ACAT1基因或蛋白在调控结直肠癌细胞增殖和转移中的应用制造技术

发明专利技术公开了ACAT1基因或蛋白在调控结直肠癌细胞增殖和转移中的应用，本发明专利技术经研究发现，ACAT1基因或蛋白在结直肠癌患者癌组织和结直肠癌细胞中高表达；本发明专利技术通过shRNA进行基因沉默，降低ACAT1基因或蛋白在结直肠癌细胞HCT 116和HT 29内的表达；本发明专利技术通过体内外功能实验明确干扰ACAT1表达可有效抑制结直肠癌细胞增殖、细胞集落形成和侵袭转移的能力，进而达到实现抑制结直肠癌的目的，对结直肠癌小分子靶向药物的研发具有重要意义。小分子靶向药物的研发具有重要意义。小分子靶向药物的研发具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
ACAT1基因或蛋白在调控结直肠癌细胞增殖和转移中的应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体公开了ACAT1基因或蛋白在调控结直肠癌细胞增殖和转移中的应用。

技术介绍

[0002]结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是目前世界上第三常见的恶性肿瘤。据统计，全世界每年约190万新诊断病例和超90万死亡病例，结直肠癌的高发病率和高死亡率严重威胁人类的健康。结直肠癌的发生和发展是一个复杂的过程，涉及信号分子、内稳态、微环境、饮食、生活方式等外源性和内源性因素。因此，探究结直肠癌恶性进展的病理生理机制，有利于结直肠癌早期诊断和发现新型生物标志物。
[0003]乙酰辅酶A酰基转移酶1(ACAT1)，可催化乙酰乙酰辅酶A分解成两个乙酰辅酶A分子以及其逆反应，在酮体的生成以及利用过程中起到关键的调控作用。此外，ACAT1最近还被报道在抗癌药物抗性、癌细胞增殖和肿瘤生长过程中发挥重要作用。ACAT1与前列腺癌、乳腺癌以及肝细胞癌的进展呈正相关。在结直肠癌中，虽然已有研究报道ACAT1介导苹果酸酶1(ME1)的K337乙酰化进而影响脂质代谢促进肿瘤发生，但未直接验证ACAT1与结直肠癌发生发展的相关性。本专利技术首次通过体内外实验证实了ACAT1对于结直肠癌增殖和侵袭转移方面的作用，为结直肠癌的靶向治疗提供有效治疗靶点。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供ACAT1基因或蛋白在调控结直肠癌增殖和侵袭转移中的应用。
[0005]本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
[0006]ACAT1基因或ACAT1蛋白在调控结直肠癌进展中的应用。
[0007]作为一种优选技术方案，所述的结直肠癌进展包括结直肠癌细胞的增殖、细胞集落形成和侵袭转移中的至少一种。进一步优选的，干扰、抑制或沉默ACAT1基因或ACAT1蛋白的表达能够抑制结直肠癌细胞的增殖、细胞集落形成和侵袭转移的能力。
[0008]ACAT1基因或用于抑制或干扰ACAT1基因表达的物质在制备产品中的应用，所述产品的用途为如下(a1)～(a5)中的至少一种：
[0009](a1)抑制结直肠癌细胞增殖；
[0010](a2)抑制结直肠癌细胞集落形成；
[0011](a3)抑制结直肠癌细胞侵袭转移；
[0012](a4)预防或治疗结直肠癌。
[0013]ACAT1蛋白或用于降低ACAT1蛋白含量和/或活性的物质在制备产品中的应用，所述产品的用途为如下(a1)～(a5)中的至少一种：
[0014](a1)抑制结直肠癌细胞增殖；
[0015](a2)抑制结直肠癌细胞集落形成；
[0016](a3)抑制结直肠癌细胞侵袭转移；
[0017](a4)预防或治疗结直肠癌。
[0018]一种产品，其活性成分为用于抑制或干扰ACAT1基因表达的物质或用于降低ACAT1蛋白含量和/或活性的物质，所述产品的用途为如下(a1)～(a5)中的至少一种：
[0019](a1)抑制结直肠癌细胞增殖；
[0020](a2)抑制结直肠癌细胞集落形成；
[0021](a3)抑制结直肠癌细胞侵袭转移；
[0022](a4)预防或治疗结直肠癌。
[0023]上述的抑制或干扰ACAT1基因表达的物质为ACAT1基因干扰慢病毒，干扰ACAT1基因表达所采用的ACAT1
‑
shRNA慢病毒载体的oligo序列如下所示：
[0024]shACAT1
‑
1：CCGGGCCACTAAGCTTGGTTCCATTCTCGAGAATGGAACCAAGCTTAGTGGCTTTTTG
[0025]shACAT1
‑
