一种竹菜板抗菌性能试验方法技术

本发明专利技术公开了一种竹菜板抗菌性能试验方法，包括以下步骤：S10，试验预备：包括预备覆盖膜、阴性对照样品、对照样品、试验样品、培养基和试剂；S20，菌种准备：包括菌种保藏、菌种活化和菌悬液制备；S30，抗菌试验：包括试样接种、接种试样的培养、细菌回收和计算试验结果。本发明专利技术的试验方法能够可靠、准确地对竹菜板抗菌性能进行试验。能进行试验。能进行试验。

【技术实现步骤摘要】
一种竹菜板抗菌性能试验方法


[0001]本专利技术属于检测
，涉及一种竹菜板抗菌性能试验方法。

技术介绍

[0002]随着科技的发展，抗菌技术展现出较为广阔的应用前景，逐步应用到包装材料、日化产品、除菌电器、抗菌涂料及医疗卫生等诸多领域，新型抗菌材料的开发与应用也成为了目前研究的热点。在抗菌材料研制开发过程中不可避免的要用到抗菌性能检测的方法，目前的材料抗菌活性的检测方法存在检测周期较长、操作复杂等缺点。材料抗菌活性检测方法的落后极大地影响了抗菌技术的快速发展，因此有必要建立一种快速有效的抗菌性能定量检测方法。

