茎多肽充当佐剂或免疫增强剂。抗原可以是癌症的标志物。癌症可以是结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、黑色素瘤、肝癌、头颈癌、肺鳞状细胞癌、卵巢癌、子宫癌、前列腺癌、胃腺癌(gastric carcinoma)、宫颈癌(cervical cancer)、食道肿瘤(esophageal carcinoma)、膀胱癌、肾癌、脑癌、骨癌、胰脏癌、皮肤癌、皮肤或眼内恶性黑色素瘤、直肠癌、肛门区域癌、胃癌(stomach cancer)、睪丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈肿瘤(carcinoma of the cervix)、阴道癌、外阴癌、霍奇金氏病(Hodgkin's Disease)、非霍奇金氏淋巴瘤、食道癌(esophagus cancer)、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病(包括急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、慢性淋巴球性白血病)、儿童实体瘤、淋巴球性淋巴瘤、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、表皮样癌、鳞状细胞癌、髓母细胞瘤毛母质瘤(medulloblastoma pilomatrixomas)、子宫内膜癌、多发性骨髓瘤或T细胞淋巴瘤。
[0007]本专利技术的一个方面涉及用于增强免疫反应的方法。根据本专利技术的一个实施例的方法包括：将任一种上述药物组合物施用于给有需要的受试者。
[0008]利用以下描述及附图，本专利技术的其他方面将显而易见。
附图说明
[0009]图1示出了TREML1的示意图，其示意性示出了细胞外结构域(ECD)、跨膜结构域及细胞质结构域。ECD跨越TREML1的残基16至残基162，且跨膜结构域跨越TREML1的残基163至残基183。ECD包括单个IgV结构域(残基16至残基121)及茎区域(残基122至残基162)。细胞质结构域(跨越TREML1的残基184至残基313)包括免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM；残基279
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284)。
[0010]图2示出了TREML1 ECD与各种候选蛋白质结合的结果。结果显示，在固相结合试验中，重组TREML1 ECD可结合至固定化的MD2及TLR4。
[0011]图3A和图3B示出了MD2与各种蛋白质结合的结果。结果显示，在固相结合试验中，人和小鼠MD2蛋白质可分别结合至固定化的TREML1茎及mTREML1茎。
[0012]图4示出了各种抗体与TREML1 ECD竞争结合到表达MD2和CD14的THP1/XBlue/MD2/CD14的结果。THP1为源自自然表达许多样式辨识受体(包括Toll样受体)的人单核细胞。MD2和CD14二者均为TLR4的共同受体且介导LPS诱导的反应。结果显示，抗MD2抗体(18H10)和抗TLR4抗体(HTA125)能够与TREML1 ECD竞争结合到THP1/XBlue/MD2/CD14单核细胞。
[0013]图5A和图5B示出了TREML1 ECD可诱导THP1/XBlue/MD2/CD14单核细胞活化。图5A示出了在THP1/XBlue/MD2/CD14活化后TREML1 ECD诱导的NF
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κB分泌，并且图5B示出了在THP1/XBlue/MD2/CD14活化后TREML1 ECD诱导的TNF
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α分泌。
[0014]图6示出了抗MD2抗体(18H10)及抗TLR4抗体(HTA125)处理降低TREML1 ECD诱导的THP1/XBlue/MD2/CD14单核细胞活化，如由降低的TNF
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α分泌所证实。
[0015]图7A和图7B示出了TREML1 ECD可增强细胞内TLR(即，TLR7、TLR8及TLR9)诱导的细胞活化。
[0016]图8示出了mTREML1 ECD和mTREML1茎肽可诱发树突细胞成熟。
[0017]图9A示出了用于在动物模型中测试TREML1茎作为癌症疫苗佐剂的效应的治疗时间表。图9B示出了mTREML1茎作为佐剂增强癌症疫苗的有效性。
具体实施方式
[0018]本专利技术实施例是关于用作免疫增强剂或TLR激动剂的源自TREML1的TREML1 ECD或茎肽。本专利技术的专利技术者意外地发现，TREML1ECD或其茎可结合至可与细胞表面上的Toll样受体4(TLR4)相关联的MD2。MD2与TLR4相互作用以对各种刺激物(例如内毒素脂多醣(LPS))给予反应。TLR4活化导致细胞内信号传导，此增加负责活化先天性免疫反应的NF
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kB及炎症细胞因子(例如TNF
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α)产生。另外，TREML1 ECD或其茎亦发现与TLR2、TLR7、TLR8或TLR9相互作用。TREML1 ECD或其茎与TLR2/7/8/9之间的相互作用导致树突细胞(DC)活化及成熟，此进一步增强免疫反应。
[0019]TREM样转录本
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1(TREML1)是TREM家族的成员。如图1所示，TREML1是单跨膜蛋白，其由细胞外结构域(ECD，残基16至162)、跨膜结构域(TMD，残基163至183)和细胞质结构域(残基184至311)组成，其中，细胞质结构域包括免疫酪氨酸抑制基序(ITIM，残基279至284)。TREML1的ECD包括单一V
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set免疫球蛋白(Ig)结构域(残基16至121)及茎区域(残基122
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162)。
[0020]为识别TREML1 ECD的潜在结合配偶体，使用固相结合试验来评估TREML1 ECD与候选蛋白质之间的相互作用。简言之，将各种候选蛋白质及BSA(作为阴性对照)涂布于96孔板上并将各种浓度的TREML1ECD添加至孔。在结合及洗涤之后，将与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗TREML1抗体添加至各孔。在洗涤之后，添加HRP底物，即，TMB(3,3',5,5'
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四甲基联苯胺)。在反应之后，测量在450nm的吸光度以评估TREML1结合。一组例示性结果如图2所示，其中，重组TREML1 ECD以浓度依赖性方式结合MD2和TLR4。与此相比，TREML1 ECD不与CD14或BSA结合。
[0021]此外，MD2(LY96)以浓度依赖性方式与TREML1茎结合。与此相比，TLR4及CD14不结合TREML1茎(图3A及3B)。如同MD2，CD14也用作共同受体(连同Toll样受体TLR 4)用于检测细菌脂多醣(LPS)。这些结果指示TREML1茎直接与CD14/MD2/TLR4受体复合物中的MD2结合。...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于增强免疫反应的药物组合物，其包括TREM样转录本
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1(TREML1)细胞外结构域(ECD)或者TREML1茎多肽。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述TREML1 ECD或TREML1茎多肽源自人或小鼠TREML1。3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述TREML1 ECD或TREML1茎多肽具有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4的氨基酸序列。4.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述药物组合物还包括TLR激动剂。5.根据权利要求4所述的药物组合物，其中，所述TLR激动剂为脂多醣、热休克蛋白、纤维蛋白原、硫酸乙酰肝素片段、透明质酸片段、CpG寡脱氧核苷酸、4
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氨基
‑2‑
(乙氧基甲基)
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α,α
‑
二甲基
‑
1H
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咪唑并[4,5
‑
c]喹啉
‑1‑
乙醇(R848)或阿片类药物。6.根据权利要求1至5中任一项...
【专利技术属性】
技术研发人员：李文机，吕衍达，张家鸣，黄品谚，蔡宜芳，
申请(专利权)人：李文机，
类型：发明
国别省市：
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