本发明专利技术公开了一种检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的方法，包括如下步骤：S100，收集经过前列腺按摩的患者的尿液；S101，对所述尿液进行第一级离心处理以获取上清液，并对所述上清液进行第二级离心处理以获得外泌体溶液；S102，向所述外泌体溶液中加入设定量的RIPA裂解缓冲液，并在室温下孵育设定时长以得到外泌体蛋白溶液；S103，对所述外泌体蛋白溶液进行检测以得到PSA表达、AMACR表达和PSMA表达，并基于所述PSA表达、所述AMACR表达和所述PSMA表达确定前列腺癌及其等级。本申请通过定量地检测尿液游离的细胞外囊泡中PSA、AMACR和PSMA蛋白表达水平，能够有效检测出前列腺癌及临床显著性前列腺癌(高级别前列腺癌)，避免不必要的前列腺穿刺。前列腺穿刺。前列腺穿刺。
【技术实现步骤摘要】
一种检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的方法及装置
[0001]本专利技术涉及检测方法
，尤其涉及一种检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的方法及装置。
技术介绍
[0002]前列腺癌(PCA)是最常见的实体恶性肿瘤之一。前列腺特异性抗原(PSA)筛查是早期发现前列腺癌的最常用方法，但是若干项PSA筛查的随机临床试验中结果证实PSA的筛查对于前列腺癌的诊断造成更多的不确定性。自从血液中检测 PSA的方法学出现以来，大量的前列腺癌患者被诊断发现，因此PSA筛查提升了前列腺癌的治疗效率并显著降低了该肿瘤造成死亡率。但是更多的证据表明，即使是患有低级别的前列腺癌，对患者的生命没有显著影响，终其一生都不会发生恶化转移等风险。
[0003]临床上将格里森评分≥7的前列腺癌患者评定为临床显著或高级别患者。随机临床试验表明放疗疗法能够降低高级别前列腺癌患者的死亡率，同时在多项随机临床试验结果显示最理想的前列腺癌早期诊断是将临床显著患者进行前列腺组织活检并以此选择多种治疗策略，同时避免在非临床显著(低级别)或非肿瘤患者中进行相应的组织活检。但在没有进行前列腺活检之前，无法通过格里森评分评估患者属于临床显著性还是非显著性前列腺癌，往往采用所有可疑患者全部进行前列腺穿刺活检的方式，造成了大量的非必要的临床干预，也伴随着低级别患者的过度治疗和大量医疗资源的浪费。
[0004]因此，本申请旨在一种能够克服上述缺陷的检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的装置和方法。
技术实现思路
[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的装置。
[0006]本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：一种检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的装置，包括：样品采集部，用于收集经过前列腺按摩的患者的尿液；离心部，用于对所述尿液进行第一级离心处理以获取上清液，并对所述上清液进行第二级离心处理以获得外泌体溶液；孵育部，用于向所述外泌体溶液中加入设定量的RIPA裂解缓冲液，并在室温下孵育设定时长以得到外泌体蛋白溶液；检测部，用于对所述外泌体蛋白溶液进行检测以得到PSA表达、 AMACR表达和PSMA表达，并基于所述PSA表达、所述AMACR表达和所述PSMA表达确定是否为前列腺癌及临床显著性前列腺癌。
[0007]优选的，所述患者的所述患者的PSA大于等于4ng/mL或直肠指诊发现异常结节或B超发现可疑回声结节或MRI发现可疑病灶，所述尿液为患者经前列腺按摩后的初始尿液，所述尿液的体积大于10mL。
[0008]优选的，所述第一级离心处理包括如下步骤：室温条件下，持续5分钟的离心力为3000
ꢀ×
g的离心处理，以得到上清液。
[0009]优选的，超速离心机能够进行第二级离心处理。具体的，应用超速离心机，在4℃条件下以127000
×
g持续离心90分钟。弃上清，保留底部沉淀。添加0.22μm滤膜过滤后的PBS 溶液重悬溶液，在4℃条件下应用127000
×
g二次离心90分钟。吸弃上清，保留沉淀，用 100μL PBS重悬沉淀得到外泌体溶液。向所述外泌体溶液中加入设定量的RIPA裂解缓冲液，并在室温下孵育设定时长以得到外泌体蛋白溶液，其中，所述设定量为10μL，所述设定时长为10分钟。
[0010]优选的，所述检测部按照如下步骤确定所述前列腺癌等级：S1，采集设定数量的尿液样本以分别获取其对应的PSA表达、AMACR表达和PSMA表达；S2，确定回归方程中的回归系数β0、β1、β2和β3，其中，所述回归方程能够表示为：，其中，所述回归方程能够表示为：S3，基于所述回归方程分别确定N个检验样本各自对应的前列腺癌概率p
i
，i＝1,2,...N；S4，对所述前列腺癌概率p
i
按照从大到小的顺序进行排序，以阈值θ为自变量，建立敏感性计算函数：
[0011]优选的，所述检测部还配置为：S5，基于f(θ)＝0.95以获得阈值θ；S6，基于步骤S3确定检测样品的前列腺癌概率p
i
，如果p
i
≥θ，将所述检测样品的前列腺癌等级划分为临床显著性等级，否则，当p
i
＜θ，将所述检测样品的前列腺癌等级划分为非癌和非临床显著性等级。
[0012]优选的，还包括提醒部，在所述前列腺癌等级被划分为临床显著性等级的情况下，所述检测部能够向所述提醒部发送触发指令以使得提醒部执行提醒操作。
[0013]优选的，还包括固定架，所述样品采集部、所述离心部、所述孵育部、所述检测部和所述提醒部均设置于所述固定架上。