技术实现思路

[0003]为解决准确、快速检测竹菜板抗菌性能的问题，本专利技术提供了一种竹菜板抗菌性能试验方法，包括以下步骤：
[0004]S10，试验预备：包括预备覆盖膜、阴性对照样品、对照样品、试验样品、培养基和试剂；
[0005]S20，菌种准备：包括菌种保藏、菌种活化和菌悬液制备；
[0006]S30，抗菌试验：包括试样接种、接种试样的培养、细菌回收和计算试验结果。
[0007]优选地，所述S10中的阴性对照样品为直径为80mm
‑
100mm的灭菌平皿的内平板；对照样品和试验样品均为边长为20mm
‑
50mm、厚度不大于5mm的竹菜板或竹片，且均进行消毒；
[0008]S10中的培养基包括营养肉汤和营养琼脂，营养肉汤中包括牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，营养琼脂包括蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠和琼脂。
[0009]优选地，所述S10中的试剂包括消毒剂、洗脱液和培养液。
[0010]优选地，所述S20中菌种保藏为将菌种接种于营养琼脂斜面上，在(36
±
1)℃下培养24h后，作为斜面保藏菌，在0～4℃下保藏，并且保藏不超过1个月。
[0011]优选地，所述S20中的菌种活化为将斜面保藏菌转接到营养琼脂平板上，在(36
±
1)℃下培养24h，每天转接1次，不超过2周，且试验时采用连续转接2次后的新鲜细菌培养物，即24h内转接的。
[0012]优选地，所述S20中菌悬液制备为用接种环从菌种活化后的培养基上刮1～2环新鲜细菌，加入培养液中，并依次做10倍系列稀释液，选择菌液浓度为5.0
×
105cfu/mL～10.0
×
105cfu/mL的稀释液作为试验用菌液。
[0013]优选地，所述S30中试样接种为将阴性对照样品、对照样品和试验样品分别放入无菌的培养皿中，用移液管移取试验用菌液0.4mL分别滴加在阴性对照样品、对照样品和试验样品表面的正中央，每种样品做3个平行，分别记为阴性对照样品A1、A2、A3，对照样品B1、B2、B3和试验样品C1、C2、C3；用灭菌镊子夹起灭菌的覆盖膜分别覆盖在上述9个样品上，并向下按压覆盖膜使菌液向四周扩散，铺展平整，使细菌均匀接触样品，并确保菌液不从薄膜
边缘溢出，并盖上薄膜和培养皿。
[0014]优选地，所述S30中接种试样的培养为将对照样品B1、B2、B3和试验样品C1、C2、C3放入培养箱中，在(36
±
1)℃、相对湿度大于90％条件下培养(24
±
1)h。
[0015]优选地，所述S30中细菌回收包括试样接种后即时测试、试样接种培养后的测试和结果记录，其中，
[0016]试样接种后即时测试，为接种后，立即对阴性对照样品A1、A2、A3进行菌落回收，在各培养皿中加入20mL洗脱液，冲洗试样表面及覆盖膜若干次以洗脱，再对回收液进行10倍系列稀释，选取其中2～3个稀释度，各取1mL置于无菌培养皿中，每个稀释度做2个平板；在每个平板中倾注15mL营养琼脂，摇晃以分散细菌；待琼脂凝固后，倒置平板，并于(36
±
1)℃培养40～48h；
[0017]试样接种培养后的测试，为取出培养(24
±
1)h的对照样品B1、B2、B3及试验样品C1、C2、C3，分别加入20mL洗脱液，进行菌落回收；
[0018]结果记录，为培养后对培养皿中菌落数在30～300范围内的菌落进行计数，记下每个稀释度培养皿上的菌落数及稀释倍数，如所有培养皿中均没有菌落，则记录为＜1。
[0019]优选地，所述S30中计算试验结果为将测定的回收活菌数结果乘以实际稀释倍数，即为阴性对照样品A1、A2、A3，对照样品B1、B2、B3和试验样品C1、C2、C3的实际回收活菌数值，数值分别记为a1、a2、a3、b1、b2、b3、c1、c2和c3，同一样品的3个平行活菌数值要符合：
[0020](最高对数值
‑
最低对数值)/平均活菌数值对数值≤0.3；
[0021]阴性对照样品的实际回收活菌数值a1、a2、a3均不小于1
×
105cfu/片；
[0022]且对照样品的实际回收活菌数值b1、b2、b3应均不小于1
×
104cfu/片；
[0023]抗细菌率按下式计算：
[0024]R(％)＝(B
‑
C)/B
×
100
[0025]其中：
[0026]R——抗细菌率，％；
[0027]B——对照样品平均回收菌数，cfu/片；
[0028]C——试验样品平均回收菌数，cfu/片。
[0029]本专利技术的有益效果如下：
[0030]操作简单、快速准确，实现对竹菜板抗菌性能的可靠检测，比现有技术中方法缩短2到4天，可作为定性检测竹菜板抗菌性能的筛选方法，具有广阔的应用前景。
[0031]独特的培养方式，有效解决在培养过程中因培养液蒸发完后而使目标菌干燥死亡的技术难题。
[0032]可作为定量检测竹菜板抗菌性能的方法，评价抗菌能力的强弱，对推动高抗菌能力的竹菜板产品开发具有积极的意义。
附图说明
[0033]图1为本专利技术方法实施例的竹菜板抗菌性能试验方法的步骤流程图；
[0034]图2为本专利技术方法实施例的竹菜板抗菌性能试验方法中试样接种示意图；
[0035]图3为本专利技术方法实施例的竹菜板抗菌性能试验方法中试样接种俯视示意图。
具体实施方式
[0036]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0037]相反，本专利技术涵盖任何由权利要求定义的在本专利技术的精髓和范围上做的替代、修改、等效方法以及方案。进一步，为了使公众对本专利技术有更好的了解，在下文对本专利技术的细节描述中，详尽描述了一些特定的细节部分。对本领域技术人员来说没有这些细节部分的描述也可以完全理解本专利技术。
[0038]参见图1，为本专利技术实施例的竹菜板抗菌性能试验方法的步骤流程图，包括以下步骤：
[0039]S10，试验预备本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种竹菜板抗菌性能试验方法，其特征在于，包括以下步骤：S10，试验预备：包括预备覆盖膜、阴性对照样品、对照样品、试验样品、培养基和试剂；S20，菌种准备：包括菌种保藏、菌种活化和菌悬液制备；S30，抗菌试验：包括试样接种、接种试样的培养、细菌回收和计算试验结果。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S10中的阴性对照样品为直径为80mm
‑
100mm的灭菌平皿的内平板；对照样品和试验样品均为边长为20mm
‑
50mm、厚度不大于5mm的竹菜板或竹片，且均进行消毒；S10中的培养基包括营养肉汤和营养琼脂，营养肉汤中包括牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，营养琼脂包括蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠和琼脂。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述S10中的试剂包括消毒剂、洗脱液和培养液。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述S20中菌种保藏为将菌种接种于营养琼脂斜面上，在(36
±
1)℃下培养24h后，作为斜面保藏菌，在0～4℃下保藏，并且保藏不超过1个月。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述S20中的菌种活化为将斜面保藏菌转接到营养琼脂平板上，在(36
±
1)℃下培养24h，每天转接1次，不超过2周，且试验时采用连续转接2次后的新鲜细菌培养物，即24h内转接的。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述S20中菌悬液制备为用接种环从菌种活化后的培养基上刮1～2环新鲜细菌，加入培养液中，并依次做10倍系列稀释液，选择菌液浓度为5.0
×
105cfu/mL～10.0
×
105cfu/mL的稀释液作为试验用菌液。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述S30中试样接种为将阴性对照样品、对照样品和试验样品分别放入无菌的培养皿中，用移液管移取试验用菌液0.4mL分别滴加在阴性对照样品、对照样品和试验样品表面的正中央，每种样品做3个平行，分别记为阴性对照样品A1、A2、A3，对照样品B1、B2、B3和试验样品C1、C2、C3；用灭菌镊子夹起灭菌的覆盖膜分别覆盖在上述9个样品上，并向下按压覆盖膜使菌液向四周扩散，铺展平整，使细菌均匀接触样品，并确保菌液不从薄膜边...

【专利技术属性】
技术研发人员：张帅，金莎，林铿，王虹，徐霞，洪紫艳，洪瑜隆，林芝，陈盛，王国军，
申请(专利权)人：台州市产品质量安全检测研究院，
类型：发明
国别省市：