本发明专利技术涉及一种基于衍生化法定量对乙酰氨基苯磺酰氯的方法，属于分析化学领域。本发明专利技术的方法包括：（1）衍生试剂的制备；（2）衍生空白溶液的制备；（3）对照组贮备液、样品的制备；（4）供试样品的处理：用衍生试剂对供试样品中的乙酰氨基苯磺酰氯进行衍生化处理；（5）加标供试样品的制备；（6）样品的定量分析：三重四级杆液质联用检测上述样品。本发明专利技术采用衍生化法结合三重四级杆液质联用仪测定磺胺甲噁唑中对乙酰氨基苯磺酰氯的含量，制备的衍生产物稳定且易于检测，最终实现测定对乙酰氨基苯磺酰氯时的较低检测限和较高灵敏度。氯时的较低检测限和较高灵敏度。氯时的较低检测限和较高灵敏度。
【技术实现步骤摘要】
一种基于衍生化法定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯的方法
[0001]本专利技术涉及一种基于衍生化法定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯的方法，属于分析化学领域。
技术介绍
[0002]磺胺甲噁唑又名新诺明，是一种广谱抗菌药，对葡萄球菌及大肠杆菌作用特别强，用于治疗泌尿道感染以及禽霍乱等。磺胺甲噁唑属全身应用的中效磺胺类药物，它可与PABA竞争性作用于细菌体内的二氢叶酸合成酶，阻止细菌二氢叶酸的合成，从而抑制细菌的生长繁殖。
[0003]目前，磺胺甲噁唑的生产工艺为：由对乙酰氨基苯磺酰氯与3
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氨基
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甲基异噁唑缩合，再水解制得。在剩余杂质中，对乙酰氨基苯磺酰氯是具有警示结构的基因毒性杂质，是磺胺甲噁唑提纯过程主要去除的杂质，鉴于去除杂质和检测反应进行程度的需要，对对乙酰氨基苯磺酰氯的精确定量分析是必不可少的环节，而对乙酰氨基苯磺酰氯含量限度仅为1.25ppm，同时酰氯的性质活泼，具有很高的反应活性，直接分析检测往往会产生很大的误差。
[0004]目前检测对乙酰氨基苯磺酰氯常用的分析方法包括气相色谱法(GC)和高效液相色谱法(HPLC)，GC或HPLC测定时难以达到其灵敏度
[0005]随着分析技术的快速发展，液质联用技术因其选择性强、灵敏度高、样品前处理简单等优势，成为主流技术。采用水解法利用液质联用仪测定有一定优势，但是对乙酰氨基苯磺酰氯与水发生水解生成对乙酰氨基苯磺酸，对乙酰氨基苯磺酸为磺胺甲噁唑的主要工艺杂质，原有的对乙酰氨基苯磺酸会对测定结果产生干扰。
[0006]因此，寻找一种方法结合液质联用技术的优势来实现对乙酰氨基苯磺酰氯精确定量分析是丞待解决的问题。
技术实现思路
[0007]本专利技术的目的在于提供一种基于衍生化法定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯的方法，选用苯胺作为衍生试剂，苯胺与磺胺甲噁唑中对乙酰氨基苯磺酰氯充分反应，氨基的存在会使氯原子被氨基取代形成酰胺，即得到4
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(N
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乙酰氨基苯磺酰)苯胺，产物性质较为稳定，以4
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(N
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乙酰氨基苯磺酰)苯胺作为对乙酰氨基苯磺酰氯的含量指标，继而采用三重四级杆液质联用仪测定磺胺甲噁唑中对乙酰氨基苯磺酰氯的含量，提高了测定结果的灵敏度，极大的降低了检测限。
[0008]本专利技术提供了一种基于衍生化法定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯的方法，包括如下步骤：
[0009](1)衍生试剂的制备；
[0010](2)衍生空白溶液的制备；
[0011](3)对照组贮备液、样品的制备；
[0012](4)供试样品的处理：用衍生试剂对供试样品中的乙酰氨基苯磺酰氯进行衍生化处理；
[0013](5)加标供试样品的制备；
[0014](6)样品的定量分析：三重四级杆液质联用检测上述样品。其中，三重四级杆液质联用检测为采用高效液相色谱系统
‑
三重四级杆质谱联用仪对样品进行分离和检测。
[0015]优选的，(1)中，衍生试剂为0.3％(体积浓度)苯胺乙腈溶液；衍生试剂制备条件为：量取苯胺溶液，置于量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
[0016](3)中，对照组样品为已知浓度的4
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(N
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乙酰氨基苯磺酰)苯胺溶液，由对乙酰氨基苯磺酰氯溶液加入衍生试剂衍生化得到。
[0017](4)中，供试样品为含有对乙酰氨基苯磺酰氯杂质的磺胺甲噁唑，其处理步骤包括：
[0018]S1称取含有对乙酰氨基苯磺酰氯杂质的磺胺甲噁唑；
[0019]S2乙腈溶解所述的磺胺甲噁唑；
[0020]S3向乙腈溶解的磺胺甲噁唑加入如权利要求1或2任意一项所述的衍生试剂；
[0021]S4加入衍生试剂后，进行室温放置0
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30min或超声0
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45min或水浴振荡0
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45min中的一种操作，使对乙酰氨基苯磺酰氯与衍生试剂反应生成4
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(N
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乙酰氨基苯磺酰)苯胺。
