一种无血清脂肪干细胞培养基及脂肪干细胞的培养方法技术

本发明专利技术公开了一种无血清脂肪干细胞培养基及脂肪干细胞的培养方法，属于细胞培养技术领域，一种无血清脂肪干细胞培养基及脂肪干细胞的培养方法，包括培养皿和营养添加剂，营养剂添加在培养皿内部，培养皿包括均为玻璃材质的圆盘状结构的皿底和皿盖，皿盖卡接于皿底的顶端，皿盖卡接于皿底的顶端，皿盖的外侧固定设有玻璃外环，且皿盖的顶端固定设有辅助拉把手，营养添加剂包括运铁蛋白、FGF、免疫球蛋白、刺五加皂苷B、氯化矢车菊素

【技术实现步骤摘要】
一种无血清脂肪干细胞培养基及脂肪干细胞的培养方法


[0001]本专利技术涉及细胞培养
，更具体地说，涉及一种无血清脂肪干细胞培养基及脂肪干细胞的培养方法。

技术介绍

[0002]培养基，是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
[0003]脂肪干细胞是从脂肪组织提取的一种成体干细胞，具有向软骨、骨、脂肪等多种组织分化的潜能。脂肪组织通过脂肪抽吸术或外科手术容易获取，对供者创伤较小且不涉及伦理问题。而且，脂肪干细胞在人和动物体内相对分布广泛、扩增操作简单方便，是医学和组织工程领域最具潜力的种子细胞之一。目前，主要采用含胎牛血清的培养基进行脂肪干细胞的体外培养。
[0004]基于上述，本专利技术人发现：
[0005]当采用含胎牛血清的培养机培养脂肪干细胞时，由于血清细胞和脂肪干细胞属于不同的细胞种类，在混合培养时，可能会出现细胞间的生物反应或者物质间的化学反应，进而造成对整个培养基内脂肪干细胞的培养过程的影响。
[0006]于是，有鉴于此，针对现有的结构予以研究改良本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种无血清脂肪干细胞培养基，包括培养皿(1)和营养添加剂，其特征在于：所述营养剂添加在培养皿(1)内部，所述培养皿(1)包括均为玻璃材质的圆盘状结构的皿底(101)和皿盖(102)，所述皿盖(102)卡接于皿底(101)的顶端，所述皿盖(102)卡接于皿底(101)的顶端，所述皿盖(102)的外侧固定设有玻璃外环(1021)，且所述皿盖(102)的顶端固定设有辅助拉把手(1022)；所述营养添加剂包括运铁蛋白、FGF、免疫球蛋白、刺五加皂苷B、氯化矢车菊素
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O
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葡萄糖苷、β
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蜕皮甾酮。2.根据权利要求1所述的一种无血清脂肪干细胞培养基，其特征在于：所述皿盖(102)的顶端开设有检测孔(1023)，且所述检测孔(1023)内卡接有检测探头(1024)。3.根据权利要求2所述的一种无血清脂肪干细胞培养基，其特征在于：所述检测孔(1023)的内侧开设有内螺纹(1025)。4.一种脂肪干细胞的培养方法，其特征在于：采用权利要求1
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3任一项的无血清脂肪干细胞培养基培养，具体步骤如下：步骤S1：脂肪干细胞的提取制备：(1)选取脂肪组织：并放置于培养皿中，使用剪刀或镊子去除血管及结缔组织后剪碎成泥状；(2)一次离心：将剪碎的脂肪组织转入离心管，加入含双抗的PBS缓冲液清洗3次，清洗脂肪和去除杂细胞；(3)酶消化：清洗后将脂肪组织转到新的离心管中，按照1:1比例加入胶原酶消化；(4)混匀；进行摇晃混匀，获取含脂肪干细胞的均匀液体；(5)二次离心：对摇晃混匀的液体进行二次离心；(6)观察判断：去除液体内部的红细胞和血清部分；(7)三次离心：加入PBS清洗后离心；(8)计数分量培养：对最终离心的液体中的脂肪干细胞进行计数，并转移到新的培养皿中培养；步骤S2：对若干个培养基进行提前消毒；步骤S3：对步骤S2中完成消毒的培养基中加入营养...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴学涛，冯春玲，韩洪起，陈晓波，
申请(专利权)人：优赛医疗科技天津有限公司，
类型：发明
国别省市：