用于多倍体蒲公英植物组织培养的培养基和方法技术

本发明专利技术提供了用于多倍体蒲公英植物组织培养的培养基和方法，属于植物组织培养技术领域。本发明专利技术的培养基包括诱导培养基，本发明专利技术的诱导培养基能够以多倍体蒲公英的叶片为外植体，经过25～30d的诱导培养，可获得愈伤组织，愈伤组织诱导率可达到100％。诱导出的绝大多数愈伤组织状态、长势良好，呈比较湿润的颗粒状，并且愈伤组织在诱导培养基上自主分化形成从生芽，减少了分化步骤，从而有效缩短培养时间。本发明专利技术的培养基还包括增殖培养基和生根培养基。采用本发明专利技术的培养基经25～30d诱导培养、25d增殖培养及25～30d生根培养即可移栽。25d增殖培养及25～30d生根培养即可移栽。25d增殖培养及25～30d生根培养即可移栽。

【技术实现步骤摘要】
用于多倍体蒲公英植物组织培养的培养基和方法


[0001]本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及用于多倍体蒲公英植物组织培养的培养基和方法。

技术介绍

[0002]蒲公英，多年生草本植物，含有多种健康营养成分，耐寒、耐旱、耐阴能力良好，抗逆性强，对光照条件的要求宽泛，能在不同类型的土壤中生长。在我国各地分布广泛，大多都生长于山坡草地、路旁、河岸、沙地和田间，是一种常见的野生植物。
[0003]蒲公英风味独特，营养丰富，食用价值高，可以生食、炒、做汤或泡水喝，此外蒲公英已被开发成多种保健食品；在医药上有广泛的医疗保健作用，具有清热解毒、通淋利尿、健胃消炎、消肿散结等多种功效，还可用作兽药，此外，在养颜护肤方面也有较好的防皱效果，延缓皮肤衰老。近年来国内外对蒲公英的药理作用进行了大量研究，主要集中在抗炎、抗氧化、抗癌、抗高血糖、抗血栓形成、抑菌、抗真菌、抗病毒和保肝利胆等方面。蒲公英作为一种药食兼用植物，在医药、食品、工业等领域的应用价值高，有着广阔的发展前景，以至于人们对它的需求量也与日俱增，已经可以规模化人工栽培。蒲公英的开发利用完成了种植、管理、加工、产销的整体专业化生产，是山区人民致富的一个主要产业。
[0004]人们在进行蒲公英人工栽培的过程中培育出了一些优质栽培种，并且还成功培育出多倍体蒲公英。例如，通过三倍体加倍得到的六倍体蒲公英营养和药用成分较普通蒲公英含量多，具有更高的营养价值和药用价值，实现了以高营养、高药用价值为目的的新品种的育种目标。但是，多倍体植株普遍具有育性下降的特点，其发芽率和结籽率普遍较低且存在生根缓慢的现象，采用多倍体蒲公英种子做发芽实验后，发现种子败育率高，生根缓慢，基本上要一个月至两个月才开始生根，有的甚至不长根，生长也较缓慢，在生产上很难利用。因而，如何实现多倍体蒲公英的高效培育是目前亟待解决的技术问题。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供用于多倍体蒲公英植物组织培养的培养基和方法，本专利技术的方法能够实现多倍体蒲公英的高效培育。
[0006]本专利技术提供了用于多倍体蒲公英植物组织培养的培养基，包括诱导培养基；所述诱导培养基以MS为基础培养基，还包括以下浓度的组分：1.5mg/L的6
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BA、0.5mg/L的NAA和0.01～0.2mg/L的TDZ。
[0007]优选的，所述诱导培养基中TDZ的浓度为0.05～0.1mg/L。
[0008]优选的，所述培养基还包括生根培养基，所述生根培养基以MS为基础培养基，还包括以下浓度的组分：0.5mg/L的NAA和0.5～2mg/L的IBA。
[0009]优选的，所述生根培养基中IBA的浓度为1～1.5mg/L。
[0010]优选的，所述生根培养基还包括活性炭，所述生根培养基中活性炭的浓度为0.6～0.8g/L。
[0011]优选的，所述培养基还包括增殖培养基，所述增殖培养基以MS为基础培养基，还包括以下浓度的组分：1.0mg/L的6
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BA、0.5mg/L的NAA和0.01～0.03mg/L的TDZ。
[0012]本专利技术还提供了一种基于上述方案所述培养基的多倍体蒲公英植物组织培养方法，包括以下步骤：
[0013]1)将多倍体蒲公英的叶片置于诱导培养基中，进行诱导培养，得到丛生芽；
[0014]2)将所述丛生芽接种于生根培养基，进行生根培养，得到再生苗。
[0015]优选的，在得到再生苗后，还包括对所述再生苗进行炼苗后，移栽于基质中进行壮苗培养，得到多倍体蒲公英幼苗。
[0016]优选的，所述基质包括蛭石和菜园土；所述蛭石和菜园土的体积比为(1～2)：1。
[0017]优选的，所述壮苗培养的环境湿度为80％～90％。
[0018]本专利技术提供了用于多倍体蒲公英植物组织培养的培养基，包括诱导培养基，所述诱导培养基以MS为基础培养基，还包括以下浓度的组分：1.5mg/L的6