[0022]进一步的，本专利技术的一种基于衍生化法定量对乙酰氨基苯磺酰氯的方法实现了在磺胺甲噁唑中定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯杂质含量的应用。
[0023]所述的样品的定量分析包括：专属性、线性与范围、准确度、精密度(重复性、系统精密度)。
[0024]优选的，本专利技术高效液相色谱系统
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三重四级杆质谱联用仪，高效液相色谱系统条件：
[0025]色谱柱：Waters Xbridge C
18
柱，250mm
×
4.6mm，5μm；
[0026]流动相为：A相：甲酸水溶液；B相：乙腈；优选的，甲酸水溶液浓度为0.1％(体积浓度)；
[0027]柱温：40℃；
[0028]流速：1mL/min；
[0029]进样量：20μL；
[0030]梯度洗脱条件：
[0031]时间(min)A相(％)B相(％)0.0060402.0060406.00109010.00109010.10604015.006040
[0032]优选的，本专利技术高效液相色谱系统
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三重四级杆质谱联用仪，质谱条件：
[0033]ESI源正离子检测模式，即ESI(+)；
[0034]在ESI(+)电离模式下时：
[0035]喷雾电压：4500V；
[0036]雾化气压力：60psi；
[0037]辅助气压力：50psi；
[0038]气帘气：35psi；
[0039]源温度：500℃；
[0040]碰撞气压力：9psi。
[0041]优选地，在ESI(+)电离模式下对乙酰氨基苯磺酰氯分析的质谱工作参数如下表1所示：
[0042]表1：ESI(+)电离模式下多对乙酰氨基苯磺酰氯的质谱工作参数
[0043][0044]进一步优选的，配制所述溶液和试剂的步骤如下：
[0045](a)衍生试剂(0.3％苯胺乙腈溶液)：量取苯胺溶液1.5mL，置500mL量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；
[0046](b)对照品贮备液：取对乙酰氨基苯磺酰氯对照品25mg，精密称定，置200mL量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置50mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，再精密量取1mL，置50mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，即得；
[0047](c)对照样品溶液：精密量取对照品贮备液1mL，置20mL量瓶中，精密加入衍生试剂10mL，摇匀，超声30min，取出，放冷至室温，用水稀释至刻度，摇匀，即得；
[0048](d)供试样品溶液：取磺胺甲噁唑40mg，精密称定，置20mL量瓶中，加入乙腈1mL溶解，衍生试剂10mL，摇匀，超声30min，取出，放冷至室温，用水稀释至刻本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于衍生化法定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯的方法，其特征在于，所述方法包括：（1）衍生试剂的制备；（2）衍生空白溶液的制备；（3）对照组贮备液、样品的制备；（4）供试样品的处理：用衍生试剂对供试样品中的乙酰氨基苯磺酰氯进行衍生化处理；（5）加标供试样品的制备；（6）样品的定量分析：三重四级杆液质联用检测上述样品。2.如权利要求1所述的一种基于衍生化法定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯的方法，其特征在于，（1）中，衍生试剂为0.3%（体积浓度）苯胺乙腈溶液；衍生试剂制备条件为：量取苯胺溶液，置于量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。3.如权利要求1所述的一种基于衍生化法定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯的方法，其特征在于，（3）中，对照组样品为已知浓度的4
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乙酰氨基苯磺酰)苯胺溶液，由对乙酰氨基苯磺酰氯溶液加入衍生试剂衍生化得到。4.如权利要求1所述的一种基于衍生化法定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯的方法，其特征在于，（4）中，供试样品为含有对乙酰氨基苯磺酰氯杂质的磺胺甲噁唑，其处理步骤包括：S1 称取含有对乙酰氨基苯磺酰氯杂质的磺胺甲噁唑；S2 乙腈溶解所述的磺胺甲噁唑；S3 向乙腈溶解的磺胺甲噁唑加入（1）中的衍生试剂；S4 加入衍生试剂后，进行室温放置0
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30min或超声0
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45min或水浴振荡0
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45min中的任一种操作，使对乙酰氨基苯磺酰氯与衍生试剂反应生成4
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乙酰氨基苯磺酰)苯胺。5.如权利要求1所述的一种基于衍生化法定量分析对乙酰氨基苯磺酰氯的方法，其特征在于，三重四级杆液质联用检测为采用高效液相色谱...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘永红，齐冬，彭美华，王敏敏，
申请(专利权)人：济南同路医药科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：
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