【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药分析和中药质量控制领域，具体涉及一种荜茇样品特征图谱的构建方法及检测方法。
技术介绍
1、荜茇为胡椒科植物荜茇piper longum l.的干燥近成熟或成熟果穗。其味辛，性温。归脾、胃、肾、膀胱经。具有温中散寒、行气止痛之功效。用于胃寒呕逆，脘腹冷痛，寒疝腹痛，寒湿瘀滞，小便浑浊。现代药理研究发现，荜茇还兼有抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化，调节体内代谢以及免疫调节等作用。
2、荜茇在临床上的使用多以汤剂为主，汤剂的有效成分含量直接影响中药的临床有效性，而依靠现代设备生产的中药配方颗粒，正是以标准汤剂为基准进行生产的。为保证从药材到标准汤剂到配方颗粒，这个过程中化学成分的一致性，亟需一种检测方法，该检测方法不仅能够检测荜茇药材，还适用于荜茇标准汤剂及其中药配方颗粒等的检测，对荜茇现代制剂的质量检测与控制至关重要。2020年版《中国药典》将胡椒碱的含量作为荜茇的质量评价指标，但由于中药有效成分多样性及复杂性，单一成分的含量测定不足以说明药材的内在质量，亦缺乏专属性。而uplc特征图谱能够提供更为全面、丰富的信息。市场上同为胡椒科属的假蒟因与荜茇外形相似，常有混用现象。文献报道(崔国静,刘芳.荜茇与其伪品假蒟[j].首都食品与医药,2015,0(9)；许亚玲,田静,舒娟.荜茇与其伪品假蒟子的鉴别[j].贵阳中医学院学报,2005,27(4).等)主要采用原植物和药材饮片的性状、理化、显微、薄层鉴别和胡椒碱含量，性状鉴别依赖于有经验的中药鉴定人员，外观相似容易出错，且对于经水提取后失去药材性状的标准汤
技术实现思路
1、专利技术要解决的问题
2、为了解决现有技术的上述问题，本专利技术的目的在于提供一种荜茇样品的特征图谱的构建方法，通过该方法构建的特征图谱能整体控制荜茇药材、饮片、水提物以及标准汤剂和/或配方颗粒等的质量。
3、进一步地，本专利技术的目的还在于提供一种荜茇样品的检测方法，该方法简单高效、结果客观、精密可靠、专属性强、灵敏度高，稳定性和耐受性好，并且能够区分荜茇的真伪，以及更进一步地，可以鉴别荜茇与假蒟。
4、用于解决问题的方案
5、通过专利技术人长期的研究，发现通过如下技术方案的实施能够解决上述技术问题：
6、[1]一种荜茇样品特征图谱的构建方法，其中，所述构建方法包括如下步骤：
7、(a)对照品溶液制备：包括分别取荜茇宁对照品、胡椒碱对照品、假荜茇酰胺b对照品制备对照品溶液的步骤；
8、(b)供试品溶液制备：用提取溶剂对荜茇样品进行提取，收集提取液，制备供试品溶液，所述荜茇样品为荜茇药材、荜茇饮片、荜茇水提物、荜茇标准汤剂和/或荜茇配方颗粒；
9、(c)特征图谱的建立：采用超高效液相色谱法对所述对照品溶液和所述供试品溶液进行检测，相应获得对照图谱和检测图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析建立特征图谱；
10、所述超高效液相色谱法的色谱条件包括：
11、固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径为1.6～1.8μm的色谱柱；
12、流动相：以乙腈为流动相a，以冰醋酸或0.1～0.5wt％的冰醋酸水溶液为流动相b；
13、梯度洗脱程序：
14、0min～5min，所述流动相a的体积百分比由45％上升至62％；5min～7min，所述流动相a的体积百分比由62％上升至70％；7min～10min，所述流动相a的体积百分比由70％上升至85％；10min～15min，所述流动相a的体积百分比由85％上升至90％；15min～23min，所述流动相a的体积百分比保持90％。
15、[2]根据[1]所述的构建方法，其中，所述特征图谱包含10个峰，其中峰1为荜茇宁，峰2为胡椒碱，峰5为假荜茇酰胺b。
16、[3]根据[1]或[2]所述的构建方法，其中，以峰5为参照峰，计算峰3、峰4、峰6、峰7、峰8、峰9、峰10与峰5的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％之内，所述峰3、峰4、峰6、峰7、峰8、峰9和峰10对应的规定值分别为0.52、0.92、1.24、1.69、1.92、1.98和2.04。
17、[4]根据[1]～[3]任一技术方案所述的构建方法，其中，供试品溶液制备包括：
18、用甲醇或包含甲醇体积百分比为70％～90％的甲醇水溶液对荜茇药材进行超声提取，收集提取液，制备供试品溶液；
19、或者，用甲醇或包含甲醇体积百分比为50％～90％的甲醇水溶液对荜茇标准汤剂进行超声提取，收集提取液，制备供试品溶液；
20、或者，用甲醇或包含甲醇体积百分比为50％～90％的甲醇水溶液对荜茇配方颗粒进行超声提取，收集提取液，制备供试品溶液；
21、[5]根据[4]所述的构建方法，其中，所述超声提取的时长为15min～60min，功率为250w～300w，频率为35khz～45khz。
22、[6]根据[1]～[5]任一技术方案所述的构建方法，其中，所述对照品溶液制备包括加甲醇或者包含甲醇体积百分比为70％～90％的甲醇水溶液制成每1ml含荜茇宁对照品5μg～20μg、胡椒碱对照品10μg～50μg、假荜茇酰胺对照品b2μg～25μg的对照品溶液。
