一种从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法和应用，该方法是将拐枣七原料经过回流提取、浓缩、分离、纯化，得到6R

【技术实现步骤摘要】
一种从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法和应用


[0001]本专利技术属于天然产物提取分离
，涉及一种从拐枣七中分离生物碱的方法，具体涉及一种从拐枣七中分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法和应用。

技术介绍

[0002]拐枣七原植物荷青花[Hylomecon japonica(Thunb.)Prantl]为罂粟科 (Papaveraceae)荷青花属(Hylomecon japonica)植物。拐枣七是荷青花[Hylomecon japonica(Thunb.)Prantl]的根，有舒筋活络，散瘀消肿，祛风除湿，止痛止血等功效，临床上常用来治疗风湿性关节炎、跌打损伤、四肢乏力、痢疾、胃脘痛等疾病。现代研究表明，该药用植物富含多种异喹啉类生物碱，并且它们中大多数都有显著的抗肿瘤、抑菌、抗炎及镇痛等药理活性。
[0003]但是，由于拐枣七的化学成分复杂，活性成分结构相似度较大，当前的技术分离困难，对于分离鉴定拐枣七中生物碱含量的报道较少，尤其未见拆分出高纯度对映异构体生物碱的相关报道。

技术实现思路

[0004]为了克服上述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法和应用，能够提取分离获得一对苯并菲啶类对映异构体生物碱，实现了结构相似度大、难分离的一类化合物的分离，尤其是消旋体的拆分。
[0005]为了达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：
[0006]本专利技术公开了一种从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0007]1)取粉碎后的拐枣七药材，采用80％乙醇
‑
水体系回流提取，得到总浸膏，加水进行混悬处理，得到混悬液；
[0008]2)调节混悬液的pH值至2，采用二氯甲烷萃取若干次，合并萃取液后蒸干，得到pH值为2的二氯甲烷部位和酸性提取液部位；
[0009]3)将pH值为2的二氯甲烷部位采用干法上样，常压色谱柱进行分离，以石油醚
‑
乙酸乙酯体系为洗脱剂进行梯度洗脱，TLC检测，合并收集相同馏分，得到含有目标组分的馏分A，浓缩干燥，得到浸膏A；
[0010]4)将步骤3)得到的浸膏A采用正相硅胶色谱柱进行分离，以二氯甲烷
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甲醇体系为洗脱剂进行梯度洗脱，TLC检测，合并收集相同馏分，得到含有目标组分的馏分B，浓缩干燥，得到浸膏B；
[0011]5)将步骤4)得到的浸膏B，以石油醚
‑
乙酸乙酯体系进行梯度洗脱，TLC 检测，合并收集相同馏分，得到含有目标组分的馏分C，浓缩干燥，得到浸膏 C；
[0012]6)将步骤5)得到的浸膏C经半制备型HPLC进行分离，得到一个外消旋的苯并菲啶
类生物碱；
[0013]7)将步骤6)得到的外消旋的苯并菲啶类生物碱采用HPLC进行手性色谱拆分处理，获得一对对映异构体，分别为6R
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carboxymethyl
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dihydrochelerythrine 和6S
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carboxymethyl
‑
dihydrochelerythrine。
[0014]优选地，步骤1)中，回流提取次数为3次，每次3小时。
[0015]进一步优选地，加水进行混悬处理，加的水是温水。
[0016]优选地，步骤2)中，采用10％盐酸溶液调节悬液的pH值。
[0017]优选地，步骤3)中，干法上样是将pH值为2的二氯甲烷部位用100～200 目柱层析硅胶拌样后上样；常压色谱柱进行分离时，石油醚与乙酸乙酯按照 (12:1)～(0:1)的体积比进行梯度洗脱(PE/EtOAc＝12:1～PE/EtOAc＝0:1,V/V)。
[0018]进一步优选地，TLC检测是将所得组分在薄层硅胶板上点样并以展开剂展开，254nm紫外灯下观察，结合碘化铋钾试液显色情况，合并及收集相同馏分。
[0019]优选地，步骤4)中，色谱柱分离时，二氯甲烷和甲醇按照(20:1)～(0:1) 的体积比进行梯度洗脱(CH2Cl2/MeOH＝20:1～CH2Cl2/MeOH＝0:1,V/V)。
[0020]进一步优选地，TLC检测是将所得组分在薄层硅胶板上点样并以展开剂展开，254nm紫外灯下观察，结合碘化铋钾试液显色情况，合并及收集相同馏分。
[0021]优选地，步骤5)中，色谱柱分离时，石油醚和乙酸乙酯按照(8:1)～(0:1) 的体积比进行梯度洗脱(Petroleum ether/Ethyl acetate＝8:1～Petroleum ether/Ethylacetate＝0:1,V/V)。
[0022]进一步优选地，TLC检测是将所得组分在薄层硅胶板上点样并以展开剂展开，254nm紫外灯下观察，结合碘化铋钾试液显色情况，合并及收集相同馏分，
[0023]优选地，步骤6)中，半制备型HPLC分离的色谱条件为：
