【技术实现步骤摘要】
一种用于糖尿病四联指标检测的微流控芯片及其制作和检测方法
[0001]专利技术涉及医疗
,具体为一种用于糖尿病四联指标检测的微流控芯片及其制作和检测方法。
技术介绍
[0002]糖尿病是一种胰岛素分泌不足或细胞利用胰岛素障碍导致的以高血糖为特征的代表性疾病。除血糖外,糖化血红蛋白(HbA1C)可以用作反应过去2
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3 个月平均血糖水平的指标,谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)可以反应是否含有自身胰岛素抵抗的指标。胰岛素可以直接反应机体胰岛素含量。单一的血糖检测,只能反应抽血时的血糖含量,而无法对机体内胰岛素的水平高低及是否存在自身胰岛素抵抗状态提供信息。
[0003]胶乳微球是一类微纳米级别的粒子,通常由聚苯乙烯等高分子材料制作,当与抗体偶联后,与待测物质混合,会产生聚集,从而影响溶液在特定波长下的吸光度,该吸光度变化与待测物浓度正相关。
[0004]POCT,即时检测,旨在病人旁边进行临床检测及床边检测,且操作者通常不为临床检验师。是在采样现场即刻进行分析,省去标本在实验室检验时的复杂处理程序,快速获得检验结果的一类新方法。
[0005]微流控芯片,指在一块几平方厘米的芯片上构建的生物或化学实验室。把生物或化学领域中所涉及的进样、反应、检测等过程集成。具有进样量小,集成度高、易于自动化的特点。
[0006]现有技术为侧向层析技术:通过在硝酸纤维素薄膜上进行侧向层流,与固定在硝酸纤维素薄膜上的捕获抗体,发生抗原抗体反应,捕获标记的荧光微球,通过检测荧光信号来反应检测物 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于糖尿病四联指标检测的微流控芯片,由四个相同的检测芯片单元和出口管道(105)组成,并且分别标号为1单元,2单元、3单元和4单元,其中每个检测芯片单元由样品加样口(101)、试剂储存槽(102)、检测区(103)和废液缓存区(104)组成,其中样品加样口(101)、试剂储存槽(102)、检测区(103)和废液缓存区(104)依次通过管道进行串联,所述出口管道(105)为树状结构,其中一个管道为出口,剩余的每个管道分别连通在每个检测芯片单元上的废液缓存区(104),所述废液缓存区(104)设置三组,并且依次串联,所述出口管道(105)以及四个相同的检测芯片单元分别设置在检测底板(106)的端面上。2.根据权利要求1所述的一种用于糖尿病四联指标检测的微流控芯片的制作,具体步骤如下:步骤1,胶乳微球偶联:取一定量的羧基胶乳微球,放置在离心机中第一次离心,其离心机的转速为10000
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15000rpm/分钟,离心5
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20分钟,第一次离心采用沉淀物为5
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50Mm PH 7.0的磷酸盐溶液调节浓度至0.1%
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2%,超声分散,加入终浓度为0.05
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5mg/ml EDC溶液,充分混匀,再加入终浓度为0.05
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5mg/ml的NHS溶液,混匀,混匀后室温孵育20
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120分钟,室温孵育厚将其放置在离心机中第二次离心,其离心机的转速为10000
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15000rpm/分钟,离心5
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20分钟,第二次离心后采用沉淀物为5
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50Mm PH 7.0的磷酸盐溶液溶解,将复溶后的羧基胶乳微球超声分散,分散后按照0.1
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2mg/ml的羧基胶乳微球的比例分别加入抗糖化血红蛋白抗体、抗胰岛素抗体、谷氨酸脱羧酶抗原,此后,将其放置室温混合孵育1
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3小时,并且放置在离心机中第三次离心,其离心机的转速为10000
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15000rpm离心5
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20分钟,第三次离心后,沉淀物用含5
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40nm乙醇胺和1%酪蛋白的Tris
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HCL溶液复溶,超声分散后室温混合反应1
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3小时,10000
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15000rpm离心5
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20分钟,沉淀用微球保存液复溶,并保持2
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8度存储备用;步骤2,冻干小球:配置氧化酶酚复合溶液,取一定活性单位的葡萄糖氧化酶,过氧化氢酶,proclin300,用PH7.0的磷酸盐缓冲液稀释,2
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8度存储备用,取一定量酚溶于超纯水中,配置成0.1%
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1%的溶液,2
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8度存储备用,去上述二者按照1:0.5
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2的比例混合,分别向胶乳微球溶液和氧化酶酚复合溶液中添加冻干保护液,然后在滴珠机滴珠入液氮成型后置入冻干机冻干,即得到冻干小球,冻干参数为仪器厂家调试后推荐,曲...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈皓,张宝亮,黄茗,
申请(专利权)人:英诺维尔智能科技苏州有限公司,
类型:发明
国别省市:
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