23、[7]根据[1]～[6]任一技术方案所述的构建方法，其中，所述对照品溶液制备还包括取适量荜茇对照药材，加入甲醇或包含甲醇体积百分比为50％～90％的甲醇水溶液，超声处理30分钟，摇匀，滤过，即得。
24、[8]根据[1]～[7]任一技术方案所述的构建方法，其中，所述色谱柱的柱长为100mm，内径为2.1mm；所述色谱条件还包括：流速为0.25ml/min～0.35ml/min；和/或，柱温为25℃～35℃；和/或，检测波长为250nm～280nm。
25、[9]本专利技术还提供一种荜茇样品的检测方法，其中，所述检测方法包括如下步骤：
26、用提取溶剂对待测荜茇样品进行提取，收集提取液，制备待测品溶液；所述荜茇样品为荜茇药材、荜茇饮片、荜茇水提物、荜茇标准汤剂和/或荜茇配方颗粒；
27、采用超高效液相色谱法对所述待测品溶液进行检测，并将检测所得检测图谱与权利要求1～8任一项所述的构建方法构建的特征图谱进行比较以检测荜茇样品的质量和/或真伪；
28、固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径为1.6～1.8μm的色谱柱；
29、本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种荜茇样品特征图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述特征图谱包含10个峰，其中峰1为荜茇宁，峰2为胡椒碱，峰5为假荜茇酰胺B。
3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，以峰5为参照峰，计算峰3、峰4、峰6、峰7、峰8、峰9、峰10与峰5的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％之内，所述峰3、峰4、峰6、峰7、峰8、峰9和峰10对应的规定值分别为0.52、0.92、1.24、1.69、1.92、1.98和2.04。
4.根据权利要求1～3任一项所述的构建方法，其特征在于，供试品溶液制备包括：
5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述超声提取的时长为15min～60min，功率为250W～300W，频率为35kHz～45kHz。
6.根据权利要求1～5任一项所述的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液制备包括加甲醇或者包含甲醇体积百分比为70％～90％的甲醇水溶液制成每1ml含荜茇宁对照品5μg～20μg、胡椒碱对照品10μ
7.根据权利要求1～6任一项所述的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液制备还包括取适量荜茇对照药材，加入甲醇或包含甲醇体积百分比为50％～90％的甲醇水溶液，超声处理30分钟，摇匀，滤过，即得。
8.根据权利要求1～7任一项所述的构建方法，其特征在于，所述色谱柱的柱长为100mm，内径为2.1mm；所述色谱条件还包括：流速为0.25mL/min～0.35mL/min；和/或，柱温为25℃～35℃；和/或，检测波长为250nm～280nm。
9.一种荜茇样品的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
10.权利要求9所述的检测方法在鉴别荜茇与假蒟中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种荜茇样品特征图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述特征图谱包含10个峰，其中峰1为荜茇宁，峰2为胡椒碱，峰5为假荜茇酰胺b。
3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，以峰5为参照峰，计算峰3、峰4、峰6、峰7、峰8、峰9、峰10与峰5的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％之内，所述峰3、峰4、峰6、峰7、峰8、峰9和峰10对应的规定值分别为0.52、0.92、1.24、1.69、1.92、1.98和2.04。
4.根据权利要求1～3任一项所述的构建方法，其特征在于，供试品溶液制备包括：
5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述超声提取的时长为15min～60min，功率为250w～300w，频率为35khz～45khz。
6.根据权利要求1～5任一项所述的构建方...
【专利技术属性】
技术研发人员：张宇静，顾芹英，刘慧，顾超，翟燕娟，张云天，李松，陈盛君，周海琴，浦香兰，过科家，
申请(专利权)人：江阴天江药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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