本发明专利技术涉及一株乳双歧杆菌BR001及其发酵方法与改善过敏的应用，属于微生物的技术领域。乳双歧杆菌(Bifidobacteriumlactis)BR001，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.23665，保藏日期为2021年10月25日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明专利技术还提供了一种乳双歧杆菌BR001在制备改善过敏的产品中的应用。本发明专利技术提供的乳双歧杆菌BR001的生产成本大大降低，更利于在其他领域的推广。本发明专利技术的乳双歧杆菌BR001的发酵批次差异减小，提高了菌株活力一致性，增加了产品质量的稳定性。本发明专利技术的乳双歧杆菌BR001可用于缓解过敏症状。状。
【技术实现步骤摘要】
一株乳双歧杆菌BR001及其发酵方法与改善过敏的应用
[0001]本专利技术涉及微生物的
，具体涉及一株乳双歧杆菌BR001及其发酵方法与改善过敏的应用。
技术介绍
[0002]过敏性疾病主要指的是人体在接触致敏物质后，产生大量lgE免疫因子，从而引起组织或器官功能障碍。过敏性疾病因发病率高而备受关注，在过去几十年中发病率显著上升，给患者的生活质量以及社会经济带来巨大的压力，成为全球关注的公众卫生问题。目前，世界卫生组织已把过敏性疾病列为21世纪需要重点研究和防治的三大疾病之一。随着对过敏性疾病的研究和关注度的提高，人们越来越了解过敏性疾病的病因、发病机制、自然发展过程，并仍在不断寻求预防和治疗过敏性疾病的有效策略。
[0003]机体所处环境以及自身营养发生定性或定量变化时，就会导致过敏性疾病的发生。而肠道菌群能够参与到机体免疫应答机制当中，因此可在一定程度上防治过敏性疾病。因此针对过敏性疾病的防治.不可依靠单一的传统治疗，还需要通过补充益生菌改善过敏体质，从根源上降低过敏性疾病的发病率。
[0004]在我们人体内肠道中存在着大量的微生物菌群，而且肠道微生物菌群跟人体健康之间存在十分密切的关系，尤其是一些有益菌群，对于人体的健康是有着很大的促进作用。如果肠道的菌群平衡状态受到了破坏，比如吃了抗生素或者是关于肿瘤治疗的放化疗，或者是在情绪心理比较压抑的情况下，或者是免疫力失调的情况下就会导致肠道菌群的失调，进一步的影响机体的健康。
[0005]乳双歧杆菌是一种肠道益生菌，有促进消化、维持肠道菌群平衡的作用。乳双歧杆菌通过产生乙酸、乳酸等短链脂肪酸来抑制肠道腐败菌的生长和有毒代谢产物的形成，刺激肠蠕动，从而减少水分的过度吸收而缓解便秘症状。乳双歧杆菌细胞能够吸附食物中的致癌和致突变物质，从而保护机体细胞免受这些致癌物质的损害。乳双歧杆菌通过抑制肠道许多腐败菌生长，从而减少一些肠源性致癌物的产生。此外，有研究还发现乳双歧杆菌具有激活机体巨噬细胞的吞噬活性，而有助于抑制肿瘤细胞；乳双歧杆菌还可通过诱导肿瘤细胞的凋亡而达到抑制肿瘤生长的作用。乳双歧杆菌可以抑制产生内毒素的有害菌数量，从而对肝脏患者起到良好的治疗作用。中国人中有相当一部分缺乏乳糖酶，不能分解牛奶中的乳糖，这些人在饮用牛奶后常常会出现胃肠道紊乱，导致胃肠痉挛、胀气或腹泻，即为乳糖不耐症。通过利用乳双歧杆菌对牛乳进行发酵而制备成发酵酸乳，可以有效缓解乳糖不耐症。
[0006]鉴于乳双歧杆菌在人体内强大的有益功能，其应用开发受到人们越来越多的重视。但是，目前其市场售价较高，限制了在人们日常生活中的普遍应用。
[0007]在生物发酵领域，工业化生产成本高，产品产率低，严重制约着产品更广阔的应用。乳双歧杆菌在工业化生产中，生产成本高、单位产量低、活菌稳定性差等问题影响了其在人们日常生活中的使用。
技术实现思路
[0008]本专利技术的目的在于解决目前乳双歧杆菌生产成本高、活菌稳定性差的问题，从而降低乳双歧杆菌生产成本，使乳双歧杆菌更广阔的应用到人们的日常生活中，为人类造福。
[0009]本专利技术提供了一株乳双歧杆菌BR001及其发酵方法与改善过敏的应用。
[0010]为了实现本专利技术的目的，本专利技术通过以下技术方案进行实现：
[0011]第一方面，本专利技术提供一株乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)BR001，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.23665，保藏日期为2021年10月25日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0012]第二方面，本专利技术提供了一种上述乳双歧杆菌BR001的高密度发酵培养的方法，其具体步骤如下：
[0013](1)菌种活化
[0014]将液氮罐中保存的乳双歧杆菌BR001甘油管取出，室温自然溶解；在无菌条件下，取菌种于乳双歧杆菌活化培养基内，于37℃厌氧恒温培养箱中培养12
‑
36h；取深层活化菌种传入下一代培养基中深层培养，如此反复活化传至第2
‑
5代；
[0015](2)种子培养
[0016]将步骤(1)活化的乳双歧杆菌BR001按照1％
‑
5％的接种量接种至已灭菌的液体MRS培养基中，于37℃静置厌氧培养12
‑
36h；
[0017](3)发酵培养
[0018]将步骤(2)培养好的种子液按照1％