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BA、0.5mg/L的NAA和0.01～0.2mg/L的TDZ。本专利技术的诱导培养基能够以多倍体蒲公英的叶片为外植体，经过25～30d的诱导培养，可获得愈伤组织，愈伤组织诱导率可达到100％，诱导出的绝大多数愈伤组织状态、长势良好，呈比较湿润的颗粒状，并且愈伤组织在诱导培养基上能自主分化形成从生芽，减少了分化步骤，从而有效缩短培养时间。本专利技术的培养基能够进一步完善多倍体蒲公英高频再生体系，提高多倍体蒲公英的利用价值，进而满足人们在临床、食品、医药等方面对多倍体蒲公英的应用需求，为多倍体蒲公英的研究和产品开发提供一定的理论依据。
附图说明
[0019]图1为不同TDZ的浓度对外植体表现的影响；其中：A、B、C、D、E为12d时外植体的状态；1、2、3、4、5为25d时外植体的状态；
[0020]图2为蒲公英的增殖分化情况；其中：A、B、C为增殖分化10d时TDZ为0.01mg/L、0.03mg/L、0.05mg/L的培养情况；D、E、F为25d时TDZ为0.01mg/L、0.03mg/L、0.05mg/L的培养情况；
[0021]图3为蒲公英生根情况；其中A、B、C为生根培养10d时IBA为1mg/L、1.5mg/L、2mg/L的生根情况；D、E、F为70d后从瓶中取出的再生苗。
具体实施方式
[0022]本专利技术提供了用于多倍体蒲公英植物组织培养的培养基，包括诱导培养基；所述诱导培养基以MS为基础培养基，还包括以下浓度的组分：1.5mg/L的6
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BA、0.5mg/L的NAA和0.01～0.2mg/L的TDZ，进一步优选以MS为基础培养基，还只含有以下浓度的组分：1.5mg/L的6
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BA、0.5mg/L的NAA和0.01～0.2mg/L的TDZ。
[0023]多倍体蒲公英叶片在本专利技术的诱导培养基中培养能够形成明显的愈伤组织，且诱导出的愈伤组织状态、长势良好，呈比较湿润的颗粒状态。在本专利技术中，所述诱导培养基中TDZ的浓度优选为0.05～0.1mg/L，在这一浓度范围内，多倍体蒲公英叶片可直接分化产生丛生芽，且分化产生丛生芽的数量多、长势良好。低浓度TDZ更易产生芽的自主分化，随着TDZ的浓度的升高，由于TDZ的促进细胞分裂作用，更多是趋向于愈伤组织的产生，更易形成
愈伤组织，愈伤组织的大小、质地也随之变的更佳。
[0024]在本专利技术中，所述培养基优选的还包括生根培养基，所述生根培养基以MS为基础培养基，优选的还包括以下浓度的组分：0.5mg/L的NAA和0.5～2mg/L的IBA；进一步优选以MS为基础培养基，还只含有以下浓度的组分：进一步优选以MS为基础培养基，还只含有以下浓度的组分。在本专利技术中，所述生根培养基中IBA的浓度优选为1～1.5mg/L。在本专利技术中，所述生根培养基优选的还包括活性炭，所述生根培养基中活性炭的浓度优选为0.6～0.8g/L；所述活性炭有利于诱导生根，进行根分化培养。本专利技术的生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于多倍体蒲公英植物组织培养的培养基，包括诱导培养基；所述诱导培养基以MS为基础培养基，还包括以下浓度的组分：1.5mg/L的6
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BA、0.5mg/L的NAA和0.01～0.2mg/L的TDZ。2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述诱导培养基中TDZ的浓度为0.05～0.1mg/L。3.根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于，所述培养基还包括生根培养基，所述生根培养基以MS为基础培养基，还包括以下浓度的组分：0.5mg/L的NAA和0.5～2mg/L的IBA。4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，所述生根培养基中IBA的浓度为1～1.5mg/L。5.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，所述生根培养基还包括活性炭，所述生根培养基中活性炭的浓度为0.6～0.8g/L。6.根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于，所述培养基还包括增殖培养基，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张建，武彦芳，马千一，王丹，蒲代琴，阿呷布以，阿库日席，王宇，
申请(专利权)人：宜宾学院，
类型：发明
国别省市：