一种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法技术

本发明专利技术属于药品检测技术领域，尤其涉及一种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法。所述检测方法包括以下步骤：制备供试品溶液，采用UPLC

【技术实现步骤摘要】
一种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法


[0001]本专利技术属于药品检测
，尤其涉及一种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法。

技术介绍

[0002]通络化痰胶囊由熊胆粉、天麻、三七、丹参、天竺黄和大黄六味药组成，具有化痰熄风，活血通络的功效，用于中风病中经络(脑梗塞)恢复期痰瘀阻络证，症见半身不遂，口舌歪斜，语言蹇涩或不语，偏身麻木，痰多而粘，唇甲色暗，舌苔厚腻，舌质暗，或有瘀点、瘀斑，舌底脉络瘀暗，脉涩或弦滑。
[0003]对于通络化痰胶囊的检测方法，现行质量标准包括天麻、大黄、丹参、三七四个薄层鉴别，以及熊胆粉的HPLC含量测定。五种原料药需要五个检验项目来实现质量控制，而且供试品制备过程繁琐，需要通过多次柱层析才可以实现样品的净化以及检测，费时费力。
[0004]现有专利技术专利CN105301168B
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通络化痰胶囊的检测方法提供了一种通络化痰胶囊的检测方法，该专利技术采用TLC法分别对天麻、大黄、丹参、三七四个原料药进行了测定；公开专利CN109490462A
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一种通络化痰胶囊的检测方法对该专利中大黄的鉴别方法进行了优化。然而，该两个专利均采用薄层色谱的方法，四种原料药采用的四个独立的试验来进行检测，且供试品制备繁琐。专利技术专利CN110927302B
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一种通络化痰胶囊指纹图谱的测定方法提供了一种通络化痰胶囊的检测方法，该专利技术采用HPLC指纹图谱法对通络化痰胶囊进行测定，可以同时对熊胆粉、天麻、三七、丹参和大黄进行检测；文献
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HPLC同时测定通络化痰胶囊中14种成分的含量(中国药学杂志2022年57卷第4期295页)提供了一种通络化痰胶囊中14种成分的同时测定方法，可以同时对熊胆粉、天麻、三七、丹参和大黄进行检测。但是上述专利和文献所采用的HPLC法单针进样均需要60分钟以上，同样存在分析时间长的问题，而且对于多组方的中成药采用HPLC法检测时，仅以保留时间进行成分鉴别，很难避免假阳性的干扰问题。

