靶向GPC3的抗原结合蛋白制造技术

本申请涉及一种分离的抗原结合蛋白，其包含分离的抗原结合蛋白，所述分离的抗原结合蛋白包含抗体重链可变区VH中的至少一个CDR，所述VH包含SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列。本申请所述的分离的抗原结合蛋白能够特异性结合GPC3。本申请还提供了所述抗原结合蛋白的制备方法及用途。方法及用途。

【技术实现步骤摘要】
靶向GPC3的抗原结合蛋白


[0001]本申请涉及生物医药领域，具体的涉及一种能够特异性结合GPC3的抗原结合蛋白及嵌合抗原受体。

技术介绍

[0002]Glypican3(GPC3)是一种70kd膜蛋白，属于Glypicans家族，高度且集中表达于胚胎发育期并且呈现组织特异性，表达之后会被furin酶切割产生N端40kd可溶性部分以及30kd部分通过GPI分子锚定于细胞膜的C端。基因组学和功能研究表明，GPC3对于维持Wnt通路、Hedgehogs通路的激活中有重要作用，例如GPC3偶联的硫酸乙酰肝素分子可以增强Wnts与其受体的结合从而对于维持Wnt通路有重要作用。GPC3表达于脑、消化道、膀胱，性腺和皮肤并高度表达于肝细胞癌表面；肝癌发生中Wnt通路起到了重要的作用，例如20％肝细胞癌β
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Catenin通路突变以及Frizzled
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7受体过度表达，GPC3在部分肝细胞癌发生过程中可能起到了促进作用。因此，亟需开发针对GPC3的治疗药物。

技术实现思路

[0003]本申请提供了一种靶向GPC3的抗原结合蛋白，其能够以较高亲和力特异性结合GPC3。所述抗原结合蛋白能结合人GPC3和鼠GPC3。另一方面，本申请还提供了包含所述抗原结合蛋白的嵌合抗原受体(CAR)，及CAR
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T细胞，所述CAR
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T细胞对HepG2细胞具有较强杀伤。
[0004]一方面，本申请提供了一种分离的抗原结合蛋白，其包含抗体重链可变区VH中的至少一个CDR，所述VH包含SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列。
[0005]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含HCDR3，所述HCDR3包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列。
[0006]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含HCDR2，所述HCDR2包含SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列。
[0007]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含HCDR1，所述HCDR1包含SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列。
[0008]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含HCDR1，HCDR2和HCDR3，所述HCDR1包含SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列，所述HCDR2包含SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列，且所述HCDR3包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列。
[0009]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含H
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FR1，所述H
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FR1的C末端与所述HCDR1的N末端直接或间接相连，且所述H
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FR1包含SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列。
[0010]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含H
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FR2，所述H
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FR2位于所述HCDR1和所述HCDR2之间，且所述H
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FR2包含SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列。
[0011]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含H
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FR3，所述H
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FR3位于所述HCDR2和所述HCDR3之间，且所述H
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FR3包含SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列。
[0012]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含H
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FR4，所述H
‑
FR4的N末端与所
述HCDR3的C末端直接或间接相连，且所述H
‑
FR4包含SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列。
[0013]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含H
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FR1，H
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FR2，H
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FR3和H
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FR4，所述H
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FR1包含SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列，所述H
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FR2包含SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列，所述H
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FR3包含SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列，且所述H
‑
FR4包含SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列。
[0014]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含VH，所述VH包含SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列。
[0015]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包括抗体重链恒定区。
[0016]在某些实施方式中，在所述分离的抗原结合蛋白中，所述重链恒定区源自人IgG恒定区。
[0017]在某些实施方式中，在所述分离的抗原结合蛋白中，所述重链恒定区源自人IgG1恒定区。
[0018]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含VL中的至少一个CDR，所述VL包含SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列。
[0019]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含LCDR3，所述LCDR3包含SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列。
[0020]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含LCDR2，所述LCDR2包含SEQ ID NO:19所示的氨基酸序列。
[0021]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含LCDR1，所述LCDR1包含SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列。
[0022]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含LCDR1，LCDR2和LCDR3，所述LCDR1包含SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列，所述LCDR2包含SEQ ID NO:19所示的氨基酸序列，且所述LCDR3包含SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列。
[0023]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含L
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FR1，所述L
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FR1的C末端与所述LCDR1的N末端直接或间接相连，且所述L
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FR1包含SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列。
[0024]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含L
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FR2，所述L
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FR2位于所述LCDR1和所述LCDR2之间，且所述L
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FR2包含SEQ ID NO:22所示的氨基酸序列。
[0025]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含L
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FR3，所述L
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FR3位于所述LCDR2和所述LCDR3之间，且所述L
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FR3包含SEQ ID NO:23所示的氨基酸序列。
[0026]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含L
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FR4，所述L
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FR4的N端与所述LCDR3的C端直接或间接相连，且所述L
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FR4包含SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.分离的抗原结合蛋白，其包含抗体重链可变区VH中的至少一个CDR，所述VH包含SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的分离的抗原结合蛋白，其包含VL中的至少一个CDR，所述VL包含SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1
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2中任一项所述的分离的抗原结合蛋白，其能够特异性结合磷脂酰肌醇蛋白多糖3(GPC3)。4.嵌合抗原受体，其包含抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和胞内信号传导结构域，所述抗原结合结构域包含权利要求1
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3中任一项所述的分离的抗原结合蛋白。5.免疫效应细胞，其包含权利要求4所述的嵌合抗原受体。6.分离的核酸分子，其编码权...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜钰超，刘恒，孙乃超，王苗苗，缪佳，周茂德，
申请(专利权)人：天辰生物医药苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：