一种复配色素及其在检测鼠李糖乳杆菌中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种复配色素及其在检测鼠李糖乳杆菌中的应用，属于食品分析检测技术领域。本发明专利技术利用复配色素对鼠李糖乳杆菌的显色表征鉴定鼠李糖乳杆菌(LGG)是否失活，该方法的具体步骤为：在待检测样品中加入含亮蓝(0.01％

【技术实现步骤摘要】
一种复配色素及其在检测鼠李糖乳杆菌中的应用


[0001]本专利技术涉及食品分析检测
，尤其涉及一种复配色素及其在检测鼠李糖乳杆菌中的应用。

技术介绍

[0002]益生菌泛指当摄入足够量多时，对人体发挥有益作用的活的微生物的总称。鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus GG(LGG)就是最具代表性的益生菌之一，1983年由美国北卡罗来纳州立大学两名美国教授从健康人体分离出来，并获得专利。此后被科研工作者们广泛研究，目前临床研究证明LGG具有六大作用：平衡肠道菌群，改善肠道健康、增强肠粘膜屏障、预防和治疗腹泻、提高免疫力、预防与促进过敏恢复、预防龋齿。然而益生菌产品市场鱼龙混杂，与LGG相关的益生菌产品更是层出不穷，例如益生菌滴剂，益生菌粉，益生菌饮料，益生菌酸奶。这些益生菌产品的存储方式有冷藏、常温存贮等，保质期从7天到三年不等，在这类产品的包装上只会呈现出厂时的菌活，而在保质期内常常存在运输、存贮过程中的菌死亡。因此，如何快速有效鉴别该产品是否真实有效的包含LGG活菌十分重要。
[0003]目前已公开的期刊文献及标准规范中主要以16S rRNA的方法对LGG进行菌种鉴定，用涂布平板法对活性进行检测，菌种鉴定金钱损耗大，平板计数方法要求在无菌环境下进行，耗时2
‑
3天，且存在不确定性的染菌可能。其它报道的方法如荧光染色法用于非特异性识别菌，革兰氏染色法对菌的阴性和阳性进行区分，均无法对LGG进行特异性显色鉴别和定性活性检测。因此，现有鉴别LGG活性的方法有如下缺点：1、操作复杂；2、耗时较长；3、需要有一定微生物操作的人员进行，专业性要求较高；4、金钱损耗大；5、对检测环境要求高。
[0004]为了实现对LGG的特异性识别和活性的定性检测，提高检测速度，亟需开发一种新的方法来实现这一目的。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的不足，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种复配色素及其在检测鼠李糖乳杆菌中的应用。本专利技术利用复配色素对鼠李糖乳杆菌的显色表征鉴定LGG是否失活，该方法的具体步骤为：在待检测样品中加入含亮蓝(0.01％
‑
0.5％(w/w))的复配色素，旋紧盖子，反复振荡，使复配色素与待检测样品充分混匀，溶解，然后静置完成显色反应，其具体的流程图如图1所示。
[0006]本专利技术的技术方案如下：
[0007]本专利技术的第一个目的在于提供一种复配色素，所述复配色素包括亮蓝及其他食用色素。
[0008]在本专利技术的一个实施例中，所述亮蓝与其他食用色素的质量比为1：1
‑
17。
[0009]在本专利技术的一个实施例中，所述其他食用色素选自苋菜红、日落黄、胭脂红和柠檬黄中的一种或多种。
[0010]本专利技术的第二个目的在于提供一种试剂盒，所述试剂盒中含有所述的复配色素。
[0011]本专利技术的第三个目的在于提供一种显色卡，所述显色卡含有所述的复配色素或所述的试剂盒。
[0012]本专利技术的第四个目的在于提供所述的复配色素、所述的试剂盒或所述的显色卡在检测益生菌中的应用。
[0013]在本专利技术的一个实施例中，所述益生菌选自鼠李糖乳杆菌。
[0014]在本专利技术的一个实施例中，所述检测鼠李糖乳杆菌的方法包括以下步骤：将待检测样品固液分离取固相，加入所述复配色素，混匀，通过最终所得溶液的显色表征实现益生菌的定性检测。
[0015]在本专利技术的一个实施例中，待检测样品中的活性益生菌的浓度为0CFU/mL
‑
10
^11
CFU/mL。
[0016]在本专利技术的一个实施例中，所述复配色素的浓度为0.4％w/w
‑
4％w/w。
[0017]本专利技术的技术方案具有以下优点：
