Rab31/rs9965664在评估川崎病患者免疫球蛋白耐药中的应用制造技术

本发明专利技术公开了Rab31/rs9965664在评估川崎病患者免疫球蛋白耐药中的应用；本发明专利技术通过研究发现携带Rab31/rs9965664AA/GA基因型的KD患者更容易发生IVIG耐药，IVIG治疗抵抗风险显著增加，因此可以通过检测Rab31/rs9965664基因型来评估IVIG耐药；还发现携带rs9965664A等位基因的KD患者单核细胞中Rab31蛋白表达水平普遍较低，而IVIG治疗抵抗组中病人单核细胞中Rab31蛋白表达水平较IVIG敏感组显著降低，因此也可以通过检测Rab31表达量来评估IVIG耐药风险。有利于川崎病患者的后续治疗，具有较高的应用价值。的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
Rab31/rs9965664在评估川崎病患者免疫球蛋白耐药中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及Rab31/rs9965664在评估川崎病患者免疫球蛋白耐药中的应用。

技术介绍

[0002]川崎病(KD)是一种主要影响婴幼儿的全身性急性血管炎。高剂量静脉注射免疫球蛋白(IVIG)是KD患者降低炎症反应和冠状动脉瘤(CAA)发生风险的一线治疗方案。不幸的是，10
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20％的患者对该治疗方案没有反应，这类病人被定义为对IVIG治疗抵抗。此外，许多研究发现Rab31在多种人类疾病中调节先天免疫反应。然而，Rab31基因的单核苷酸多态性(SNP)是否与KD患者IVIG治疗抵抗相关的研究还未有报道。
[0003]川崎病(KD)是一种急性发热性系统性血管炎，临床医生通常根据一些体征和症状 (高热、黏膜炎症和颈部淋巴结病)进行诊断，最早由川崎富作医生发现。KD可以导致多器官多组织失调，尤其是中小型血管，以冠状动脉为甚。在未接受治疗的患者中，冠状动脉瘤的发生率约为25％，KD是发达国家获得性心脏病的主要病因。多个国家报告了儿童多系统炎症综合征(misc)。患者的临床特征与KD 相似(即非化脓性结膜炎、多形性皮疹、黏膜改变和四肢肿胀)。寻找有效的临床治疗KD的方法已成为当务之急。
[0004]静脉注射免疫球蛋白(IVIG)是从数千名捐赠者的血浆中提纯的产物，并广泛用于多种自身免疫性和炎症性疾病，如免疫性血小板减少症(ITP)和KD。目前，大剂量IVIG 治疗方案仍然是KD患者的一线治疗方法，因为IVIG治疗可以减少持续炎症的发生和冠状动脉瘤(CAA)形成导致猝死的风险。不幸的是，10
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20％的患者对该治疗方案没有反应，并最终发展为IVIG抵抗。IVIG抵抗患者相较于IVIG敏感患者发生川崎病休克综合征(KDSS)或KD巨噬细胞活化综合征(KD
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mas)等危及生命的并发症的风险增加。因此，了解IVIG的作用机制对KD的临床治疗至关重要。
[0005]人Rabs(大脑Ras相关蛋白)属于小GTPases的Ras家族，有60多个家族成员。Rabs 的功能依赖于其在GTP开启形态和GDP关闭形态之间的分子转换，以及对细胞胞吞和胞吐过程中特殊膜转运的调控。Rab31也是Rabs超家族的一个重要亚群，主要位于高尔基复合体和起源于高尔基体的细胞器膜中。除了膜转运功能，Rab31还通过招募 TBC1D2B来调控外泌体的异质性生物发生。此外，也有文献报道Rab31也对先天免疫至关重要。Yeo等发现Rab31在吞噬早期PI(4,5)P2到PI(3,4,5)P3转化过程中招募信号适配器APPL2，随后通过PI3K信号通路调节巨噬细胞fcγ受体(FcγR)介导的吞噬作用。
[0006]巨噬细胞吞噬作用对炎症反应和自身免疫反应至关重要，可以清除病原体和组织碎片。更有趣的是，IVIG在免疫性血小板减少和溶血性贫血中的作用机制是通过与脾脏和肝脏巨噬细胞FcγRs竞争结合来阻止自身抗体介导的血细胞被吞噬。提示Rab31调节巨噬细胞相关的吞噬作用可能是IVIG作用的关键，而Rab31在KD或IVIG中作用研究至今仍为空白。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供Rab31/rs9965664在评估川崎病患者免疫球蛋白耐药中的应用。
[0008]本专利技术所采取的技术方案是：
[0009]本专利技术的第一方面，提供检测Rab31表达量的物质在制备川崎病免疫球蛋白耐药评估产品中的应用。
