一种伊枯草菌素培养基及应用其的培养方法技术

本申请涉及培养基的技术领域，具体公开了一种伊枯草菌素培养基及应用其的培养方法。一种伊枯草菌素培养基，包括以下重量份物质：0.5

【技术实现步骤摘要】
一种伊枯草菌素培养基及应用其的培养方法


[0001]本申请涉及培养基的
，尤其是涉及一种伊枯草菌素培养基及应用其的培养方法。

技术介绍

[0002]目前，饲料安全受到广泛关注，饲料的质量直接关系着养殖产品的质量。之前，通常在饲料中添加大量抗生素以提高饲料的抗菌性、降低食用饲料的禽畜生病的概率。随着人们对食品安全和健康的重视，食用添加抗生素饲料的禽畜的存在一些弊端，其一，长时间食用添加抗生素饲料的禽畜体内的致病细菌等耐药性提高，高耐药性的细菌等较易引起畜禽内源感染和二重感染，使畜禽免疫力下降，其二，抗生素较易在畜禽产品和环境中残留。
[0003]为了在维持饲料具有抗菌效果的同时，改善饲料的安全性，近年来，人们采用在饲料中添加抗菌肽以安全、高效提高饲料的抗菌效果。抗菌肽是一种安全的抗菌材料，包括昆虫抗菌肽、哺乳动物抗菌肽、两栖动物抗菌肽、鱼类、软体动物、甲壳类动物来源的抗菌肽、植物抗菌肽、细菌抗菌肽，在饲料中添加的抗菌肽为细菌抗菌肽，如杆菌肽、短杆菌肽S、多黏菌素E、乳链菌肽等。
[0004]针对上述相关技术，近年来，人们选用常用于植物抗菌的抗菌肽：伊枯草菌素作为抗菌肽应用于禽畜饲料中，但目前普通的培养基培养得到的伊枯草菌素的数量较少，专利技术人认为亟需找到提高伊枯草菌素产量的方法。

