一种活性胶原蛋白冻干制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种活性胶原蛋白冻干制剂及其制备方法和应用。本发明专利技术的活性胶原蛋白冻干制剂的制备方法，包括如下步骤：S1：将活性胶原蛋白悬浮液与冻干保护剂混合，制得混合液；S2：对混合液进行冻干，制得活性胶原蛋白冻干制剂；其中，冻干保护剂包括第一保护剂，第一保护剂包括甘氨酸和甘露醇中的至少一种，此外冻干保护剂还包括第二保护剂，第二保护剂包括乙酸乙酯。本发明专利技术解决了活性胶原蛋白冻干后过度自交联导致的复溶难题，冻干制剂的复溶效果好，同时控制并利用冻干过程中的自交联提高了复溶胶原蛋白的抗酶解性能和热稳定性。复溶胶原蛋白的抗酶解性能和热稳定性。复溶胶原蛋白的抗酶解性能和热稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种活性胶原蛋白冻干制剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及胶原蛋白
，尤其是涉及一种活性胶原蛋白冻干制剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]胶原蛋白是细胞外基质的一种结构蛋白质，是动物结缔组织中的主要成分，也是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白，约占胶原纤维固体物的85％。胶原蛋白主要存在于动物的结缔组织(骨、软骨、皮肤、腱、韧等)中，占哺乳动物体内蛋白质的25
‑
30％。研究表明，胶原蛋白与组织的形成及成熟、细胞间信息的传递、关节润滑、伤口愈合和衰老等有着密切的关系。胶原蛋白是生物科技产业的关键性原材料之一，在医学材料、化妆品、食品工业等领域具有广泛的应用。
[0003]大分子胶原蛋白在高温下易失活，冻干是保存胶原蛋白的常用方法。然而，胶原蛋白在冻干过程由于蛋白表面脱水会导致胶原蛋白分子间发生自交联反应，导致冻干后的胶原蛋白难以复溶。复溶问题对水解胶原蛋白和低分子量的人源重组胶原蛋白影响不大，但对用于注射填充用的大分子提取胶原蛋白影响较为严重。
[0004]目前，活性大分子胶原蛋白产品主要是以悬浮液的形式存在，该产品形式对于运输和储存要求极高，条件不当会导致产品变性从而无法使用。对于分子量在300kD左右的活性胶原蛋白，如果仅进行简单的冻干，胶原蛋白在冻干过程中会发生不可逆的自交联，从而影响胶原蛋白的复溶效果，复溶后的胶原蛋白常因产生聚集和结块从而无法进行注射；同时，小分子量的重组胶原蛋白的冻干方式并不适用于高分子的天然活性胶原蛋白。
[0005]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种活性胶原蛋白冻干制剂及其制备方法和应用，其解决了活性胶原蛋白冻干后过度自交联导致的复溶难题，冻干制剂的复溶效果好，同时控制并利用冻干过程中的自交联提高了复溶胶原蛋白的抗酶解性能和热稳定性。
[0007]本专利技术提供一种活性胶原蛋白冻干制剂的制备方法，包括如下步骤：
[0008]S1：将活性胶原蛋白悬浮液与冻干保护剂混合，制得混合液；
[0009]S2：对混合液进行冻干，制得活性胶原蛋白冻干制剂；
[0010]其中，冻干保护剂包括第一保护剂，第一保护剂包括甘氨酸和甘露醇中的至少一种。
[0011]特别是，冻干保护剂还包括第二保护剂，第二保护剂包括乙酸乙酯。
[0012]进一步地，冻干保护剂还可以包括第三保护剂，第三保护剂包括氧化纤维二糖。
[0013]本专利技术活性胶原蛋白冻干制剂的制备方法对活性胶原蛋白悬浮液中的活性胶原蛋白不作严格限制；具体地，活性胶原蛋白的分子量可以为200
‑
300kD。此外，对活性胶原蛋白悬浮液中的活性胶原蛋白的浓度不作严格限制，例如可以为5
‑
35mg/mL。
[0014]在本专利技术中，活性胶原蛋白悬浮液中的活性胶原蛋白与第一保护剂的质量比可以为1：(2
‑
6)；活性胶原蛋白悬浮液中的活性胶原蛋白与第二保护剂的质量体积比可以为1mg：(0.05
‑
0.1)mL；活性胶原蛋白悬浮液中的活性胶原蛋白与第三保护剂的质量比可以为1：(0.2
‑
0.6)。
[0015]特别是，第一保护剂可以包括甘氨酸和甘露醇，甘氨酸与甘露醇的质量比可以为1：(1.5
‑
4)。
[0016]在本专利技术中，氧化纤维二糖是通过过氧化氢等氧化剂对纤维二糖进行氧化制得；具体地，氧化纤维二糖的制备方法可以包括：
[0017]A)将纤维二糖溶于水中，混匀，得到纤维二糖溶液；
[0018]B)向纤维二糖溶液中加入过氧化氢进行反应，制得氧化纤维二糖。
[0019]步骤A)中，纤维二糖溶液的质量浓度可以为4
‑
6％，纤维二糖与过氧化氢的质量比可以为1：(0.05
