【技术实现步骤摘要】
一种检测猴D型逆转录病毒的引物探针组合物、试剂盒及检测方法
[0001]本专利技术属于分子生物学
,具体涉及一种检测猴D型逆转录病毒的引物探针组合物、试剂盒及检测方法。
技术介绍
[0002]猴逆转录病毒(Simian type D retrovirus,SRV)属于逆转录病毒科,肿瘤病毒亚科的D型病毒,也叫猴D型逆转录病毒。SRV是负链RNA病毒,内含逆转录酶,该病毒在自然宿主猕猴中致病率高,容易引发猴群大批死亡,是一种严重干扰猴健康的传染性病原。
[0003]猕猴和人类在形态结构、生理生化等方面相似度极高,是解决人类某些疾病和发病机制的理想实验动物。我国是猕猴资源的富产国,南方多个省份的猴人工养殖场已成为国际试验用猴的出口基地,近年来医药技术保持高速发展态势,对实验猴的需求持续增加,然而猴群的引入和出口均存在一定的安全隐患,需要严格把控引入猴的检疫,定期监控猴群的病原体。SRV是SPF级实验猴必检病原体之一,目前SRV被发现存在8个血清型,我国目前发现流行的血清型为猴逆转录病毒血清型4、血清型5和血清型8, ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测猴D型逆转录病毒的引物探针组合物,包括反转录引物SRV
‑
RT.RP,检测猴D型逆转录病毒4型的上游引物P
‑
SRV4
‑
F、下游引物P
‑
SRV4
‑
R和探针SRV4
‑
P,检测猴D型逆转录病毒5型的上游引物P
‑
SRV5
‑
F、下游引物P
‑
SRV5
‑
R和探针SRV5
‑
P,检测猴D型逆转录病毒8型的上游引物P
‑
SRV8
‑
F、下游引物P
‑
SRV8
‑
R和探针SRV8
‑
P,其特征在于:所述SRV
‑
RT.RP的序列为5
’‑
CTTCCTGGTGTGGCTCTAAT
‑3’5’‑
CTTCCTGGTGTGGCTCTAGC
‑3’
;所述P
‑
SRV4
‑
F的序列为5
’‑
TGCCTCACACCCCTCGC
‑3’
;所述P
‑
SRV4
‑
R的序列为5
’‑
CCTGACCTTGTCCATCTAC
‑3’
;所述SRV4
‑
P的序列为5
’‑
CACAGCACTTCCCTCTTG
‑3’
;所述P
‑
SRV5
‑
F的序列为5
’‑
TGACCCTGACGATGACGAC
‑3’
;所述P
‑
SRV5
‑
F的序列为5
’‑
TTGTAAGGAGGTGGACGAGTT
‑3’
;所述SRV5
‑
P的序列为5
’‑
TATCTGGCTGCCGCATCCG
‑3’
;所述P
‑
SRV8
‑
F的序列为5
’‑
CTGCTATTCGCCCTTAC
‑3’
;所述P
‑
SRV8
‑
F的序列为5
’‑
CACCCTCCTTTATCCTTATT
‑3’
;所述SRV8
‑
P的序列为5
’‑
TATCCGCCTTTGTTCG
‑3’
。2.一种检测猴D型逆转录病毒的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括如权利要求1所述的引物探针组合物。3.如权利要求2所述的检测猴D型逆转录病毒的试剂盒,其特征在于:所述引物探针组合物中所述SRV
‑
RT.RP、所述P
‑
SRV4
‑
F、所述P
‑
SRV4
‑
R、所述SRV4
‑
P、所述P
‑
SRV5
‑
F、所述P
‑
SRV5
‑
R、所述SRV5
‑
P、所述P
‑
SRV8
‑
F、所述P
‑
SRV8
‑
R和所述SRV8
‑
P的终浓度均为0.1mM
‑
1mM。4.如权利要求2所述的检测猴D型逆转录病毒的试剂盒,其特征在于:所述SRV4
‑
P、所述SRV5
‑
P和所述SRV8
‑
P在5
’
端标记的荧光基团为FAM、VIC、HEX、CY5、Texas Red中的任一种,且各探针在5
’
端标记的荧光基团互不相同;所述SRV4
‑
P、所述SRV5
‑
P和是SRV8
‑
P在3
’
端标记的荧光基团为BHQ1和BHQ2中的任一种。5.如权利要求2所述的检测猴D型逆转录病毒的试剂盒,其特征在于:还包括定量标准品1
‑
7;所述定量标准品1为1.0
×
101copies/μl的PUC57
‑
SRV4、1.0
×
101copies/μl的PUC57
‑
SRV5和1.0
...
【专利技术属性】
技术研发人员:张若璇,袁冰,徐国东,罗祥,陈连栋,
申请(专利权)人:武汉珈创生物技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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