技术实现思路

[0005]为了得到一种高效、安全且能够应用于禽畜饲料的抗菌肽并找到提高该抗菌肽的产量的方法，本申请提供一种应用于无抗生素饲料的抗菌肽、培养基及培养方法。
[0006]第一方面，本申请提供一种伊枯草菌素培养基，采用如下的技术方案：一种伊枯草菌素培养基，包括以下重量份物质：0.5
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3份甜菜渣、1
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4份葡萄糖、0.5
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4份玉米淀粉、1
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5份玉米芯粉、1
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3份豆粕粉、1
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3份酵母浸粉、1
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1.5份甘油、0.1
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0.5份磷酸氢二钾、0.1
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0.3份磷酸二氢钾 、0.01
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0.05份硫酸锰 、0.05
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0.3份消泡剂。
[0007]通过采用上述技术方案，本申请技术方案中优选甜菜渣、葡萄糖、甘油、玉米淀粉以及玉米芯粉配合作为碳源，通过有机碳源和无机碳源的配合，有效为菌种提供能源，并且玉米芯粉在碳源中能够起到一定的酶诱导效果，能够促进伊枯草菌素的生长。其次，优选豆粕粉和酵母浸粉配合作为氮源，豆粕粉为迟效氮源，通过迟效氮源的加入，控制菌种的生长速度，使得菌种产生较多的伊枯草菌素，提高伊枯草菌素的产量，而酵母浸粉则为速效氮源，持续且稳定为菌种提供氮源，有效改善伊枯草菌素的产量。
[0008]同时，本申请技术方案中优化了豆粕粉在培养基中的含量，适宜的豆粕粉含量，使得培养基中的水分适宜，有利于培养基中氧气的传递，改善菌种的呼吸速率，提高伊枯草菌素的产量。同时，优化了酵母浸粉的含量，适宜的酵母浸粉稳定为菌种提供氮源，提高伊枯草菌素的产量。
[0009]优选的，还包括氨基酸补加剂，所述氨基酸补加剂包括天冬氨酸、谷氨酰胺、脯氨酸，所述氨基酸补加剂外包裹有外壳材料。
[0010]通过采用上述技术方案，本申请技术方案中优选采用在培养基中添加氨基酸补加剂，由于氨基酸补加剂外包裹有外壳材料，外壳材料在能够在氨基酸补加剂外形成包壳，随着菌种在培养基中的发酵生长，外壳材料逐渐溶解破裂，在外壳材料逐步溶解的过程中，包壳上形成孔隙，氨基酸沿包壳上的孔隙缓释至培养基中，逐步为培养基中增加氨基酸，促进伊枯草菌素的合成。
[0011]本申请技术方案优选采用天冬氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸配合添加至培养基中，天冬氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸作为伊枯草菌素的基本物质前体，因此能够促进伊枯草菌素的合成，提高伊枯草菌素的产量。
[0012]优选的，所述外壳材料包括脂质体，所述脂质体为空心结构。
[0013]通过采用上述技术方案，本申请技术方案优选采用空心结构的脂质体作为载体，通过脂质体对多种氨基酸进行包裹、承载，将多种氨基酸与培养基中的其余组分进行分隔。由于脂质体通常由卵磷脂作为主要材料，而卵磷脂作为一种两性表面活性剂，能够均匀分散于培养基中，即使多种氨基酸在缓释时能够均匀分散于培养基中；其次，卵磷脂还能够起到中和防腐剂的作用，以减少防腐剂对菌种的影响，有效促进伊枯草菌素的生长。
[0014]优选的，所述外壳材料还包括硫酸钙，所述脂质体与硫酸钙的质量比为1:1
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2。
[0015]通过采用上述技术方案，本申请技术方案中采用硫酸钙和脂质体配合作为外壳材料，硫酸钙能够填充脂质体上的孔隙结构，降低多种氨基酸直接沿脂质体上的孔隙结构流出脂质体，使得氨基酸补加剂能够稳定起到缓释的作用。此外，硫酸钙能够为菌种提供硫元素以及钙离子等微量元素，促进菌种的生长发育，即提高伊枯草菌素的产量。并且，菌种通过对硫酸钙的吸收腐蚀，逐渐暴露脂质体上的孔隙结构，使脂质体缓释至培养基中，以稳定为菌种提供氨基酸，促进伊枯草菌素的合成。
[0016]优选的，所述氨基酸补加剂的制备方法：分别称量以下重量份物质，5
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10份脂质体、5
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6份天冬氨酸、0.9
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1.5份谷氨酰胺、0.5
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0.7份脯氨酸、4
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6份络合剂、5
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20份硫酸钙和3
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5份粘结剂，取脂质体进行纯化、破膜、稀释，得到脂质体溶液，将天冬氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸添加至脂质体溶液中，搅拌混合，加入络合剂，继续搅拌混合，过滤，干燥，得到中间产物，将中间产物、粘结剂、硫酸钙混合，搅拌混合，干燥，得到氨基酸补加剂。
[0017]通过采用上述技术方案，本申请技术方案中优选采用通过脂质体负载、硫酸钙包裹形成氨基酸
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脂质体
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硫酸钙的核
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双壳结构，通过硫酸钙对脂质体进行包裹，即初期的氨基酸补加剂仅作为硫元素以及钙元素等微量元素的提供源，促进菌种的生长，并逐渐消耗、腐蚀包裹于脂质体外的硫酸钙。随着菌种的生长，硫酸钙外壳逐渐被消耗并暴露脂质体外壳，由于脂质体的表面活性，促进氨基酸补加剂进行悬浮分散，当脂质体上的孔隙结构暴露后，氨基酸缓释至培养基中，逐步为菌种提供合成伊枯草菌素的氨基酸，加速培养基中伊枯草菌素的合成速度，并且氨基酸能够游离于培养基中的各个位置，即降低了氨基酸堆积导致菌种利用不充分的可能性。
[0018]优选的，所述络合剂包括透明质酸钠、酵母发酵液、酵母浸提物中的至少两种；所述粘结剂包括透明质酸钠。
[0019]通过采用上述技术方案，本申请技术方案中优选采用透明质酸钠、酵母发酵液、酵
母浸提物中的至少两种配合作为络合剂，络合剂能够起到较为优异的粘结效果，使得氨基酸能够稳定粘附于脂质体内壁上，当脂质体的孔隙暴露至培养基中后，络合剂中的酵母本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种伊枯草菌素培养基，其特征在于，包括以下重量份物质：0.5
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3份甜菜渣、1
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4份葡萄糖、0.5
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4份玉米淀粉、1
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5份玉米芯粉、1
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3份豆粕粉、1
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3份酵母浸粉、1
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1.5份甘油、0.1
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0.5份磷酸氢二钾、0.1
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0.3份磷酸二氢钾 、0.01
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0.05份硫酸锰 、0.05
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0.3份消泡剂。2.根据权利要求1所述的一种伊枯草菌素培养基，其特征在于：还包括氨基酸补加剂，所述氨基酸补加剂包括天冬氨酸、谷氨酰胺、脯氨酸，所述氨基酸补加剂外包裹有外壳材料。3.根据权利要求2所述的一种伊枯草菌素培养基，其特征在于：所述外壳材料包括脂质体，所述脂质体为空心结构。4.根据权利要求3所述的一种伊枯草菌素培养基，其特征在于：所述外壳材料还包括硫酸钙，所述脂质体与硫酸钙的质量比为1:1
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2。5.根据权利要求4所述的一种伊枯草菌素培养基，其特征在于，所述氨基酸补加剂的制备方法：分别称量以下重量份物质，5
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10份脂质体、5
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6份天冬氨酸、0.9
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1.5份谷氨酰胺、0.5
‑
0.7份脯氨酸、4
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6份络合剂、5
‑
20份硫酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：况应谷，冶双德，王建生，肖学奎，
申请(专利权)人：厦门隆励工贸有限公司，
类型：发明
国别省市：