【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药分析，尤其涉及一种异功颗粒uplc特征图谱的构建方法及其应用。
技术介绍
1、本专利技术
技术介绍
中公开的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、异功颗粒是由人参、茯苓、白术、陈皮、甘草、生姜、大枣7味药材组成的中药复方颗粒，主要用于小儿消化不良属脾虚气滞者，疗效确切，但其化学成分复杂，现有的质量标准难以有效控制药品的内在质量。
3、专利cn 114216986b(授权公告日：2023.04.07)提出了一种异功散hplc特征图谱的构建方法及其hplc标准指纹图谱和应用，其对15批异功散的hplc特征图谱进行合成，生成共有8个特征峰构成的203nm波长条件下异功散的hplc标准指纹图谱。该专利的特征峰较少，同时检测时间较长，达到60min，从而难以高效、全面地在异功颗粒的生产中有效控制其内在质量。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了一种异功颗粒uplc特征图谱的构建方法及其应用，采用本专利技术建立的特征图谱用于异功颗粒的质量检测，具有良好的精密度、稳定性和重复性，可全面、有效地评价异功颗粒的质量。
2、第一方面，本专利技术提供了一种异功颗粒uplc特征图谱的构建方法，包括如下步骤：
3、分别精密吸取混合对照品溶液、供试品溶液，采用超高效液相色谱法测定，建立异功颗粒uplc特征图谱；
4、所述超高效液
5、流动相包括流动相a和流动相b，以乙腈为流动相a，以0.08～0.15wt％的磷酸水溶液为流动相b，进行梯度洗脱，检测波长为199～210nm；
6、所述梯度洗脱程序为：
7、0～8min，流动相a：19wt％，流动相b：81wt％；
8、8～16min，流动相a：19wt％→23wt％，流动相b：81wt％→77wt％；
9、16～34min，流动相a：23wt％→40wt％，流动相b：77wt％→60wt％；
10、所述混合对照品溶液的制备方法具体为：
11、精密称定异甘草苷、甘草素、橙皮苷、人参皂苷re、人参皂苷rb1、人参皂苷rb2对照品，溶于溶剂制成混合对照品溶液。
12、优选的，所述供试品溶液的制备方法为：将异功颗粒研细，加入甲醇，超声处理，冷却后，用甲醇补足损失重量，摇匀，采用滤膜过滤获得供试品溶液。采用超声处理有利于将异功颗粒均匀分散至甲醇中，然而超声处理过程中伴随温度升高，甲醇挥发，浓度升高，导致误差较高，因此冷却后补充甲醇，降低甲醇挥发的影响，减少测量误差。
13、进一步的，所述超声处理的时间为20～40min；所述供试品原料的质量g和溶剂的体积ml的比优选为(0.5～1.5)：(20～30)。
14、优选的，所述色谱柱为waters acquity uplc hss t3(100*2.1mm，1.8μm)，色谱柱的柱温为33～37℃。
15、优选的，所述混合对照品溶液的溶剂为甲醇。甲醇溶解性更好，有利于各化合物的分散，提高检测器对化合物的检测效率，有利于提高检测的稳定性。
16、优选的，流动相的流速为0.2～0.4ml/min，进样量为2～4μl。
17、优选的，所述混合对照品溶液中，异甘草苷的浓度为40～60μg/ml，甘草素的浓度为60～80μg/ml，橙皮苷的浓度为40～60μg/ml，人参皂苷re的浓度为220～240μg/ml，人参皂苷rb1的浓度为190～210μg/ml，人参皂苷rb2的浓度为210～230μg/ml。
18、优选的，所述特征图谱的建立过程为：对不同批次的异功颗粒进行超高效液相色谱检测，将不同批次的异功颗粒的超高效液相色谱进行比对，获得含有甘草苷特征峰、异甘草苷特征峰、甘草素特征峰、橙皮苷特征峰、人参皂苷rg1特征峰、人参皂苷re特征峰、人参皂苷rf特征峰、人参皂苷rb1特征峰、人参皂苷rb2特征峰的共有峰，根据共有峰构建异功颗粒的特征图谱。
19、进一步的，所述甘草苷特征峰、异甘草苷特征峰、甘草素特征峰、橙皮苷特征峰、人参皂苷rg1特征峰、人参皂苷re特征峰、人参皂苷rf特征峰、人参皂苷rb1特征峰、人参皂苷rb2特征峰的确认过程为：将甘草苷、异甘草苷、甘草素、橙皮苷、人参皂苷rg1、人参皂苷re、人参皂苷rf、人参皂苷rb1、人参皂苷rb2分别配成一系列不同浓度的对照品溶液，采用超高效液相色谱分别对异功颗粒和对照品溶液进行检测，根据对照品超高效液相色谱的峰保留时间确定异功颗粒超高效液相色谱的对应特征峰。
20、按照本专利技术上述构建方法获得的特征图谱包含19个特征峰，以甘草素(峰8)作为参照峰s峰(峰s)，计算各特征峰与s峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％之内；规定值为：0.245(峰1)、0.267(峰2)、0.384(峰3)、0.550(峰4)、0.623(峰5)、0.729(峰6)、0.898(峰7)、1.000(峰s)、1.208(峰9)、1.235(峰10)、1.309(峰11)、1.509(峰12)、1.563(峰13)、1.755(峰14)、1.773(峰15)、1.980(峰16)、2.016(峰17)、2.081(峰18)、2.136(峰19)；其中，峰2为甘草苷，峰4为橙皮苷，峰7为异甘草苷，峰s为甘草素，峰9为人参皂苷rg1，峰10为人参皂苷re，峰15为人参皂苷rf，峰17为人参皂苷rb1，峰19为人参皂苷rb2。
21、第二方面，本专利技术提供了上述异功颗粒uplc特征图谱的构建方法在异功颗粒质量控制中的应用，按照所述的构建方法获得异功颗粒uplc特征图谱，对待测样品的特征图谱与所述异功颗粒uplc特征图谱进行相似性评价，相对保留时间在规定值±10％以内的待测样品为合格产品。
22、第三方面，本专利技术提供了一种检测异功颗粒中6种化学成分的方法，包括如下步骤：