技术实现思路

[0005]为解决上述现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法，采用UPLC
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Q
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Orbitrap高效液相色谱质谱联用仪，利用保留时间和精确质量数实现对通络化痰胶囊中多药味的同时鉴别。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法，包括以下步骤：
[0008](1)供试品溶液的制备；取通络化痰胶囊内容物0.4g，精密称定，加入80％甲醇25ml，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
[0009](2)对照药材溶液的制备：取熊胆粉、天麻、三七、丹参和大黄对照药材适量，分别加80％甲醇25ml，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
[0010](3)对照品溶液的制备：取牛黄熊去氧胆酸、牛黄鹅去氧胆酸、天麻素、三七皂苷
R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、丹酚酸B、丹参酮II
A
、大黄素、大黄酚和大黄酸对照品，分别加80％甲醇制成10μg/ml的对照品溶液；
[0011](4)检测：分别取供试品溶液、对照品溶液注入仪器，记录图谱，按照保留时间和精确质量数进行鉴别。
[0012]进一步地，作为优选，步骤(4)中的液相色谱条件为：以乙腈为流动相A，以体积分数比0.05％甲酸溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式：0
→
5min，乙腈10％
→
11％；5
→
12min，乙腈11％
→
35％；12
→
18min，乙腈35％
→
70％；18
→
27min，乙腈70％
→
85％，流速：0.5ml/min。
[0013]进一步地，作为优选，步骤(4)中的色谱柱为Waters cortecs C18，4.6
×
150mm，2.7μm；柱温：40℃；质谱条件：Full MS(m/z 90
‑
1350)，电喷雾离子模式(ESI
+
、ESI
‑
)，分辨率70000。
[0014]进一步地，作为优选，步骤(4)中所述熊胆粉鉴别方法为：在保留时间15.93min和17.09min处均出现精确质量数为498.2883([M
‑
H]‑
)色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中含有熊胆粉，如果在对应保留时间内缺失两个色谱峰中的任一色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中不含有熊胆粉；
[0015]进一步地，步骤(4)中所述天麻鉴别方法为在保留时间3.28min处出现精确质量数为331.1024([M+COOH]‑
)色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中含有天麻，如果在对应保留时间内缺失该色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中不含有天麻；
[0016]进一步地，步骤(4)中所述三七鉴别方法为在保留时间13.65min、14.07min和16.18min处分别出现精确质量数为977.5327([M+COOH]‑
)、845.4904([M+COOH]‑
)和1153.6011([M+COOH]‑
)色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中含有三七，如果在对应保留时间内缺失三个色谱峰中的任一色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中不含有三七；
[0017]进一步地，步骤(4)中所述丹参鉴别方法为在保留时间13.48min和26.53min处分别出现精确质量数为717.1461([M
‑
H]‑
)和295.1329([M+H]+
)色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中含有丹参，如果在对应保留时间内缺失两个色谱峰中的任一色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中不含有丹参；
[0018]进一步地，步骤(4)中所述大黄鉴别方法为在保留时间15.48min、18.48min和21.58min处分别出现精确质量数为253.0506([M
‑
H]‑
)、283.0248([M
‑
H]‑
)和269.0455([M
‑
H]‑
)色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中含有大黄，如果在对应保留时间内缺失三个色谱峰中的任一色谱峰，则待测通络化痰胶囊样品中不含有大黄。
[0019]进一步地，作为优选，所述鉴别方法保留时间误差在
±
5％以内，质量数偏差在
±
5ppm以内。
[0020]进一步地，作为优选，步骤(4)中所述仪器为UPLC
‑
Q
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Orbitrap高效液相色谱质谱联用仪。
[0021]有益效果
[0022]本专利技术公开了一种同时鉴别通络化痰胶囊中五本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法，其特征在于利用UPLC
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Q
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Orbitrap同时鉴别通络化痰胶囊中熊胆粉、天麻、三七、丹参和大黄五种原料药。2.根据权利要求1所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液；(2)按照确定的色谱和质谱条件注入仪器，进行检测；(3)按照保留时间和精确质量数进行鉴别。3.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述供试品溶液的具体制备方法为：取通络化痰胶囊内容物0.4g，精密称定，加入80％甲醇25ml，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得。4.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述对照药材溶液的具体制备方法为：取熊胆粉、天麻、三七、丹参和大黄对照药材，分别加80％甲醇25ml，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得。5.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述对照品溶液的具体制备方法为：取牛黄熊去氧胆酸、牛黄鹅去氧胆酸、天麻素、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、丹酚酸B、丹参酮II
A
、大黄素、大黄酚和大黄酸对照品，分别加80％甲醇制成10μg/ml的对照品溶液，即得。6.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法，其特征在于，步骤(2)中所述色谱条件为：以乙腈为流动相A，以体积分数比0.05％甲酸溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式：0
→
5min，乙腈10％
→
11％；5
→
12min，乙腈11％
→
35％；12
→
18min，乙腈35％
→
70％；18
→
27min，乙腈70％
→
85％，流速：0.5ml/min。7.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法，其特征在于，步骤(2)中所述质谱条件为：FullMS(m/z 90
‑
1350)，电喷雾离子模式(ESI
+
、ESI
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)，分辨率70000；所述色谱柱为：Waters cortecs C18，4.6
×
150mm，2.7μm；柱温：40...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘广桢，林林，张雷，刘琦，谭乐俊，
申请(专利权)人：山东省食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：