一种切片透化剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种切片透化剂及其制备方法；切片透化剂按重量份数计，组分包括：多聚甲醛10

【技术实现步骤摘要】
一种切片透化剂及其制备方法


[0001]本专利技术涉及切片
，尤其涉及一种切片透化剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]纯酒精不能与石蜡相溶，还需用能与酒精和石蜡相溶的媒浸液，替换出组织内的酒精，材料块在这类媒浸液中浸渍，出现透明状态，此液即称透化剂，透化剂浸渍过程称透明；常用的透明剂有二甲苯、苯、氯仿、正丁醇等；二甲苯溶液具有良好的脱蜡性和透明性，但二甲苯溶液具有中等毒性，二甲苯蒸汽在1000
×
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‑6以上，除了伤害粘膜、刺激呼吸道外，还呈现兴奋、麻醉作用，甚至会造成出血性肺气肿而致死；长期接触二甲苯溶液会影响人体造血系统，引起再生障碍性贫血及白血病，同时对雄雌动物生殖系统有明显影响。
[0003]硬组织(骨骼、牙齿等)疾病，尤其是骨质疏松等骨科疾病，是常见且危害严重的疾病，组织切片技术是研究病理过程的重要手段；骨等硬组织切片的传统方法一般是将硬组织进行固定、脱钙、包埋及切片，再染色观察；目前市面上并没有硬组织切片专用的透化剂。
[0004]因此，亟需一种硬组织切片专用的切片透化剂。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种切片透化剂及其制备方法。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：
[0007]本专利技术的第一方面是提供一种切片透化剂，按重量份数计，组分包括：
[0008][0009][0010]优选地，按重量份数计，组分包括：
[0011][0012]更优选地，按重量份数计，组分包括：
[0013][0014]优选地，所述切片为硬组织切片。
[0015]本专利技术的第二方面是提供一种上述切片透化剂的制备方法，步骤包括：
[0016]依次将氢氧化钠、多聚甲醛、乙二胺四乙酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠溶于去离子水中，即得所述切片透化剂。
[0017]优选地，所述多聚甲醛的溶解温度为60℃
‑
70℃。
[0018]优选地，所述切片透化剂的保存温度为2℃
‑
5℃，保存条件为避光保存。
[0019]本专利技术采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
[0020]本专利技术的切片透化剂通过透化作用将组织切片透明化处理，处理后的切片在HE等染色中表现更好，不容易沾染浮色，显示更清晰。
附图说明
[0021]图1为小鼠下肢硬组织切片；其中，图1A为未采用本专利技术切片透化剂处理的小鼠下肢硬组织切片，图1B为采用本专利技术切片透化剂处理的小鼠下肢硬组织切片；
[0022]图2为去分化骨旁骨肉瘤切片；其中，图2A为未采用本专利技术切片透化剂处理的去分化骨旁骨肉瘤切片，图2B为采用本专利技术切片透化剂处理的去分化骨旁骨肉瘤切片。
具体实施方式
[0023]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0024]需要说明的是，在不冲突的情况下，本专利技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
[0025]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明，但不作为本专利技术的限定。
[0026]实施例1
[0027]本实施例提供一种硬组织切片专用的切片透化剂的制备方法，步骤包括：
[0028]将42.5g氢氧化钠(NaOH)溶于700mL去离子水中，搅拌至溶解后，加入20g多聚甲醛(购于国药(沪试)CAS号：30525
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‑
4，商品编号：80096618)，65℃搅拌至溶解后，加入100g乙二胺四乙酸(EDTA)，搅拌至溶解后，依次加入48.693g磷酸氢二钠(Na2HPO4)以及5.023g磷酸二氢钠(NaH2PO4)，搅拌至溶解后，加入去离子水，定容至1L，即得所述切片透化剂，将所述切片透化剂置于4℃避光保存。
[0029]实施例2
[0030]本实施例提供另一种硬组织切片专用的切片透化剂的制备方法，步骤包括：
[0031]将40.7g氢氧化钠(NaOH)溶于700mL去离子水中，搅拌至溶解后，加入17g多聚甲醛(购于国药(沪试)CAS号：30525
‑
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‑
4，商品编号：80096618)，65℃搅拌至溶解后，加入90g乙二胺四乙酸(EDTA)，搅拌至溶解后，依次加入45.874g磷酸氢二钠(Na2HPO4)以及4.541g磷酸二氢钠(NaH2PO4)，搅拌至溶解后，加入去离子水，定容至1L，即得所述切片透化剂，将所述切片透化剂置于4℃避光保存。
[0032]实施例3
[0033]本实施例提供另一种硬组织切片专用的切片透化剂的制备方法，步骤包括：
[0034]将45.2g氢氧化钠(NaOH)溶于700mL去离子水中，搅拌至溶解后，加入25g多聚甲醛(购于国药(沪试)CAS号：30525
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89
‑
4，商品编号：80096618)，65℃搅拌至溶解后，加入110g乙二胺四乙酸(EDTA)，搅拌至溶解后，依次加入50.267g磷酸氢二钠(Na2HPO4)以及6.041g磷酸二氢钠(NaH2PO4)，搅拌至溶解后，加入去离子水，定容至1L，即得所述切片透化剂，将所述切片透化剂置于4℃避光保存。
[0035]应用实施例
[0036]将实施例1中制备的切片透化剂应用于硬组织切片中，步骤包括：
[0037]将硬组织切片置于脱塑剂(乙二醇乙醚乙酸酯)中脱塑处理20min后，依次加入乙醇丙酮处理2min
‑
10min、无水乙醇处理5min
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10min、90％乙醇处理5min、80％乙醇处理5min后，用蒸馏水浸泡5min，重复2次，最后，将硬组织切片置于所述切片透化剂中透化30min
‑
60min，即可进行后续染色、观察等操作。
[0038]结果如图1
‑
2所示，使用本专利技术的切片透化剂透化处理后的切片标本出现透明化表现，进行HE染色不易出现染色剂沾染到标本上至切片显微结构显示不清的情况；采用本专利技术的切片透化剂透化处理后的切片细胞核显色良好，染色质和核仁均展示清晰，而未采用本专利技术的切片透化剂透化处理的标本吸附了较多染色剂而导致显示不佳。
[0039]综上所述，本专利技术的切片透化剂通过透化作用将组织切片透明化处理，处理后的切片在HE等染色中表现更好，不容易沾染浮色，显示更清晰。
[0040]以上所述仅为本专利技术较佳的实施例，并非因此限制本专利技术的实施方式及保护范围，对于本领域技术人员而言，应当能够意识到凡运用本专利技术说明书及图示内容所作出的等同替换和显而易见的变化所得到的方案，均应当包含在本专利技术的保护范围内。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种切片透化剂，其特征在于，按重量份数计，组分包括：2.根据权利要求1所述的切片透化剂，其特征在于，按重量份数计，组分包括：3.根据权利要求2所述的切片透化剂，其特征在于，按重量份数计，组分包括：4.根据权利要求1所述的切片透化剂，其特征在于，所述切片为硬组织切片。5.一种如权利要求1
‑
4任一项所述切片透化剂的制备方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：殷俊辉，张长青，
申请(专利权)人：上海市第六人民医院，
类型：发明
国别省市：