23、将供试品溶液采用超高效液相色谱法进行检测，得到6种化学成分的含量，所述6种化学成分包括异甘草苷、甘草素、橙皮苷、人参皂苷re、人参皂苷rb1和人参皂苷rb2；
24、所述超高效液相色谱法检测的条件包括：
25、流动相包括流动相a和流动相b，以乙腈为流动相a，以0.08～0.15wt％的磷酸水溶液为流动相b，进行梯度洗脱；
26、所述梯度洗脱程序为：
27、0～8min，流动相a：19wt％，流动相b：81wt％；
28、8～16min，流动相a：19wt％→23wt％，流动相b：81wt％→77wt％；
29、16～34min，流动相a：23wt％→40wt％，流动相b：77wt％→60wt％；
30、所述超高效液相色谱法采用的色谱柱为waters acquity uplc本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种异功颗粒UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为：将异功颗粒研细，加入甲醇，超声处理，冷却后，用甲醇补足损失重量，摇匀，采用滤膜过滤获得供试品溶液。
3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述超声处理的时间为20～40min；所述供试品原料的质量g和溶剂的体积mL的比优选为(0.5～1.5)：(20～30)。
4.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述色谱柱为Waters ACQUITY UPLCHSS T3(100*2.1mm，1.8μm)，色谱柱的柱温为33～37℃。
5.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述混合对照品溶液的溶剂为甲醇；所述流动相的流速为0.2～0.4mL/min，进样量为2～4μL。
6.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述混合对照品溶液中，异甘草苷的浓度为40～60μg/mL，甘草素的浓度为60～80μg/mL，橙皮苷的浓度为40～60μg/mL，人参皂苷Re的浓度为220～2
7.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述特征图谱的建立过程为：对不同批次的异功颗粒进行超高效液相色谱检测，将不同批次的异功颗粒的超高效液相色谱进行比对，获得含有甘草苷特征峰、异甘草苷特征峰、甘草素特征峰、橙皮苷特征峰、人参皂苷Rg1特征峰、人参皂苷Re特征峰、人参皂苷Rf特征峰、人参皂苷Rb1特征峰、人参皂苷Rb2特征峰的共有峰，根据共有峰构建异功颗粒的特征图谱。
8.如权利要求7所述的构建方法，其特征在于，所述甘草苷特征峰、异甘草苷特征峰、甘草素特征峰、橙皮苷特征峰、人参皂苷Rg1特征峰、人参皂苷Re特征峰、人参皂苷Rf特征峰、人参皂苷Rb1特征峰、人参皂苷Rb2特征峰的确认过程为：将甘草苷、异甘草苷、甘草素、橙皮苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2分别配成一系列不同浓度的对照品溶液，采用超高效液相色谱分别对异功颗粒和对照品溶液进行检测，根据对照品高效液相色谱的峰保留时间确定异功颗粒超高效液相色谱的对应特征峰。
9.如权利要求1～8任一项所述的异功颗粒UPLC特征图谱的构建方法在异功颗粒质量控制中的应用，其特征在于，按照所述的构建方法获得异功颗粒UPLC特征图谱，对待测样品的特征图谱与所述异功颗粒UPLC特征图谱进行相似性评价，相对保留时间在规定值±10％以内的待测样品为合格产品。
10.一种检测异功颗粒中6种化学成分的方法，其特征在于，包括如下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种异功颗粒uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为：将异功颗粒研细，加入甲醇，超声处理，冷却后，用甲醇补足损失重量，摇匀，采用滤膜过滤获得供试品溶液。
3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述超声处理的时间为20～40min；所述供试品原料的质量g和溶剂的体积ml的比优选为(0.5～1.5)：(20～30)。
4.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述色谱柱为waters acquity uplchss t3(100*2.1mm，1.8μm)，色谱柱的柱温为33～37℃。
5.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述混合对照品溶液的溶剂为甲醇；所述流动相的流速为0.2～0.4ml/min，进样量为2～4μl。
6.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述混合对照品溶液中，异甘草苷的浓度为40～60μg/ml，甘草素的浓度为60～80μg/ml，橙皮苷的浓度为40～60μg/ml，人参皂苷re的浓度为220～240μg/ml，人参皂苷rb1的浓度为190～210μg/ml，人参皂苷rb2的浓度为210～230μg/ml。
7.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述特征图谱的建立过程为：...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨晓刚，耿绍轩，马旋，李欣欣，王佳琳，宋寒冰，任松鹏，马振元，
申请(专利权)人：济南同路医药科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：
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