能够控制细胞凝集速度的细胞培养器制造技术

本发明专利技术提供用于简便且迅速、量产性高地制造细胞凝集块的、细胞凝集块制造用基板、细胞凝集块的制造方法。细胞凝集块制造用基板，其在具有抑制细胞附着的能力的基板上具备由下述共聚物形成的斑点，且细胞接种后的凝集块形成完成时间在20小时以内，所述共聚物包含由下述式(I)及(II)表示的单体衍生的重复单元，式中，U

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】能够控制细胞凝集速度的细胞培养器


[0001]本专利技术涉及能够控制细胞凝集速度的细胞凝集块制造用基板及其制造方法、细胞凝集块的制造方法、提高制造细胞凝集块时的细胞培养速度的方法、控制制造细胞凝集块时的凝集块形成速度的方法、以及细胞凝集块形成促进用的细胞培养容器基底剂，所述细胞凝集块制造用基板使用具有特定结构的聚合物作为细胞培养的基底剂。

技术介绍

[0002]细胞凝集块(也称为球状体或细胞块等)是被三维地培养、细胞彼此自组装
·
凝集化而成的细胞集合体，由于构建了生物体样结构，因此报道了能够长期维持细胞的功能，生理功能提高。因此，对于细胞凝集块在创新药物研究中或者在细胞治疗、再生治疗中的应用的期待正在高涨。
[0003]与此相伴，开发能够简便且迅速、均匀且大量地制作细胞凝集块的组织工程技术被认为是用于实现再生医疗的实用化、创新药物试验的高效化的重要课题，但用于制造细胞凝集块的细胞培养有时需要长时间(例如数天)的培养时间，存在量产性不优异的课题。
[0004]专利文献1公开了使用下述聚合物的细胞培养器的制造方法，所述聚合物具有阳离子性官能团及阴离子性官能团、且来自聚(甲基丙烯酸2
‑
N,N
‑
二甲基氨基乙酯)。
[0005]现有技术文献
[0006]专利文献
[0007]专利文献1：日本特开2014
‑
162865号公报

