【技术实现步骤摘要】
土壤分离培育乳酸菌制作方法
[0001]本专利技术涉及土壤分离培育乳酸菌领域,尤其涉及一种土壤分离培育乳酸菌制作方法。
技术介绍
[0002]现代农业的发展,均会使用大量化肥农业,除草剂,使土壤微生物菌群不断减少,造成土壤板结,病虫害发生率逐年增加,农药使用量不断增加,进而造成农产品品质和产量不断下降,在这种工业农业时代下,只有使用本区域土壤微生物培育的菌种用于本区域土壤中,对土壤进行改良,才能抑制各种病原菌,减少农作物病虫害发生,从而减少农药使用量,提高农作物产量和品质,提高农产品经济效益,但是如何从土壤中提取乳酸菌的技术成了一大难题,为了解决这一问题,因此我们提出了土壤分离培育乳酸菌制作方法。
技术实现思路
[0003]基于
技术介绍
存在的技术问题,本专利技术提出了土壤分离培育乳酸菌制作方法。
[0004]本专利技术提出的土壤分离培育乳酸菌制作方法,包括以下步骤:
[0005]S1:在没有受过化肥农药及各种工业污染的深林土壤中,选择土壤深处10
‑
30公分含有乳白色的菌丝的 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.土壤分离培育乳酸菌制作方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:在没有受过化肥农药及各种工业污染的深林土壤中,选择土壤深处10
‑
30公分含有乳白色的菌丝的位置作为投放采集乳酸菌培养基采集点;S2:选取45%
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50%含水量的培养基,培养基原料:玉米面、大米,玉米面用水拌湿,含水量45%
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50%,大米用水浸泡1
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2小时,浸泡后过滤,用拌湿玉米面与浸泡过滤大米同时倒入到搅拌箱内进行搅拌混合,且玉米面和大米比例按照1:1添加,搅拌混合后,得到培养基,倒入到纱布袋中,并对纱布袋用麻绳系紧封口;S3:将S2中封口后的纱布带放入到温度为120
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130℃的高压灭菌锅灭菌2
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2.5h,灭菌完成后,取出放入到无菌室内进行自然冷却到30
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35℃,然后装入灭过菌的培养箱中用宣纸盖上;S4:将S3中所述的培养箱带到S1中所述的乳酸菌培养基采集点,让土壤周围有益菌落进入培养箱增大繁殖,其中繁殖时间为春秋5
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7天,夏天3
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5天;S5:打开S4中所述的培养箱,观察培养基上有乳白色或红色的菌落出现就证明有大量有益菌群繁殖,这时把培养箱取回实验室,将培养基取出倒入到搅拌箱中,并放入1:1比例的红糖,进行搅拌混合,搅拌混合均匀后装入灭好菌的陶瓷坛7天后添加3倍植物营养液二次培养,培养15天后,使用过滤网进行过滤,得到原种,其原种为混合菌群;S6:将需要用到的胶头滴管和采集管放入到高压灭菌锅中进行灭菌,制备人员佩戴好无菌手套以及口罩进入到S5中的原种库房内,使用灭菌后的采集管进行采样;S7:使用电子称称取8.5g的NaCl倒入到盛放有1L的蒸馏水的烧杯中进行溶解,使用量杯量取45ml生理盐水,并倒入100ml的锥形瓶中,并使用8层纱布和一层牛皮纸对锥形瓶进行包扎,采用量杯多次量取9ml生理盐水,倒入口径为18mm的试管中,并用橡皮塞塞紧,放入到温度为121℃的高压灭菌锅中进行灭菌20min,得到灭菌后的生理盐水;S8:采用电子秤准确称量乳酪蛋白胨10.0g、牛肉提取物10.0g、酵母提取物5.0g、葡萄糖5.0g、醋酸钠5.0g、柠檬酸二胺2.0g、Tween80 1.0g、K2HPO4 2.0g、MgSO4H2O 0.05g、琼脂15.0g,并将称量好的物质倒入到容量为1L的玻璃烧杯内,向玻璃烧杯内加入适量蒸馏水,紧接着将玻璃烧杯放置在到磁力搅拌器上搅拌溶解3min,向玻璃烧杯中补水至1L,搅拌完成后,将混合物分装于两个容量为1L的锥形瓶内,并放入到温度为121℃的高压灭菌锅中进行灭菌20min,灭菌完成后,取出放入到无菌室内进行自然冷却,待温度降到50
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60℃,得到培养基,将培养基倒入到超净工作台的平板上,且每个平板上倒入培养基的量为25ml;S9:使用量杯量取5mlS5中制得的原种,并量取45mlS7中制得的生理盐水,同时倒入到烧杯中,使用振荡器进行振荡混匀制得10
‑1稀释液,用移液枪吸取1ml 10
‑1稀释液于装有9ml...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘富金,王欢,周粉群,陈秀梅,
申请(专利权)人:贵州万益康微生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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