[0018]本专利技术提供了一种复配色素及其在检测鼠李糖乳杆菌中的应用，所述复配色素包括亮蓝及其他食用色素。在待检测样品中加入含亮蓝的复配色素进行显色表征，可以检测待检测样品中是否含有具有活性的LGG。本专利技术的方法具有对LGG有特异性、显色速度快、易于操作且准确度高和对检测环境没有要求等优点，可以广泛应用于现场特异性检测益生菌产品中LGG是否失活。
附图说明
[0019]为了使本专利技术的内容更容易被清楚的理解，下面根据本专利技术的具体实施例并结合附图，对本专利技术作进一步详细的说明，其中
[0020]图1为本专利技术检测方法的流程图；
[0021]图2为本专利技术实施例1
‑
4及对比例中LGG和BB12对不同色素的显色效果；
[0022]图3为本专利技术的应用实例观察LGG菌粉对色素A的显色效果。
具体实施方式
[0023]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本专利技术并能予以实施，但所举实施例不作为对本专利技术的限定。
[0024]实施例1
[0025]将保存在
‑
40℃的LGG菌液，以1％(v/v)接种量接种于MRS肉汤菌种乳酸菌培养基(MRS broth)，37℃下静置培养24h，无菌环境下用接种环划线至MRS琼脂培养基(MRS agar)上37℃培养48h后，挑单菌落至10mL MRS broth中培养24h后，按1％(v/v)接种量转接至MRS broth，37℃下静置培养24h，得到活化好的LGG。
[0026]分别取5mL活化好的LGG进行离心去除上清液获取LGG菌泥，添加不同体积(1mL，0.5mL，100μL)的色素A(香芋紫：苋菜红0.36％，亮蓝0.04％，99.6％水)，分别配置成不同浓缩程度的菌液(5倍，10倍，50倍)，同时取等量灭活后LGG并添加0.5mL色素形成10倍浓缩做对照，充分震荡静置后的结果如图2所示。由图2可以看出，色素A的颜色为香芋紫，而稀释5倍的浓缩菌液呈现深蓝色，稀释10倍的浓缩菌液呈现天蓝色，稀释50倍的浓缩菌液呈现浅天蓝色，对照组呈现的颜色为香芋紫。因此，在鼠李糖乳杆菌存在的情况下加入色素A，随着
鼠李糖乳杆菌活菌浓度的提高，检测液的颜色变化程度越大。
[0027]实施例2
[0028]将保存在
‑
40℃的LGG菌液，以1％(v/v)接种量接种于MRS broth，37℃下静置培养24h，无菌环境下用接种环划线至MRS agar上37℃培养48h后，挑单菌落至10mLMRS broth中无菌培养24h，按1％(v/v)接种量MRS broth，37℃下静置培养24h，得到活化好的LGG。
[0029]分别取5mL活化好的LGG进行离心去除上清液获取LGG菌泥，添加不同体积(1mL，0.5mL，100μL)的色素B(棕色：日落黄0.223％，胭脂红0.154％，亮蓝0.023％，水99.6％)，分别配置成不同浓缩程度的菌液(5倍，10倍，50倍)，同时取灭活后的稀释10倍的浓缩菌液做对照组，充分震荡静置后的结果如图2所示。由图2可以看出，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复配色素，其特征在于，所述复配色素包括亮蓝及其他食用色素。2.根据权利要求1所述的复配色素，其特征在于，所述亮蓝与其他食用色素的质量比为1:1
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17。3.根据权利要求1所述的复配色素，其特征在于，所述其他食用色素选自苋菜红、日落黄、胭脂红和柠檬黄中的一种或多种。4.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有权利要求1
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3任一所述的复配色素。5.一种显色卡，其特征在于，所述显色卡含有权利要求1
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3任一所述的复配色素或权利要求4所述的试剂盒。6.如权利要求1
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3任一所述的复配色素、如权利要求4...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕禾，王娟，廖振锴，陈晓东，
申请(专利权)人：晓东宜健苏州仪器设备有限公司，
类型：发明
国别省市：