本发明专利技术公开了一种枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱方法的构建及应用，该特征图谱采用超高效液相，通过优化检测方法，对枳实薤白桂枝汤样品的整体概貌进行表征和归属分析，充分展现了枳实薤白桂枝汤中各药味的色谱信息，充分体现了处方药味质量与产品质量的有效追溯和全面控制。其次，将该方法应用于处方中5个药味的药材和饮片检测及质量控制，实现药材到饮片到复方制剂样品的特征传递，达到质量传递和质量追溯的目的。该方法操作简便、省时高效，特征组分色谱信息全面、成分专属性强，为枳实薤白桂枝汤复方制剂开发和产品质量的过程控制提供科学有效的研究依据。科学有效的研究依据。科学有效的研究依据。
【技术实现步骤摘要】
枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建及应用
[0001]本专利技术涉及一种枳实薤白桂枝汤特征图谱的构建方法，尤其涉及一种可表征处方中各药味色谱信息，全面、快速、可靠的枳实薤白桂枝汤基准样品UPLC特征图谱的构建方法及应用。
技术介绍
[0002]枳实薤白桂枝汤来源于2018年发布的古代经典名方目录(第一批)第22首，原文出自汉
·
张仲景《金匮要略》，是治疗胸痹的经典验方。原文记载处方组成和制备方法为：枳实四枚，厚朴四两，薤白半斤，桂枝一两，瓜蒌实一枚(捣)。上五味，以水五升，先煮枳实、厚朴，取二升，去滓，内诸药，煮数沸，分温三服。本方的配伍原则为：瓜蒌、薤白为君药。薤白辛温，通阳散结，化痰散寒；瓜蒌性寒入肺，涤痰散结，开胸通痹。枳实、厚朴为臣药，枳实下气破结、消痞除满，厚朴燥湿化痰，下气除满。桂枝为佐药，通阳散寒，平冲降逆；诸药配伍，使胸阳振，痰浊降，阴寒消，气机畅，则胸痹而气逆上冲诸证可除。
[0003]经典名方的研究原则上要求应体现处方中各药味的质量属性，建立较全面反映基准样品或制剂的质量的检测方法，同时所建立的评价指标能反映药材、饮片、基准样品、复方制剂的相关性，能够说明研制全过程的量值传递情况，更好的控制复方制剂的内在质量。
[0004]枳实薤白桂枝汤中枳实、厚朴、桂枝的现代药学研究比较充分，质量标准和相关检测项目较为明确，在《2010版中国药典》各药味项下也均有相应含量指标的质量控制方法。瓜蒌、薤白属于中药研究领域中的难点品种，研究基础较为薄弱，2010版药典项下未规定含量和特征图谱等质量标准要求。由于瓜蒌、薤白药味中主要含挥发性、脂肪油等小极性物质，成分稳定性较差，检测分析和质量控制的难度较大。经典名方研究要求采用传统方式提取，一般采用水煎煮，瓜蒌、薤白中的挥发性成分、小极性有效成分在水溶液中的含量非常低，且不易检出。如何在水煎液中表征瓜蒌、薤白的活性成分，成为本方研究的重点。加之，复方中含有多个药味，化学成分复杂，将各药味中的不同极性组分在一张图谱上进行全面表征和有效分离，分析检测的难度非常大。
[0005]现有技术中对枳实薤白桂枝汤的质量标准研究较少，目前仅有2篇专利CN111759937A、CN114062563A分别采用HPLC方法建立了枳实薤白桂枝汤的指纹图谱和特征图谱，但两篇专利的图谱表征信息不够完善，色谱峰相对较少，均未体现处方中薤白的色谱峰信息。本方中薤白是处方之君药，亦为治疗胸痹之要药，是处方发挥临床疗效的关键，因此薤白色谱信息的表征对其复方制剂的质量控制和产品疗效的发挥具有非常重要的意义。
技术实现思路
[0006]专利技术目的：本专利技术旨在提供一种表征全面、高效的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法，解决了现有枳实薤白桂枝汤质量控制方法存在的色谱峰信息少、药味表征不全面、检测效率低、质控效果差等问题；本专利技术的另一目的旨在提供所述方法在处方相应药材、饮片的检测和质量控制中的应用，实现了一种质量传递和质量追溯的评价方法，即采用
一套方法对产业链多个环节样品质量的一致性进行评价，达到产品全过程的质量追溯和控制。
[0007]技术方案：本专利技术所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法，包含以下步骤：
[0008](1)对照品加入溶剂制成对照品溶液；
[0009](2)取枳实薤白桂枝汤作为供试品，加入溶剂处理后制成供试品溶液；
[0010](3)液相色谱检测；
[0011](4)特征图谱的建立：呈现22个共有峰，通过对照品指认出10个特征峰，分别为尿苷、腺苷、鸟苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、桂皮醛、和厚朴酚、厚朴酚。
[0012]进一步地，步骤(4)中所述各共有峰的相对保留时间如下：
[0013]以鸟苷为基准峰S1，8个共有峰的相对保留时间如下：0.68(
±
10％)、0.75(
±
10％)、0.94(
±
10％)、1.00、1.10(
