表雄酮-17-腙有关物质的检测方法和应用技术

本发明专利技术涉及化学药物分析方法技术领域，尤其是涉及一种表雄酮

【技术实现步骤摘要】
表雄酮
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腙有关物质的检测方法和应用


[0001]本专利技术涉及化学药物分析方法
，尤其是涉及一种表雄酮
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腙有关物质的检测方法和应用。

技术介绍

[0002]表雄酮
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腙，其结构如下所示：
[0003][0004]表雄酮
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腙作为中间体，如果其本身含有杂质，那么在进行原料药生产过程中，杂质或杂质的转化物也有可能随之带入后期的生产中，而影响原料药的质量。因此，对于表雄酮
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腙中的杂质控制至关重要。
[0005]公开号为CN111693628A的专利申请中，记载了去氢表雄酮
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腙有关物质的检测方法，但由于合成工艺路线改变，以去氢表雄酮为起始原料，与水合肼缩合生成表雄酮
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腙，所控有关物质发生改变。具体合成路线如下：
[0006][0007]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0008]本专利技术的一个目的在于提供表雄酮
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腙有关物质的检测方法，能够保证各有关物质与有效成分的高效分离，从而更好地实现表雄酮
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腙的质量控制。
[0009]本专利技术的另一目的在于提供表雄酮
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腙有关物质的检测方法在表雄酮
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腙的质量控制中的应用。
[0010]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0011]表雄酮
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腙有关物质的检测方法，包括如下步骤：
[0012]采用高效液相色谱对供试品溶液进行检测；
[0013]所述高效液相色谱的检测条件包括：
[0014]检测波长为205～215nm；
[0015]以水作为流动相A，乙腈作为流动相B，进行梯度洗脱；
[0016]所述梯度洗脱的过程包括：0～10min，流动相A和流动相B的体积比为(58～62)﹕(38～42)；10～20min内，流动相A和流动相B的体积比由(58～62)﹕(38～42)变至(18～22)﹕(78～82)；20～35min，流动相A和流动相B的体积比为(18～22)﹕(78～82)；35～36min内，流动相A和流动相B的体积比由(18～22)﹕(78～82)变至(58～62)﹕(38～42)；36～45min，流动相A和流动相B的体积比为(58～62)﹕(38～42)。
[0017]在本专利技术的具体实施方式中，所述梯度洗脱的过程包括：0～10min，流动相A和流动相B的体积比为60﹕40；10～20min内，流动相A和流动相B的体积比由60﹕40变至20﹕80；20～35min，流动相A和流动相B的体积比为20﹕80；35～36min内，流动相A和流动相B的体积比由20﹕80变至60﹕40；36～45min，流动相A和流动相B的体积比为60﹕40。
[0018]在本专利技术的具体实施方式中，所述有关物质包括Ⅰ和Ⅱ，其结构式分别如下：
[0019][0020]其中，有关物质Ⅰ的分子式为C
19
H
28
O2，分子量为288.42；有关物质Ⅱ的分子式为C
38
H
56
N2O2，分子量为572.88；根据表雄酮
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腙的合成工艺，对表雄酮
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腙中含有的有关物质进行控制，通过本专利技术的高效液相色谱检测条件，可以实现一次性高效的分离出上述两种有关物质，建立表雄酮
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腙有关物质研究方法。
[0021]而采用公开号为CN111693628A的专利申请中所记载的检测方法研究表雄酮
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腙所控的两个有关物质，有关物质Ⅱ未能完全洗脱，延长洗脱时间后发现有关物质Ⅱ峰形不对称，且流动相为盐溶液，配制过程复杂，长时间洗脱易造成色谱柱损耗严重。
[0022]在本专利技术的具体实施方式中，所述检测波长可以为205nm、206nm、207nm、208nm、209nm、210nm、211nm、212nm、213nm、214nm、215nm等等，优选为208～212nm，更优选为210nm。
[0023]在本专利技术的具体实施方式中，所述高效液相色谱的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。具体的，所述色谱柱的可以为Agilent 5 TC
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C18(2)(4.6mm
×
250mm，5μm)色谱柱，Waters
ꢀꢀ
C18(4.6mm
×
250mm，5μm)色谱柱，或与其效能相当的色谱柱。
[0024]在本专利技术的具体实施方式中，所述检测的柱温为35～45℃，如可以为35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃、45℃等等，优选为38～42℃，更优选为40℃。
[0025]在本专利技术的具体实施方式中，所述梯度洗脱的流速为0.8～1.2mL/min，优选为0.9～1.1mL/min，更优选为1.0mL/min。
[0026]如在不同实施方式中，所述梯度洗脱的流速可以为0.8mL/min、0.85mL/min、0.9mL/min、0.95mL/min、1.0mL/min、1.05mL/min、1.1mL/min、1.15mL/min、1.2mL/min等等。
[0027]在本专利技术的具体实施方式中，所述供试品溶液可以为5～20μL，如5μL、10μL、15μL或20μL。
[0028]在本专利技术的具体实施方式中，所述检测条件包括：
[0029]检测波长为210nm；
[0030]所述梯度洗脱的过程包括：0～10min，流动相A和流动相B的体积比为60﹕40；10～
20min内，流动相A和流动相B的体积比由60﹕40变至20﹕80；20～35min，流动相A和流动相B的体积比为20﹕80；35～36min内，流动相A和流动相B的体积比由20﹕80变至60﹕40；36～45min，流动相A和流动相B的体积比为60﹕40；
[0031]所述梯度洗脱的流速为1.0mL/min；
[0032]所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，柱温为40℃。
[0033]采用上述检测条件，能够进一步提高表雄酮
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腙与有关物质之间的分离度，减小拖尾因子等等，保证检测的准确性。
[0034]在本专利技术的具体实施方式中，所述供试品溶液的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.表雄酮
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腙有关物质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：采用高效液相色谱对供试品溶液进行检测；所述高效液相色谱的检测条件包括：检测波长为205～215nm；以水作为流动相A，乙腈作为流动相B，进行梯度洗脱；所述梯度洗脱的过程包括：0～10min，流动相A和流动相B的体积比为(58～62)﹕(38～42)；10～20min内，流动相A和流动相B的体积比由(58～62)﹕(38～42)变至(18～22)﹕(78～82)；20～35min，流动相A和流动相B的体积比为(18～22)﹕(78～82)；35～36min内，流动相A和流动相B的体积比由(18～22)﹕(78～82)变至(58～62)﹕(38～42)；36～45min，流动相A和流动相B的体积比为(58～62)﹕(38～42)。2.根据权利要求1所述的表雄酮
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腙有关物质的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的过程包括：0～10min，流动相A和流动相B的体积比为60﹕40；10～20min内，流动相A和流动相B的体积比由60﹕40变至20﹕80；20～35min，流动相A和流动相B的体积比为20﹕80；35～36min内，流动相A和流动相B的体积比由20﹕80变至60﹕40；36～45min，流动相A和流动相B的体积比为60﹕40。3.根据权利要求1所述的表雄酮
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腙有关物质的检测方法，其特征在于，所述有关物质包括Ⅰ和Ⅱ，其结构式分别如下：4.根据权利要求1所述的表雄酮
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腙有关物质的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。5.根据权利要求1所述的表雄酮
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腙有关物质的检测方法，其特征在于，所述检测的柱温为35～45℃；优选的，所述检测的柱温为38～42℃；更优选的，所述检测的柱温...

【专利技术属性】
技术研发人员：申晓婷，王红芳，张辉，宋艳艳，姚凯，
申请(专利权)人：山西振东制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：