[0014]优选的，固定架的侧壁上设置有彼此垂直的第一滑槽和第二滑槽，所述第一滑动槽和或所述第二滑动槽中能够滑动设置有夹持组件，所述孵育部包括箱体和设置于所述箱体中的若干个孵育支撑架，所述孵育支撑架能够位于第一滑槽的下方，其中，在夹持组件沿第二滑动槽移动而抵靠接触至所述第一滑动槽的情况下，所述夹持组件能够进入所述第一滑动槽，并按照所述夹持组件与所述孵育支撑架之间的距离逐渐减小的方式沿第一滑动槽移动。
[0015]优选的，所述夹持组件包括第一夹持板、第二夹持板和压缩弹簧，所述第一夹持板和所述第二夹持板按照能够产生相对滑动的方式彼此滑动连额吉，所述压缩弹簧能够设置于所述第一夹持板上，所述压缩弹簧能够连接至所述第二夹持板，在所述第一夹持板和所述第二夹持板产生相对滑动的情况下，压缩弹簧的长度能够增大或减小，所述第一夹持板上设置有第一夹持孔，所述第二夹持板上设置有第二夹持孔，在初始状态下，压缩弹簧能够处于压缩状态以产生作用于第一夹持板和第二夹持板的弹性势能，使得第一夹持板和第二夹持板能够彼此紧密贴合。
[0016]优选的，所述第二夹持板上设置有卡扣环，所述固定架上设置有导向柱，卡扣环的形状能够由圆环状限定，导向柱的横截面能够呈圆形，在沿导向柱的延伸方向上，导向柱的横截面的直径能够逐渐增大，其中，导向柱能够位于卡扣环的下方，当夹持组件沿第一滑槽
移动时，所述导向柱能够插入所述卡扣环中，并且在夹持组件与孵育支撑架之间的距离逐渐减小的情况下，所述导向柱能够对所述卡扣环施加作用力，使得所述第一夹持板和所述第二夹持板能够背向移动。
[0017]本申请还提供一种检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的方法，包括如下步骤：S100，收集经过前列腺按摩的患者的尿液；S101，对所述尿液进行第一级离心处理以获取上清液，并对所述上清液进行第二级离心处理以获得外泌体溶液；S102，向所述外泌体溶液中加入设定量的RIPA裂解缓冲液，并在室温下孵育设定时长以得到外泌体蛋白溶液；S103，对所述外泌体蛋白溶液进行检测以得到PSA表达、AMACR表达和PSMA表达，并基于所述PSA 表达、所述AMACR表达和所述PSMA表达确定是否为前列腺癌及临床显著性前列腺癌。
[0018]本专利技术具有以下优点：
[0019](1)通过定量地检测尿液游离的细胞外囊泡中PSA本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的方法，其特征在于，包括如下步骤：S100，收集经过前列腺按摩的患者的尿液；S101，对所述尿液进行第一级离心处理以获取上清液，并对所述上清液进行第二级离心处理以获得外泌体溶液；S102，向所述外泌体溶液中加入设定量的RIPA裂解缓冲液，并在室温下孵育设定时长以得到外泌体蛋白溶液；S103，对所述外泌体蛋白溶液进行检测以得到PSA表达、AMACR表达和PSMA表达，并基于所述PSA表达、所述AMACR表达和所述PSMA表达确定是否为前列腺癌及临床显著性前列腺癌。2.一种检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的装置，其特征在于，包括：样品采集部(1)，用于收集经过前列腺按摩的患者的尿液；离心部(2)，用于对所述尿液进行第一级离心处理以获取上清液，并对所述上清液进行第二级离心处理以获得外泌体溶液；孵育部(3)，用于向所述外泌体溶液中加入设定量的RIPA裂解缓冲液，并在室温下孵育设定时长以得到外泌体蛋白溶液；检测部(4)，用于对所述外泌体蛋白溶液进行检测以得到PSA表达、AMACR表达和PSMA表达，并基于所述PSA表达、所述AMACR表达和所述PSMA表达确定是否为前列腺癌及临床显著性前列腺癌。3.根据权利要求2所述的检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的装置，其特征在于，所述患者的PSA大于等于4ng/mL或直肠指诊发现异常结节或B超发现可疑回声结节或MRI发现可疑病灶，所述尿液为患者经前列腺按摩后的初始尿液，所述尿液的体积大于10mL。4.根据权利要求3所述的检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的装置，其特征在于，所述第一级离心处理包括如下步骤：室温条件下，持续5分钟的离心力为3000
×
g的离心处理，以得到上清液，经所述第二级离心处理获得的外泌体溶液的体积为100μL，其中，所述设定量为10μL，所述设定时长为10分钟。5.根据权利要求1所述的检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的装置，其特征在于，所述检测部(4)按照如下步骤确定所述前列腺癌及前列腺癌等级：S1，采集设定数量的尿液样本以分别获取其对应的PSA表达、AMACR表达和PSMA表达；S2，确定回归方程中的回归系数β0、β1、β2和β3，其中，所述回归方程能够表示为：S3，基于所述回归方程分别确定N个检验样本各自对应的前列腺癌概率p
i
，i＝1,2,...N；S4，对所述前列腺癌概率p
i
按照从大到小的顺序进行排序，以阈值θ为自变量，建立敏感性计算函数：6.根据权利要求5所述的检测前列腺癌及临床显著性前列腺癌的装置，其特征在于，所述检测部(4)还配置为：
S5，基于f(θ)＝0.95以获得其对应阈值θ；S6，基于步骤S3确定检测样品的前列腺癌概率p
i
，如果p
i
≥θ，将所述检测样品的前列腺...
【专利技术属性】
技术研发人员：王富博，张会勇，程继文，莫曾南，韦春梦，陈俊毅，魏雪栋，徐斌，许斌，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：
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