使用亲水相互作用液相色谱纯化和分离合成寡核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了使用亲水相互作用液相色谱(HILIC)在反应混合物内纯化靶向寡核苷酸的方法。根据本公开的方法中的一种方法包括用HILIC筛选反应混合物内的靶向寡核苷酸以产生初始反应混合物分布；确定该靶向寡核苷酸的洗脱百分比；将HILIC洗脱梯度聚焦在该靶向寡核苷酸的该洗脱百分比周围；以及在室温下使用所聚焦的洗脱梯度用HILIC纯化该靶向寡核苷酸。一些实施方案可利用质量触发对该靶向寡核苷酸的级分收集。当质量落在MS检测器的质量范围外时，一些实施方案可利用UV触发。一些实施方案可利用UV触发。一些实施方案可利用UV触发。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用亲水相互作用液相色谱纯化和分离合成寡核苷酸
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2020年3月6日提交的名称为“使用亲水相互作用液相色谱纯化和分离合成寡核苷酸(Purification and Isolation of Synthetic Oligonucleotides Using Hydrophilic
‑
Interaction Liquid Chromatography)”的美国临时专利申请第62/986,421号的优先权。该专利申请的内容全文以引用方式并入本文。


[0003]本公开涉及用于纯化合成寡核苷酸的方法。更具体地，本公开涉及提供经合成制备的寡核苷酸的改进纯化的方法。一般来讲，本公开的方法利用亲水相互作用液相色谱(HILIC)，并且一些实施方案也包括期望的经合成制备的寡核苷酸的质量靶向分离以实现该改进的纯化。

技术介绍

[0004]合成寡核苷酸是可以以序列特异性方式起作用来控制基因表达的短核酸链。因此，合成寡核苷酸对生物制药和个人医疗市场很受关注。/>[0005]为了本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种使用亲水相互作用液相色谱(HILIC)分离包含合成寡核苷酸的反应混合物的方法，所述方法包括：用HILIC分离所述反应混合物中的靶向寡核苷酸；以及用质量导向技术纯化所分离的靶向寡核苷酸，其中所分离的靶向寡核苷酸具有落在指定质量范围内的质荷比。2.根据权利要求1所述的方法，其中纯化所分离的靶向寡核苷酸包括纯化至大于或等于95.0％的最终纯度。3.根据权利要求1所述的方法，其中使用所述质量导向技术包括使用在所述指定质量范围内具有检测能力的质谱仪。4.根据权利要求1所述的方法，其中使用所述质量导向技术包括使用具有质谱仪和紫外(UV)检测器的系统。5.一种使用亲水相互作用液相色谱(HILIC)分离包含合成寡核苷酸的反应混合物的方法，所述方法包括：用HILIC分离所述反应混合物中的靶向寡核苷酸；以及将所分离的靶向寡核苷酸纯化至大于或等于95.0％的最终纯度。6.根据权利要求5所述的方法，还包括在室温下执行所述寡核苷酸的所述分离，并且其中室温在约20℃至约25℃的范围内。7.根据权利要求5所述的方法，其中用HILIC分离包括用pH大于约5的流动相洗脱。8.一种使用亲水相互作用液相色谱(HILIC)在反应混合物内纯化靶向寡核苷酸的方法，所述方法包括：用HILIC筛选所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：JA，
申请(专利权)人：沃特世科技公司，
类型：发明
国别省市：