[0010]在本专利技术的一些实施方式中，所述Rab31表达量在川崎病免疫球蛋白耐药中表达降低。
[0011]在本专利技术的一些实施方式中，所述产品包括试剂盒、诊断试剂、检测试剂、试纸、基因芯片或蛋白质芯片。
[0012]在本专利技术的一些实施方式中，所述物质包括通过免疫印迹法、免疫组化法和免疫共沉淀法、酶联免疫吸附法、胶体金、质谱法等方法检测Rab31表达量的物质。
[0013]在本专利技术的一些实施方式中，所述物质包括检测Rab31表达量的试剂、仪器、软件和/或模块。
[0014]本专利技术的第二方面，提供检测rs9965664多态性或基因型的物质在制备川崎病免疫球蛋白耐药评估的产品中的应用。
[0015]在本专利技术的一些实施方式中，所述rs9965664的AA/GA基因型的存在标志着发生川崎病免疫球蛋白耐药风险增高，敏感性降低，易于发生治疗抵抗。
[0016]在本专利技术的一些实施方式中，所述rs9965664的AA/GA基因型的男性患者和/或小于60月龄的患者更容易川崎病免疫球蛋白耐药风险增高，敏感性降低，易于发生治疗抵抗发生。
[0017]在本专利技术的一些实施方式中，所述产品包括试剂盒、诊断试剂、检测试剂、试纸、基因芯片或蛋白质芯片。
[0018]在本专利技术的一些实施方式中，所述检测rs9965664的物质包括通过TaqMan探针法、 SNaPshot法、HRM法、Mass Array法、Illumina BeadXpress法检测rs9965664多态性或基因型的物质。
[0019]在本专利技术的一些实施方式中，所述物质包括检测rs9965664多态性或基因型的试剂、仪器、软件和/或模块。
[0020]在本专利技术的一些实施方式中，所述物质包括：引物、探针。
[0021]本专利技术的第三方面，提供一种非诊断目的的检测川崎病免疫球蛋白耐药的方法，通过川崎病患者Rab31表达量和/或rs9965664多态性或基因型。
[0022]在本专利技术的一些实施方式中，所述Rab31表达量在川崎病免疫球蛋白耐药中表达降低，当其表达量低于正常人，则标志发生川崎病免疫球蛋白耐药风险增高。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，所述rs9965664的AA/GA基因型的存在标志着发生川崎病免疫球蛋白耐药风险增高，敏感性降低，易于发生治疗抵抗。
[0024]本专利技术的第四方面，提供一种筛选治疗川崎病免疫球蛋白耐药的方法，通过检测给药前后川崎病患者Rab31表达量和/或rs9965664多态性或基因型。
[0025]本专利技术的有益效果是：
[0026]本专利技术通过研究发现携带Rab31/rs9965664AA/GA基因型的KD患者与携带GG基因
型的KD患者相比，更容易发生IVIG耐药，IVIG治疗抵抗风险显著增加，差异具有统计学意义，因此可以通过检测Rab31/rs9965664基因型来评估IVIG耐药。此外，本专利技术还发现携带rs9965664A等位基因的KD患者单核细胞中Rab31蛋白表达水平普遍较低，而IVIG治疗抵抗组中病人单核细胞中Rab31蛋白表达水平较IVIG敏感组显著降低，与前述结果一致，因此也可以通过检测Rab31表达量来评估IVIG耐药风险；有利于川崎病患者的后续治疗，具有较高的应用价值。而且机制研究表明Rab31可能通过 NLRP3和p38信号通路调控川崎病人IVIG治疗的应答反本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测Rab31表达量的物质在制备川崎病免疫球蛋白耐药评估产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述Rab31表达量在川崎病免疫球蛋白耐药中表达降低。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括试剂盒、诊断试剂、检测试剂、试纸、基因芯片或蛋白质芯片。4.检测rs9965664多态性或基因型的物质在制备川崎病免疫球蛋白耐药评估产品中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述rs9965664的AA/GA基因型的存在标志着发生川崎病免疫球蛋白耐药风险增高。6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述产品包括试剂盒、诊断试剂、检测试剂、试纸、基因芯片或...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾晓琼，余洪燕，陈凯宁，许郁芬，付兰燕，周华仲，皮蕾，车迪，林月玲，
申请(专利权)人：广州市妇女儿童医疗中心，
类型：发明
国别省市：