[0024]色谱仪：岛津LC
‑
2030C 3D高效液相色谱仪；
[0025]色谱柱：Welch Xtimate C18，10
×
250mm，5μm；
[0026]洗脱液：流动相采用50％甲醇
‑
水加0.5％的氨水，流速为：2mL/min，等度洗脱。
[0027]优选地，步骤7)中，采用HPLC进行手性色谱拆分处理的色谱条件为：
[0028]色谱仪：岛津LC
‑
2030C 3D高效液相色谱仪；
[0029]色谱柱：IC，4.6
×
250mm，5μm；
[0030]洗脱液：正己烷：异丙醇＝80:20，流速：0.8mL/min，等度洗脱。
[0031]本专利技术还公开了采用上述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法分离得到的苯并菲啶类生物碱，其构型为S型，命名为6S
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carboxymethyl
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dihydrochelerythrine，结构式如下：
[0032][0033]本专利技术还公开了上述的苯并菲啶类生物碱在制备抗乳腺癌药物中的应用
[0034]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0035]本专利技术首次以拐枣七作为原料通过提取分离纯化，得到一对苯并菲啶类对映异构体生物碱：6R
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carboxymethyl
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dihydrochelerythrine和6S
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carboxymethyl
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dihydrochelerythrine，实现了结构相似度大、难分离的一类化合物的分离，尤其是消旋体的拆分，进一步丰富了对拐枣七中异喹啉类生物碱物质基础的认识，为后续开发新型抗乳腺癌药物或先导化合物提供实验依据。
[0036]本专利技术分离得到的异喹啉类本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)取粉碎后的拐枣七药材，采用80％乙醇
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水体系回流提取，得到总浸膏，加水进行混悬处理，得到混悬液；2)调节混悬液的pH值至2，采用二氯甲烷萃取若干次，合并萃取液后蒸干，得到pH值为2的二氯甲烷部位和酸性提取液部位；3)将pH值为2的二氯甲烷部位采用干法上样，常压色谱柱进行分离，以石油醚
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乙酸乙酯体系为洗脱剂进行梯度洗脱，TLC检测，合并收集相同馏分，得到含有目标组分的馏分A，浓缩干燥，得到浸膏A；4)将步骤3)得到的浸膏A采用正相硅胶色谱柱进行分离，以二氯甲烷
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甲醇体系为洗脱剂进行梯度洗脱，TLC检测，合并收集相同馏分，得到含有目标组分的馏分B，浓缩干燥，得到浸膏B；5)将步骤4)得到的浸膏B，以石油醚
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乙酸乙酯体系进行梯度洗脱，TLC检测，合并收集相同馏分，得到含有目标组分的馏分C，浓缩干燥，得到浸膏C；6)将步骤5)得到的浸膏C经半制备型HPLC进行分离，得到一个外消旋的苯并菲啶类生物碱；7)将步骤6)得到的外消旋的苯并菲啶类生物碱采用HPLC进行手性色谱拆分处理，获得一对对映异构体，分别为6R
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carboxymethyl
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dihydrochelerythrine和6S
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carboxymethyl
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dihydrochelerythrine。2.根据权利要求1所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法，其特征在于，步骤1)中，回流提取次数为3次，每次3小时。3.根据权利要求1所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法，其特征在于，步骤2)中，采用10％盐酸溶液调节悬液的pH值...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭增军，曹珍，张新新，祝上钧，薛兆玮，张钰，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：