一种寻骨风样品的质量控制方法技术

本发明专利技术公开了一种寻骨风样品的质量控制方法，包括以下步骤：(1)制备参照物溶液和供试品溶液；以芦丁和马兜铃酸Ⅰ为对照品参照物，分别制备对照品参照物溶液；(2)分别吸取参照物溶液与供试品溶液进行超高效液相色谱分析，构建待测样品的特征图谱，其特征图谱包括至少9个特征峰，特征峰中存在一特征峰对应芦丁对照品参照物峰，存在一特征峰对应马兜铃酸Ⅰ对照品参照物峰；(3)通过步骤(2)中获得的特征图谱，进行待测样品的定性分析；以芦丁为含量测定指标，以马兜铃酸Ⅰ为限量测定指标，进行待测样品的定量分析。本发明专利技术方法操作简单，经过方法学验证，重现性、稳定性好，回收率可靠，检测成本低，检测效率高。检测效率高。检测效率高。

【技术实现步骤摘要】
一种寻骨风样品的质量控制方法


[0001]本专利技术涉及药物质量控制方法，尤其涉及一种全面控制的寻骨风样品的质量控制方法。

技术介绍

[0002]寻骨风为马兜铃科植物绵毛马兜铃Aristolochia mollissima Hance的干燥全草(中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典[S].人民卫生出版社,1977:251)。寻骨风中含有氨基酸类、马兜铃内酯、马兜铃酸I、马兜铃酸萜酯I、β一谷甾醇和银袋内脂乙,此外，它还含有马兜铃酸倍半萜酯及39个已知化合物(彭国平,楼凤昌,王颖,等.马兜铃酸的倍半萜的酯类化合物
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.绵毛马兜铃中马兜铃酸萜酯Ⅰ的结构鉴定[J].药学学报,1996,31(6):446
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450)。其味辛、苦，性平。具有祛风、通络，止痛之功效，可用于治疗风湿痹痛，关节酸痛等症(王秀兰,洪宗超,孙伟,等.寻骨风药材质量标准研究[J].湖北中医杂志,2018,40(05):54
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58)。
[0003]现代药理作用与临床应用研究表明，寻骨风在抗炎、镇痛(陈铎葆,徐冰,李兵,等.寻骨风对抗炎、镇痛作用的研究[J].基层中药杂志,2001(01):9
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10)，抗风湿(王雪,刘为忠,沈云修,等.寻骨风化学成分研究[J].山东农业科学,2010(04):34
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36)，治疗类风湿性关节炎(郭春慧,王东巧,杨震.寻骨风散外敷治疗骨痹131例[J].中医外治杂志,2001(01):16
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17)，坐骨神经痛(张世友.寻骨风药酒治疗坐骨神经痛[J].河南赤脚医生,1976(01):48)，疟疾，外伤出血、乳痈及多种化脓性感染(夏侯国论,李小花,范小娜.寻骨风中微量元素的测定及其对药物配伍的影响[J].时珍国医国药,2010,21(03):749
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750)等方面都有较好的疗效。
[0004]中药配方颗粒是由单味中药饮片经水提、浓缩、干燥、制粒而成，是饮片改革的一种新形式，相比于传统饮片汤剂具有方便携带，使用简单的特性，能够满足现代快节奏工作与生活的要求。近年来，中药配方颗粒快速发展，多个中药品种的配方颗粒国家标准相继出台，为规范中药配方颗粒的生产，推动中药现代化做出了巨大贡献。寻骨风配方颗粒是寻骨风药材经过现代工艺提取、浓缩、干燥、制粒而成，保留了寻骨风的临床效果，同时兼顾了使用的便携性。
[0005]关于寻骨风药材的质量控制手段目前已有部分报道。1992年版《中药材》标准、《河南地方中药材标准》中，采用性状、茎横切面及粉末显微鉴别、理化鉴别作为控制寻骨风药材质量的标准(河南省卫生厅.河南省中药材标准[S].郑州:中原农民出版社,1992:39
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40)。刘超等人建立RP
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HPLC法对寻骨风药材中马兜铃酸A进行定量研究(刘超,陈蕴,赵小磊,等.RP
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HPLC法测定寻骨风中马兜铃酸A的含量[J].中草药,2003(12):87
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89)。王秀兰等人建立寻骨风药材的质量标准，对寻骨风药材的性状、鉴别(显微、薄层)、各项检查(水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物)、含量测定等项目进行了研究(王秀兰,洪宗超,孙伟,等.寻骨风药材质量标准研究[J].湖北中医杂志,2018,40(05):54
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58)。寻骨风目前未收录于2020年版中国药典，虽然有文献对寻骨风药材的质量控制进行了部分研究，但都未建立全
面、有效、系统的质量评价方法及标准，如暂未有对寻骨风药材特征图谱进行分析研究，含量测定方面，均集中在毒性成分马兜铃酸Ⅰ，未对寻骨风中的有效成分进行定量分析研究，其有效性评价手段和整体质量的控制方法建立还存在很多不足。此外，已有的文献资料表明寻骨风的质量控制研究主要是集中在药材上，对于寻骨风配方颗粒质量控制的研究暂未检索到。因此，本专利技术专利通过多种分析手段相结合的方式，对寻骨风配方颗粒的整体概貌、有效成分、毒性成分进行全面控制，确保产品质量的有效性和安全性。