‑
5％的接种量转接至已灭菌的改良MRS培养基中，于37℃，厌氧培养12
‑
36h，培养过程中控制发酵液中糖的浓度≤1g/L，控制发酵液pH值为6.5
‑
7.0；当发酵液OD600和菌体湿重(离心条件：8000rpm，4℃，2min)不再增加时，停止发酵，得到高密度的乳双歧杆菌BR001发酵液，立即降温至10℃
‑
15℃；
[0019](4)收集菌体
[0020]通过高速离心或微滤膜进行菌体收集，处理过程控制温度≤15℃收集菌体后，往其中加纯化水至发酵液体积，再进行处理至清夜的电导率<5s/m；收集菌体，4℃保存。
[0021]优选的，所述步骤(1)中活化培养基为：脱脂乳7％，酵母浸粉2％，酪蛋白胨2％，抗坏血酸0.1％，葡萄糖2％；115℃灭菌20min。
[0022]优选的，所述步骤(3)中改良MRS培养基为：糖蜜10g/L，酵母浸粉5g/L，酵母蛋白胨2.5g/L，玉米浆干粉5g/L，L
‑
赖氨酸1.5g/L，L
‑
苏氨酸1.5g/L，L
‑
天冬氨酸1.5g/L，L
‑
异亮氨酸1.5g/L，K2HPO42g/L，KH2PO41.5g/L，MgSO4·
7H2O 2g/L，硫酸亚铁0.05g/L，硫酸锌0.05g/L，硫酸锰0.05g/L，VB
12
0.005g/L，烟酰胺0.005g/L，生物素0.005g/L，盐酸硫胺0.005g/L，pH 6.5
‑
7.0。
[0023]优选的，所述步骤(2)和步骤(3)中的厌氧培养方法为：往发酵罐中通入无菌的N2或CO2，控制罐压为0.01
‑
0.03Mpa。
[0024]优选的，所述步骤(3)中的控制发酵液中糖浓度是通过连续流加糖蜜溶液实现的。
[0025]优选的，所述步骤(3)中的控制pH值得溶液为NH3·
H2O。
[0026]优选的，所述步骤(4)中的高速离心设备为：碟式离心机或管式离心机；微滤膜为：200nm的无机陶瓷膜或中空纤维膜。
[0027]第三方面，本专利技术还提供了乳双歧杆菌BR001菌粉的制备方法其具体步骤如下：
[0028](1)复配
[0029]首先在配置罐中加入适量的纯化水，将菌体转移至配料罐中，充分搅匀，加纯化水制成0.5...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株乳双歧杆菌BR001，其特征在于，所述一株乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)BR001，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.23665，保藏日期为2021年10月25日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。2.一种如权利要求1所述的乳双歧杆菌BR001的高密度发酵方法，其特征在于，所述发酵的具体步骤如下：(1)菌种活化将液氮罐中保存的乳双歧杆菌BR001甘油管取出，室温自然溶解；在无菌条件下，取菌种于乳双歧杆菌活化培养基内，于37℃厌氧恒温培养箱中培养12
‑
36h；取深层活化菌种传入下一代培养基中深层培养，如此反复活化传至第2
‑
5代；(2)种子培养将步骤(1)活化的乳双歧杆菌BR001按照1％
‑
5％的接种量接种至已灭菌的液体MRS培养基中，于37℃静置厌氧培养12
‑
36h；(3)发酵培养将步骤(2)培养好的种子液按照1％
‑
5％的接种量转接至已灭菌的改良MRS培养基中，于37℃，厌氧培养12
‑
36h，培养过程中控制发酵液中糖的浓度≤1g/L，控制发酵液pH值为6.5
‑
7.0；当发酵液OD600和菌体湿重(离心条件：8000rpm，4℃，2min)不再增加时，停止发酵，得到高密度的乳双歧杆菌BR001发酵液，立即降温至10℃
‑
15℃；(4)收集菌体通过高速离心或微滤膜进行菌体收集，处理过程控制温度≤15℃收集菌体后，往其中加纯化水至发酵液体积，再进行处理至清夜的电导率<5s/m；收集菌体，4℃保存。3.如权利要求2所述的高密度发酵方法，其特征在于，所述步骤(1)中活化培养基为：脱脂乳7％，酵母浸粉2％，酪蛋白胨2％，抗坏血酸0.1％，葡萄糖2％；115℃灭菌20min。4.如权利要求2所述的高密度发酵方法，其特征在于，所述步骤(3)中改良MRS培养基为：糖蜜10g/L，酵母浸粉5g/L，酵母蛋白胨2.5g/L，玉米浆干粉5g/L，L
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赖氨酸1.5g/L，L
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苏氨酸1.5g/L，L
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天冬氨酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：马乐辉，李云旭，刘瑞峰，李华文，韩清波，
申请(专利权)人：天津小薇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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