2：CCGGCGAAATGAACAGGACGCTTATCTCGAGATAAGCGTCCTGTTCATTTCGTTTTTG。
[0026]ACAT1基因或ACAT1蛋白作为靶点，在筛选或开发结直肠癌预防或治疗药物中的应用。
[0027]ACAT1基因或ACAT1蛋白作为结直肠癌预防或治疗靶点的应用。
[0028]所述的结直肠癌细胞为结直肠癌细胞HCT 116和HT 29。
[0029]本专利技术所述的ACAT1基因的序列为现有技术中已经公开序列(Homo sapiens chromosome 11,GRCh38.p14 Primary Assembly NCBI Reference Sequence:NC_000011.10)。ACAT1蛋白为ACAT1基因编码的蛋白。
[0030]本专利技术通过shRNA进行基因沉默，降低ACAT1基因或蛋白在结直肠癌细胞HCT 116和HT 29内的表达，可有效抑制肿瘤细胞增殖、细胞集落形成和侵袭转移的能力，其能够解决现目前针对结直肠癌靶向药物的研究中靶点不明确的技术问题。
[0031]与现有技术相比，本专利技术至少具有如下的优点与积极效果：本专利技术基于结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织样本研究发现，ACAT1在结直肠癌组织样本中高表达，该ACAT1基因或蛋白可作为结直肠癌的有效治疗靶点。本专利技术构建的shRNA可有效沉默结直肠癌细胞中ACAT1的表达。本专利技术结合体内外功能实验证实，降低ACAT1表达可有效抑制结直肠癌细胞增殖、细胞集落形成和侵袭转移的能力，进而达到实现抑制结直肠癌的目的。因此，ACAT1可应用于肿瘤靶向治疗，对结直肠癌小分子靶向药物的研发具有重要意义。
附图说明
[0032]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0033]图1为本专利技术实施例1提供的结直肠癌关键代谢蛋白ACAT1的发现过程图，其中，图1A为结直肠癌患者、代谢综合征患者与健康受试者血清样本中差异代谢物筛选、比对、鉴定、确认过程的热图；图1B为患者血清样本中共有差异代谢物筛选的维恩示意图；图1C为三组血清样本中比较中的共有差异代谢物；图1D为199对结直肠癌组织及癌旁组织中ACAT1 mRNA表达比较图；图1E为正常肠上皮细胞和不同结直肠癌细胞系中ACAT1mRNA表达水平；
[0034]图2为本专利技术实施例2提供的ACAT1对于结直肠癌细胞增殖的影响结果图，其中，图2A为qRT
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PCR检测细胞中ACAT1沉默效率图；图2B为ACAT1沉默对HCT 116和HT 29细胞增殖能力的影响；图2C为ACAT1沉默对HCT 116和HT 29细胞集落形成能力的影响；
[0035]图3为本专利技术实施例3提供的ACAT1对于结直肠癌细胞侵袭转移的影响结果图，其中，图3A为ACAT1沉默后HCT 116和HT 29细胞侵袭转移情况；图3B为ACAT1沉默后，侵袭转移标志蛋白E
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ACAT1基因或ACAT1蛋白在调控结直肠癌进展中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的结直肠癌进展包括结直肠癌细胞的增殖、细胞集落形成和侵袭转移中的至少一种。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，干扰、抑制或沉默ACAT1基因或ACAT1蛋白的表达能够抑制结直肠癌细胞的增殖、细胞集落形成和侵袭转移的能力。4.ACAT1基因或用于抑制或干扰ACAT1基因表达的物质在制备产品中的应用，所述产品的用途为如下(a1)～(a5)中的至少一种：(a1)抑制结直肠癌细胞增殖；(a2)抑制结直肠癌细胞集落形成；(a3)抑制结直肠癌细胞侵袭转移；(a4)预防或治疗结直肠癌。5.ACAT1蛋白或用于降低ACAT1蛋白含量和/或活性的物质在制备产品中的应用，所述产品的用途为如下(a1)～(a5)中的至少一种：(a1)抑制结直肠癌细胞增殖；(a2)抑制结直肠癌细胞集落形成；(a3)抑制结直肠癌细胞侵袭转移；(a4)预防或治疗结直肠癌。6.一种产品，其活性成分为用于抑制或干扰ACAT1基因表达的物质或用于降低A...

【专利技术属性】
技术研发人员：来茂德，茅天笑，李健康，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：