用于分子缀合或改造的串联重复癌症靶向肽及其在癌症治疗诊断学中的用途制造技术

分离的癌症靶向肽，其包含氨基酸序列PFLP(SEQ ID NO:1)或PELF(SEQ ID NO:2)的至少两个拷贝。还公开了用于治疗癌症的药物组合物。该组合物包含所述分离的癌症靶向肽和抗癌剂。还公开了双特异性抗癌抗体，其包含所述分离的癌症靶向肽和刺激T细胞活性的抗原结合肽。提供了通过施用所述药物组合物或所述双特异性抗癌抗体来治疗癌症的方法。还提供了通过将经放射性核素标记的癌症靶向肽施用于个体并对放射性核素的位置进行成像来诊断癌症的方法。放射性核素的位置进行成像来诊断癌症的方法。放射性核素的位置进行成像来诊断癌症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于分子缀合或改造的串联重复癌症靶向肽及其在癌症治疗诊断学中的用途

技术介绍

[0001]癌症的复发是一项重大的临床挑战。作为肿瘤中亚群存在的癌症干细胞对化学治疗药物和放射特别有抗性。参见Lee et al.,2015,FASEB J.29:Supplement 629.18。在常规化学治疗之后，肿瘤中癌症干细胞的比例升高是癌症复发的一个重要预测因子。参见Lee et al。
[0002]据报道，78kDa的葡萄糖调节蛋白(GRP78)(HSP70蛋白家族的成员)存在于多种癌细胞的表面上，但在正常细胞上不存在。参见Wang et al.,2016,Biomaterials 94:31
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44和Liu et al.2013,Clin.Cancer Res.19:6802
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11。GRP78还与癌细胞抗药性和干细胞样细胞行为二者有关，并进一步显示其是可靶向的细胞表面受体。参见Bachelder,2018。因此，GRP78是用于应会降低对正常细胞的损伤和降低复发的抗癌治疗的有吸引力的靶标。
[0003]先前已鉴定出与GRP78特异性结合的癌症靶向肽(cancer
‑
targeting peptide，CTP)。参见Wang et al。发现CTP以线性肽构象与GRP78的肽结合结构域(peptide
‑
binding domain，PBD)相互作用。这些CTP在与化学治疗药物多柔比星(doxorubicin)缀合时显示出增强这种药物的抗肿瘤效力，并且还靶向癌细胞和癌症干细胞二者，从而降低癌症的复发率。参见Liu et al。
[0004]需要开发对癌症干细胞具有更高亲和力的CTP并开发基于CTP的抗癌治疗方式。