±
10％)、1.82(
±
10％)、2.34(
±
10％)、3.01(
±
10％)；
[0014]以柚皮苷为基准峰S2，14个共有峰的相对保留时间如下：0.81(
±
10％)、0.85(
±
10％)、0.88(
±
10％)、0.94(
±
10％)、1.00、1.06(
±
10％)、1.13(
±
10％)、1.23(
±
10％)、1.33(
±
10％)、1.37(
±
10％)、1.44(
±
10％)、1.47(
±
10％)、1.52(
±
10％)、1.56(
±
10％)。
[0015]进一步地，步骤(1)中所述对照品及其溶液浓度如下：尿苷10
‑
50μg/mL、腺苷5
‑
50μg/mL、鸟苷5
‑
50μg/mL、芸香柚皮苷30
‑
100μg/mL、柚皮苷0.1
‑
1.0mg/mL、橙皮苷0.1
‑
1.0mg/mL、新橙皮苷0.1
‑
1.0mg/mL、桂皮醛5
‑
50μg/mL、和厚朴酚10
‑
50μg/mL、厚朴酚10
‑
100μg/mL。
[0016]进一步地，所述供试品为枳实薤白桂枝汤提取液(煎煮液)、基准样品(冻干粉)、制剂中间产品或制剂成品。
[0017]进一步地，步骤(2)中所述加入溶剂处理的具体步骤为：以水或甲醇
‑
水溶液为溶剂，每30～50mL加入1g供试品，超声处理，溶解。
[0018]进一步地，步骤(3)中所述色谱条件具体为：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相A：乙腈、流动相B：0.05％～1％体积分数的酸性溶液，检测波长：210～360nm，流速：0.25～0.35mL/min；柱温：20℃～40℃；按如下的洗脱梯度进行洗脱：
[0019][0020]进一步地，所述色谱柱柱长为100～150mm，色谱柱填料粒径为1.7～1.9μm。
[0021]进一步地，所述供试品溶液检测的进样量为1～2μL。
[0022]所述枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法可应用于表征瓜蒌、薤白、枳实、厚
朴和桂枝5个药味的色谱信息，并检测控制枳实薤白桂枝汤提取物及其制剂的质量。其中，瓜蒌、薤白、枳实、厚朴、桂枝(5个药味)对应药材和饮片作为供试品溶液的制备过程为：取药材或饮片粉末适量，加入10～50％体积分数的甲醇15～50ml，超声处理30分钟，放冷摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
[0023]进一步地，所述22个共有峰中，峰2<本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)对照品加入溶剂制成对照品溶液；(2)取枳实薤白桂枝汤作为供试品，加入溶剂处理后制成供试品溶液；(3)液相色谱检测；(4)特征图谱的建立：呈现22个共有峰，通过对照品指认出10个特征峰，分别为尿苷、腺苷、鸟苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、桂皮醛、和厚朴酚、厚朴酚。2.根据权利要求1所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(4)中所述各共有峰的相对保留时间如下：以鸟苷为基准峰S1，8个共有峰的相对保留时间如下：0.68(
±
10％)、0.75(
±
10％)、0.94(
±
10％)、1.00、1.10(
±
10％)、1.82(
±
10％)、2.34(
±
10％)、3.01(
±
10％)，分别对应峰1～峰8；以柚皮苷为基准峰S2，14个共有峰的相对保留时间如下：0.81(
±
10％)、0.85(
±
10％)、0.88(
±
10％)、0.94(
±
10％)、1.00、1.06(
±
10％)、1.13(
±
10％)、1.23(
±
10％)、1.33(
±
10％)、1.37(
±
10％)、1.44(
±
10％)、1.47(
±
10％)、1.52(
±
10％)、1.56(
±
10％)，分别对应峰9～峰22。3.根据权利要求1所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述对照品及其溶液浓度如下：尿苷10
‑
50μg/mL、腺苷5
‑
50μg/mL、鸟苷5
‑
50μg/mL、芸香柚皮苷30
‑
100μg/mL、柚皮苷0.1
‑
【专利技术属性】
技术研发人员：祝倩倩，石海培，陈盛君，李松，王协和，浦香兰，袁健，李淑娟，周海琴，王琪，王慧敏，
申请(专利权)人：江阴天江药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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