一种高效液相色谱法检测美洛昔康中硫脲的方法技术

本发明专利技术涉及一种高效液相色谱法检测美洛昔康中硫脲的方法，该方法以直链淀粉

【技术实现步骤摘要】
一种高效液相色谱法检测美洛昔康中硫脲的方法


[0001]本专利技术属于药物分析领域，具体涉及一种高效液相色谱法检测美洛昔康中硫脲的方法。

技术介绍

[0002]美洛昔康(Meloxicam)，是一种烯醇类非甾体类抗炎药，具有抗炎、镇痛和解热作用，选择性抑制环氧化酶
‑
2(COX
‑
2)，对环氧化酶
‑
1的抑制作用弱，因此消化系统等不良反应少。其化学结构式为式(Ⅰ)所示，分子式：C
14
H
13
N3O4S2，分子量：351.40，CAS号：71125
‑
38
‑
7。
[0003][0004]硫脲是美洛昔康生产中引入的杂质，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，属于3类致癌物，按ICH的毒理学关注阈值(TTC)规定的1.5μg/天的限度控制，限度较低。其化学结构式为式(Ⅱ)所示，分子式：CH4N2S，分子量：76.12，CAS号：62
‑
56
‑
6。
[0005][0006]据文献报道，目前硫脲的检测方法有LC
‑
MS/MS法、反相HPLC法等。其中LC
‑
MS/MS法仪器昂贵，普及性不高；反相HPLC方法灵敏度未达到现有要求。结合本品及硫脲特性，开发正相HPLC方法，本方法专属性好、灵敏度高、准确度高，且耐用性好。

技术实现思路

[0007]本专利技术提供了一种高效液相色谱法检测美洛昔康中硫脲的方法，其特征在于：
[0008]1)色谱条件：以CHIRALPAK IF
‑
34.6mm
×
250mm为色谱柱；以二乙胺
‑
正己烷
‑
异丙醇为流动相，其比例为0.1∶30～35∶70～65；流动相流速为0.4mL/min～0.6mL/min；柱温为25℃～35℃；检测波长为238nm～242nm；
[0009]2)硫脲对照品溶液的配制：取硫脲对照品，用流动相溶解稀释；
[0010]3)供试品溶液的配制：取美洛昔康，用流动相溶解稀释；
[0011]4)测定：精密量取硫脲对照品溶液与供试品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液中硫脲的含量。
[0012]本专利技术提供的高效液相色谱法检测美洛昔康中的硫脲，硫脲峰与周边色谱峰达到
基线分离，硫脲的定量限达到0.06μg/ml，灵敏度高，重复性好，回收率在85％～110％之间，方法耐用性好，可用于美洛昔康的质量控制。
附图说明
[0013]图1示出实施例1方法专属性实验
‑
空白溶剂。
[0014]图2示出实施例1方法专属性实验
‑
硫脲定位溶液。
[0015]图3示出实施例1方法专属性实验
‑
美洛昔康溶液。
[0016]图4示出实施例1方法专属性实验
‑
100％加标样品溶液。
具体实施方式
[0017]实施例1：方法专属性
[0018]【步骤1】流动相的配制：
[0019]量取二乙胺1mL、正己烷300mL及异丙醇700mL，混合均匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，超声脱气，即得。
[0020]【步骤2】溶液配制：
[0021]硫脲定位溶液配制：取硫脲适量，用流动相溶解并稀释制成每1mL中约含硫脲0.2μg的溶液。
[0022]美洛昔康溶液配制：取美洛昔康适量，用流动相溶解并稀释制成每1mL中约含美洛昔康2mg的溶液。
[0023]100％加标样品溶液配制：取美洛昔康与硫脲适量，用流动相溶解并稀释制成每1mL中约含美洛昔康2mg，硫脲0.2μg的溶液。
[0024]色谱条件如下：
[0025]色谱柱：大赛璐CHIRALPAK IF
‑
34.6mm
×
250mm；
[0026]流动相：二乙胺
‑
正己烷
‑
异丙醇(0.1∶30∶70)；
[0027]流速：0.5mL/min；柱温：30℃；检测波长：240nm；进样体积：20μl；运行时间：40min。
[0028]结果：空白无干扰。硫脲的保留时间为7.097min，美洛昔康的保留时间为15.257min，硫脲与美洛昔康的分离度为5.7，大于1.5，本法能实现硫脲与美洛昔康的完全分离，方法专属性良好。
[0029]实施例2：方法定量限与检测限
[0030]定量限溶液配制：取硫脲适量，用流动相溶解并稀释制成每1mL中约含硫脲0.06μg的溶液。
[0031]检测限溶液配制：取硫脲适量，用流动相溶解并稀释制成每1mL中约含硫脲0.02μg的溶液。
[0032]精密量取定量限溶液20μl连续进样6次，检测限溶液20μl进样1次，结果如下表1：
[0033]表1定量限与检测限实验结果
[0034]样品保留时间min峰面积信噪比定量限
‑
17.1000.264193.0定量限
‑
27.0830.2537145.8定量限
‑
37.0880.2699160.3
定量限
‑
47.0820.2382156.8定量限
‑
57.0770.2388115.9定量限
‑
67.0720.2261102.3平均值7.0840.2485/RSD0.2％6.9％/检测限7.0880.099126.3
[0035]定量限溶液连续进样6次，硫脲峰的保留时间RSD≤1.0％，峰面积RSD≤10％，信噪比最小为93.0；检测限溶液中，硫脲峰的信噪比大于3；本法灵敏度能满足硫脲的检测要求，方法灵敏度高。
[0036]实施例3：方法准确度与重复性实验
[0037]平行配制6份100％加标样品溶液，进行分析检测，按外标法以峰面积计算回收率，结果如下表2：
[0038]表2回收率实验结果
[0039]样品123456平均值RSD回收率89.52％89.58％88.98％88.45％88.35％88.53％88.90％0.7％
[0040]100％加标样品溶液的回收率在85～110％之间，RSD≤4.0％；本法准确度与重复性能满足硫脲的检测要求，方法准确度高，重复性良好。
[0041]实施例4：耐用性实验
[0042]通过将色谱条件的流速、流动相比例、柱温、及波长进行调整，考察测定结果不受影响的程度，结果如下表3：
[0043]表3耐用性实验结果
[0044][0045]各耐用性条件下，硫脲与美洛昔康分离度满足要求，硫脲的测得量与原条件的差值最大为0.001％；本法在检测波长238～242nm，流速0.4～0.6ml/mi本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱法检测美洛昔康中硫脲的方法，其特征在于：1)色谱条件：以CHIRALPAK IF
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34.6mm
×
250mm为色谱柱；以二乙胺
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正己烷
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异丙醇为流动相，其比例为0.1∶30～35∶70～65；流动相流速为0.4mL/min～0.6mL/min；柱温为25℃～35℃；检测波长为238nm～242nm；2)硫脲对照品溶液的配制：用流动相溶解稀释；3)供试品溶液的配制：用流动相溶解稀释；4)测定：精密量取硫脲对照品溶液与供试品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：李沙沙，邵雅丽，金杰鑫，胡雄林，沈小宁，
申请(专利权)人：南京红地生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：