技术实现思路

[0005]为了满足这种需要，公开了分离的癌症靶向肽，其包含氨基酸序列PFLP(SEQ ID NO:1)或PFLF(SEQ ID NO:2)的至少两个拷贝。
[0006]本文还公开了用于治疗癌症的药物组合物。该组合物包含所述分离的癌症靶向肽和抗癌剂。
[0007]此外，公开了双特异性抗癌抗体。这种抗体包含所述分离的癌症靶向肽和刺激T细胞活性的抗原结合肽。
[0008]此外，用于通过施用所述药物组合物或所述双特异性抗癌抗体来治疗癌症的方法二者均在本专利技术的范围内。
[0009]公开了另一种方法用于诊断癌症。该方法通过向个体施用经放射性核素标记的癌症靶向肽并使个体经受成像技术以确定该经放射性核素标记的癌症靶向肽的位置和量来进行，所述癌症靶向肽包含氨基酸序列PFLP(SEQ ID NO:1)或PFLF(SEQ ID NO:2)的至少两个拷贝。
[0010]本专利技术的数个实施方案的细节在下面的说明和附图二者中进行了阐述。本专利技术的所有特征、目的和优点将由该说明和附图以及所附权利要求书而显而易见。
附图说明
[0011]以下描述涉及附图，其中：
[0012]图1是显示对于四种指定的放射性标记肽中的每一种在注射到荷瘤小鼠中之后通过正电子发射断层成像(positron emission tomography，PET)分析确定的百分比注射剂量/克(％ID/g)的条形图。肽序列示于下表1中。
[0013]图2是显示注射有放射性标记肽P6、F4P6、P13或F4P13的荷瘤小鼠的肿瘤组织切片中的相对信号比的条形图。
[0014]图3是本专利技术的双特异性抗癌抗体构建体的图。α
‑
CD3＝抗CD3 scFv，Fc(K)＝具有杵(knob)二聚化序列的重链，Fc(H)＝具有臼(hole)二聚化序列的重链，F4P6
‑
TR
‑
CTP＝与GRP
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78结合的F4P6串联重复癌症靶向肽。
[0015]图4A是显示在不存在(PBMC)或存在(Ctrl
‑
BsAb和(F4P6
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BsAb)指定浓度的双特异性抗体的情况下TOV21G卵巢癌细胞与PBMC效应细胞孵育40小时之后的裂解百分比(裂解％)的条形图。
[0016]图4B是显示在不存在(PBMC)或存在(Ctrl
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BsAb和(F4P6
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BsAb)指定浓度的双特异性抗体的情况下NCI
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N87胃癌细胞与PBMC效应细胞孵育90小时之后的裂解百分比(裂解％)的条形图。
[0017]图5示意性地示出了抗癌胶束纳米复合物(micellar nanocomplex，MNC)。EGCG＝表没食子儿茶素
‑3‑
O
‑
没食子酸酯；oEGCG＝寡聚表没食子儿茶素
‑3‑
O
‑
没食子酸酯；PEG＝聚(乙二醇)；TR
‑
CTP＝串联重复癌症靶向肽。
[0018]图6是显示与所示的载剂、赫赛汀(Herceptin)、MNC
‑
赫赛汀或F4P6
‑
MNC
‑
赫赛汀一起孵育的BT474人乳腺癌细胞的存活百分比的条形图。
[0019]图7是在向小鼠中注射N87肿瘤细胞之后肿瘤体积与天数的图。用指定的治疗每周给小鼠注射一次，持续4周。*p＝0.041。
具体实施方式
[0020]如上所述，提供了分离的癌症靶向肽，其包含氨基酸序列PFLP(SEQ ID NO：1)的至少两个拷贝。
[0021]癌症靶向肽中的两个PFLP拷贝可以彼此重叠。例如，癌症靶向肽可以是RPFLPFLPY(SEQ ID NO：5)和RPFLPFLPYRPFLPFLPY(SEQ ID NO：6)。
[0022]另一种分离的癌症靶向肽包含PFLF(SEQ ID NO：2)的至少两个拷贝。这种肽的一些实例包括RPFLFPFLFY(SEQ ID NO：7)和RPFLFPFLFYRPFLFPFLFY(SEQ ID NO：8)。
[0023]上述癌症靶向肽可与癌细胞上的GRP
‑
78特异性结合。换句话说，不需要另外的氨基酸。因此，本专利技术涵盖不含序列RLLDT(SEQ ID NO：15)的任何上述癌症靶向肽。
[0024]同样在本专利技术范围内的是治疗癌症的药物组合物，其包含任何上述的分离的癌症靶向肽和抗癌剂。
[0025]在某些组合物中，抗癌剂是单克隆抗体，例如抗HER2/neu、抗PD
‑
1、抗PD
‑
L1或抗CTLA4。
[0026]在另一些组合物中，抗癌剂是化学治疗剂，例如多柔比星、长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、紫杉醇(paclitaxel)或伊立替康(irinotecan)。
[0027]此外，药物组合物中的抗癌剂可包括放射性同位素，例如
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.分离的癌症靶向肽，其包含氨基酸序列PFLP(SEQ ID NO：1)或PFLF(SEQ ID NO：2)的至少两个拷贝。2.权利要求1所述的分离的癌症靶向肽，其中所述肽包含SEQ ID NO：1的两个重叠拷贝。3.权利要求2所述的分离的癌症靶向肽，其具有氨基酸序列RPFLPFLPY(SEQ ID NO：5)或RPFLPFLPYRPFLPFLPY(SEQ ID NO：6)。4.权利要求1所述的分离的癌症靶向肽，其中所述肽包含SEQ ID NO：2的至少两个拷贝。5.权利要求4所述的分离的癌症靶向肽，其具有RPFLFPFLFY(SEQ ID NO：7)或RPFLFPFLFYRPFLFPFLFY(SEQ ID NO：8)的氨基酸序列。6.用于治疗癌症的药物组合物，其包含权利要求1所述的分离的癌症靶向肽以及抗癌剂。7.权利要求6所述的药物组合物，其还包含胶束纳米复合物，所述胶束纳米复合物具有包封所述抗癌剂的核心和包含所述分离的癌症靶向肽的壳。8.权利要求7所述的药物组合物，其中所述分离的癌症靶向肽与聚乙二醇缀合。9.权利要求8所述的药物组合物，其中所述抗癌剂是选自抗HER2/neu、抗PD
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1、抗PD
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L1和抗CTLA4的治疗性单克隆抗体。10.权利要求9所述的药物组合物，其还包含表没食子儿茶素
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O
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没食子酸酯，其中所述抗癌剂是抗HER2/neu单克隆抗体。11.权利要求8所述的药物组合物，其中所述抗癌剂是多柔比星、长春新碱、长春瑞滨、紫杉醇或伊立替康。12.权利要求6所述的药物组合物，其中所述抗癌剂包括放射性同位素。13.权利要求12所述的药物组合物，其中所述放射性同位素是
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【专利技术属性】
技术研发人员：游正博，陈铃津，王胜弘，
申请(专利权)人：游正博陈铃津，
类型：发明
国别省市：