‑
0.1)；步骤B)中，可以控制反应温度为20
‑
40℃，反应时间为6
‑
10h。
[0020]本专利技术对冻干工艺不作严格限制，冻干可以包括依次进行的预冻、升华干燥和解析干燥。
[0021]具体地，预冻可以包括：先在0
‑
2℃下预冷25
‑
35min，再在
‑
50℃至
‑
60℃下预冻110
‑
130min；升华干燥可以包括：先在
‑
45℃至
‑
55℃下干燥5
‑
15min，随后在
‑
30℃至
‑
40℃下干燥1500
‑
1600min，再在
‑
2℃至
‑
8℃下干燥50
‑
70min；解析干燥可以包括：先在2
‑
8℃下干燥50
‑
70min，再在25
‑
35℃下干燥800
‑
1000min；各次升温的时间可以控制在25
‑
35min。
[0022]本专利技术还提供一种活性胶原蛋白冻干制剂，按照上述制备方法制得。
[0023]本专利技术还提供上述活性胶原蛋白冻干制剂在医美中的应用。
[0024]本专利技术还提供一种活性胶原蛋白溶液的制备方法，包括：在使用前对上述活性胶原蛋白冻干制剂进行复溶。
[0025]具体地，复溶所采用的复溶溶剂为无菌水、无菌生理盐水、0.3％的盐酸利多卡因无菌水溶液或0.3％的盐酸利多卡因无菌生理盐水溶液；活性胶原蛋白溶液的浓度为5
‑
65mg/mL；其中，在用于真皮层填充时，复溶后的活性胶原蛋白溶液的浓度为20
‑
65mg/mL；在用于水光针时，复溶后的活性胶原蛋白溶液的浓度为5
‑
35mg/mL。
[0026]在进行复溶时，活性胶原蛋白冻干制剂可以在密闭条件下通过注射器一次性注入复溶溶剂中。此外，复溶后的活性胶原蛋白溶液在使用前可以采用三通混合方式增加活性胶原蛋白的悬浮效果。
[0027]本专利技术人经大量研究发现：胶原蛋白在常规冻干过程中会发生不可逆的自交联从而影响胶原蛋白的复溶效果；然而，本专利技术的制备方法能够将活性胶原蛋白的自交联比例控制在适宜的范围，该适宜的自交联程度能够良好地解决注射级胶原蛋白在冻干后的复溶问题，冻干过程对活性胶原蛋白的三维螺旋结构和活性无不良影响，此外该适宜的自交联程度还能够显著提高复溶胶原蛋白的抗酶解性能和热稳定性，制得的活性胶原蛋白冻干制剂能够根据应用场景复溶稀释为不同浓度进行不同应用，适用范围广泛，实际应用效果好。
具体实施方式
[0028]应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属
的普通技术人员通常
理解的相同含义。
[0029]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种活性胶原蛋白冻干制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：将活性胶原蛋白悬浮液与冻干保护剂混合，制得混合液；S2：对混合液进行冻干，制得活性胶原蛋白冻干制剂；其中，冻干保护剂包括第一保护剂，第一保护剂包括甘氨酸和甘露醇中的至少一种；优选地，冻干保护剂还包括第二保护剂，第二保护剂包括乙酸乙酯；优选地，冻干保护剂还包括第三保护剂，第三保护剂包括氧化纤维二糖。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，活性胶原蛋白悬浮液中的活性胶原蛋白与第一保护剂的质量比为1：(2
‑
6)；优选地，活性胶原蛋白悬浮液中的活性胶原蛋白与第二保护剂的质量体积比为1mg：(0.05
‑
0.1)mL；优选地，活性胶原蛋白悬浮液中的活性胶原蛋白与第三保护剂的质量比为1：(0.2
‑
0.6)；优选地，第一保护剂包括甘氨酸和甘露醇，甘氨酸与甘露醇的质量比为1：(1.5
‑
4)。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，氧化纤维二糖是通过过氧化氢对纤维二糖进行氧化制得；优选地，氧化纤维二糖的制备方法包括：A)将纤维二糖溶于水中，混匀，得到纤维二糖溶液；B)向纤维二糖溶液中加入过氧化氢进行反应，制得氧化纤维二糖；优选地，纤维二糖溶液的质量浓度为4
‑
6％，纤维二糖与过氧化氢的质量比为1：(0.05
‑
0.1)；优选地，控制反应温度为20
‑
40℃，反应时间为6
‑
10h。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，冻干包括依次进行的预冻、升华干燥和解析干燥。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈萱宜，李宏强，孙淑娟，王瀚，黄海军，宋宇春，李岩冬，
申请(专利权)人：斐缦长春医药生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：