技术实现思路

[0006]专利技术目的：本专利技术旨在提供一种重现性、稳定性好，回收率可靠，检测成本低，检测效率高的寻骨风样品的质量控制方法。
[0007]技术方案：本专利技术的一种寻骨风样品的质量控制方法，包括以下步骤：
[0008](1)选取寻骨风样品，并制备供试品溶液；以寻骨风为对照药材，制备对照药材的参照物溶液；以芦丁和马兜铃酸Ⅰ为对照品参照物，分别制备对照品参照物溶液；
[0009]优选的，取寻骨风配方颗粒0.2g～1.0g，研细，加入水或10％～70％甲醇提取，取续滤液，即得供试品溶液；
[0010]优选的，取寻骨风对照药材0.5g～2g，加入30％～70％甲醇提取，取续滤液，作为对照药材参照物溶液；另取芦丁对照品、马兜铃酸Ⅰ对照品适量，加甲醇水溶液溶解，作为对照品参照物溶液；
[0011](2)分别吸取参照物溶液与供试品溶液进行超高效液相色谱分析，构建待测样品的特征图谱，其特征图谱包括至少9个特征峰，特征峰中存在一特征峰对应芦丁对照品参照物峰，存在一特征峰对应马兜铃酸Ⅰ对照品参照物峰；
[0012]其中，优选的，分别吸取参照物溶液与供试品溶液0.5μl～2μl，测定；
[0013](3)通过步骤(2)中获得的特征图谱，进行待测样品的定性分析；以芦丁为含量测定指标，以马兜铃酸Ⅰ为限量测定指标，进行待测样品的定量分析。
[0014]进一步地，还包括通过薄层色谱法对待测样品进行定性分析，使用寻骨风对照药材作为参照，判断薄层板上待测样品与对照药材的斑点是否一一对应；若是，则进行步骤(1)～(3)，若否则待测样品为不合格样品。；
[0015]其中，取寻骨风配方颗粒0.2g～1.0g，加有机溶剂提取，取续滤液，即得供试品溶液；取寻骨风对照药材0.5g～2g，加有机溶剂提取，取续滤液，即得对照药材参照物溶液。
[0016]进一步地，展开剂包括甲苯、丙酮和甲酸。优选的，薄层板为硅胶G，展开剂为展开剂为甲苯
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丙酮
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甲酸(9︰1︰0.5)。
[0017]进一步地，步骤(1)中，制备参照物溶液或/和供试品溶液的提取剂为水或体积浓度为10％～70％的甲醇水溶液。
[0018]更进一步地，制备参照物溶液中，每克寻骨风相应的提取剂使用量为5ml～50ml，提取时间为15～60分钟。
[0019]进一步地，步骤(1)中，芦丁对照品参照物溶液浓度为20～80μg/ml；马兜铃酸Ⅰ对照品参照物溶液浓度为3～15μg/ml。
[0020]进一步地，所述超高效液相色谱分析的条件如下：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05％～0.2％磷酸溶液为流动相B，采用梯度洗脱：0～
3min，5％A，3～20min，5
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25％A，20～25min，25
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43％A，25～30本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种寻骨风样品的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选取寻骨风样品，并制备供试品溶液；以寻骨风为对照药材，制备对照药材的参照物溶液；以芦丁和马兜铃酸Ⅰ为对照品参照物，分别制备对照品参照物溶液；(2)分别吸取参照物溶液与供试品溶液进行超高效液相色谱分析，构建待测样品的特征图谱，其特征图谱包括至少9个特征峰，特征峰中存在一特征峰对应芦丁对照品参照物峰，存在一特征峰对应马兜铃酸Ⅰ对照品参照物峰；(3)通过步骤(2)中获得的特征图谱，进行待测样品的定性分析；以芦丁为含量测定指标，以马兜铃酸Ⅰ为限量测定指标，进行待测样品的定量分析。2.根据权利要求1所述的寻骨风样品的质量控制方法，其特征在于，还包括通过薄层色谱法对待测样品进行定性分析，使用寻骨风对照药材作为参照，判断薄层板上待测样品与对照药材的斑点是否一一对应；若是，则进行步骤(1)～(3)，若否则待测样品为不合格样品。3.根据权利要求2所述的寻骨风样品的质量控制方法，其特征在于，展开剂包括甲苯、丙酮和甲酸。4.根据权利要求1所述的寻骨风样品的质量控制方法，其特征在于，步骤(1)中，制备参照物溶液或/和供试品溶液的提取剂为水或体积浓度为10％～70％的甲醇水溶液。5.根据权利要求4所述的寻骨风样品的质量控制方法，其特征在于，制备参照物溶液中，每克寻骨风相应的提取剂使用量为5ml～50ml，提取时间为15～60分钟。6.根据权利要求1所述的寻骨风样品的质量控制方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁健，陈盛君，李松，祝倩倩，王协和，王慧敏，张敏，顾芹英，李媚，王琪，
申请(专利权)人：江阴天江药业有限公司，
类型：发明
国别省市：