技术实现思路

[0008]专利技术所要解决的课题
[0009]提供用于简便且迅速、量产性高地制造上述细胞凝集块的、细胞凝集块制造用基板及其制造方法、以及细胞凝集块的制造方法等。
[0010]用于解决课题的手段
[0011]本专利技术包含以下的方案。
[0012][1]细胞凝集块制造用基板，其在具有抑制细胞附着的能力的基板上具备由下述共聚物形成的斑点，且细胞接种后的凝集块形成完成时间在20小时以内，所述共聚物包含由下述式(I)表示的单体衍生的重复单元、及由下述式(II)表示的单体衍生的重复单元，
[0013][化学式1][0014][0015][式中，
[0016]U
a1
及U
a2
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a1
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a2
表示碳原子数1至5的直链或支链亚烷基][0017][化学式2][0018][0019][式中，
[0020]R
b
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基]。
[0021][2]如上述[1]所述的细胞凝集块制造用基板，其中，由上述式(I)表示的单体衍生的重复单元相对于由上述式(I)表示的单体衍生的重复单元及由上述式(II)表示的单体衍生的重复单元的合计而言的摩尔比率为99摩尔％～51摩尔％。
[0022][3]如上述[1]或[2]所述的细胞凝集块制造用基板，其中，上述共聚物还包含由下述式(III)表示的单体衍生的结构单元，
[0023][化学式3][0024][0025][式中，
[0026]R
c
及R
d
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
e
表示碳原子数1至5的直链或支链亚烷基，n表示1～50的数字]。
[0027][4]如上述[1]～[3]中任一项所述的细胞凝集块制造用基板，其中，上述细胞为干细胞或成纤维细胞。
[0028][5]如上述[1]～[4]中任一项所述的细胞凝集块制造用基板，其中，上述具有抑制细胞附着的能力的基板在其表面的至少一部分上含有包含下述共聚物(P)的涂覆膜，所述共聚物(P)包含含有下述式(a)表示的基团的重复单元、和含有下述式(b)表示的基团的重复单元，
[0029][化学式4][0030][0031][式中，
[0032]U
a11
、U
a12
、U
b11
、U
b12
及U
b13
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链
烷基，An
‑
表示选自由卤化物离子、无机酸根离子、氢氧化物离子及异硫氰酸根离子组成的组中的阴离子]。
[0033][6]细胞凝集块制造用基板的制造方法，其包括将下述共聚物以多个点状涂布于具有抑制细胞附着的能力的基板上且接着进行干燥的工序，且细胞接种后的凝集块形成完成时间在20小时以内，所述共聚物包含由下述式(I)表示的单体衍生的重复单元、及由下述式(II)表示的单体衍生的重复单元，
[0034][化学式5][0035][0036][式中，
[0037]U
a1
及U
a2
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a1
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a2
表示碳原子数1至5的直链或支链亚烷基][0038][化学式6][0039][0040][式中，
[0041]R
b
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基]。
[0042][7]如上述[6]所述的细胞凝集块制造用基板的制造方法，其中，利用喷墨方式进行上述涂布工序。
[0043][8]细胞凝集块的制造方法，其包括将细胞接种于细胞凝集块制造用基板的工序、和在接种后20小时以内对细胞进行培养而形成凝集块的工序，所述细胞凝集块制造用基板在具有抑制细胞附着的能力的基板上具备由下述共聚物形成的斑点，所述共聚物包含由下述式(I)表示的单体衍生的重复单元、及由下述式(II)表示的单体衍生的重复单元，
[0044][化学式7][0045][0046][式中，
[0047]U
a1
及U
a2
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a1
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a2
表示碳原子数1至5的直链或支链亚烷基][0048][化学式8][0049][0050][式中，
[0051]R
b
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基]。
[0052][9]方法，其是提高制造细胞凝集块时的细胞培养速度的方法，其在具有抑制细胞附着的能力的基板上使用下述共聚物作为细胞培养的基底剂，所述方法通过使由式(I)衍生的重复单元相对于共聚物整体而言的摩尔比率下降来进行，所述共聚物包含由下述式(I)表示的单体衍生的重复单元、及由下述式(II)表示的单体衍生的重复单元，
[0053][化学式9][0054][0055][式中，
[0056]U
a1
及U
a2
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.细胞凝集块制造用基板，其在具有抑制细胞附着的能力的基板上具备由下述共聚物形成的斑点，且细胞接种后的凝集块形成完成时间在20小时以内，所述共聚物包含由下述式(I)表示的单体衍生的重复单元、及由下述式(II)表示的单体衍生的重复单元，[化学式1]式(I)中，U
a1
及U
a2
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a1
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a2
表示碳原子数1至5的直链或支链亚烷基；[化学式2]式(II)中，R
b
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基。2.如权利要求1所述的细胞凝集块制造用基板，其中，由所述式(I)表示的单体衍生的重复单元相对于由所述式(I)表示的单体衍生的重复单元及由所述式(II)表示的单体衍生的重复单元的合计而言的摩尔比率为99摩尔％～51摩尔％。3.如权利要求1或2所述的细胞凝集块制造用基板，其中，所述共聚物还包含由下述式(III)表示的单体衍生的结构单元，[化学式3]式(III)中，R
c
及R
d
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
e
表示碳原子数1至5的直链或支链亚烷基，n表示1～50的数字。4.如权利要求1～3中任一项所述的细胞凝集块制造用基板，其中，所述细胞为干细胞或成纤维细胞。5.如权利要求1～4中任一项所述的细胞凝集块制造用基板，其中，所述具有抑制细胞附着的能力的基板在其表面的至少一部分上含有包含下述共聚物(P)的涂覆膜，所述共聚
物(P)包含含有下述式(a)表示的基团的重复单元、和含有下述式(b)表示的基团的重复单元，[化学式4]式中，U
a11
、U
a12
、U
b11
、U
b12
及U
b13
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，An
‑
表示选自由卤化物离子、无机酸根离子、氢氧化物离子及异硫氰酸根离子组成的组中的阴离子。6.细胞凝集块制造用基板的制造方法，其包括将下述共聚物以多个点状涂布于具有抑制细胞附着的能力的基板上且接着进行干燥的工序，细胞接种后的凝集块形成完成时间在20小时以内，所述共聚物包含由下述式(I)表示的单体衍生的重复单元、及由下述式(II)表示的单体衍生的重复单元，[化学式5]式(I)中，U
a1
及U
a2
各自独立地表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a1
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基，R
a2
表示碳原子数1至5的直链或支链亚烷基；[化学式6]式(II)中，R
b
表示氢原子或者碳原子数1至5的直链或支链烷基。7.如权利要求6所述的细胞凝集块制造用基板的制造方法，其中，利用喷墨方式进行所述涂布工序。8.细胞凝集块的制造方法，其包括将细胞接种于细胞凝集块制造用基板的工序、和在接种后20小时以内对细胞进行培养而形成凝集块的工序，所述细胞凝集块制造用基板在具有抑制细胞附着的能力的基板上具备由下述共聚物形成的斑点，所述共聚物包含由下述式
(I)表示的单体衍生的重复单元、及由下述式(II)表示的单体衍生的重复单元，[化学式7]式(I)中，U
a1...

【专利技术属性】
技术研发人员：铃木康平，深泽菜月，
申请(专利权)人：日产化学株式会社，
类型：发明
国别省市：