一种香蕉胚性愈伤组织的诱导方法及其培养基技术

本发明专利技术提供了一种香蕉胚性愈伤组织的诱导方法及其培养基，属于植物组织培养技术领域。本发明专利技术通过外植体的选择、特定的两步诱导处理，结合设计的诱导培养基配方等，建立了高效稳定的胚性愈伤组织诱导体系，克服了现有技术中香蕉胚性愈伤组织的诱导方法诱导率低、诱导时间长、具有品种基因型局限性等问题。本发明专利技术能够显著降低诱导培养过程中的褐化问题、提高了胚性愈伤组织诱导率、缩短了诱导时间，且适合多种不同基因型香蕉品种，可为香蕉的体胚发生体系的建立奠定基础，也为香蕉的生物技术育种提供一种有力的技术保障。育种提供一种有力的技术保障。育种提供一种有力的技术保障。

【技术实现步骤摘要】
一种香蕉胚性愈伤组织的诱导方法及其培养基


[0001]本专利技术涉及植物组织培养
，尤其涉及一种香蕉胚性愈伤组织的诱导方法及其培养基。

技术介绍

[0002]香蕉是世界重要的水果兼粮食作物，也是全球鲜果消费量和贸易额最大的水果。但主栽香蕉品种单一、优良品种匮乏及多种环境胁迫严重威胁着香蕉产业的健康发展。培育高产、高抗病、抗逆香蕉新品种是目前世界香蕉产业迫切解决的问题，而传统杂交育种因绝大多数香蕉品种高度不育而使得传统杂交育种极为困难，一般的诱变育种又具有盲目性大、诱变效率极低且嵌合体比例高，很难诱变出新的优良性状，而基因工程育种是解决香蕉育种难题的一个有力的新途径。
[0003]目前香蕉转基因育种进展缓慢，最关键的问题是没有建立一套高效、稳定的体胚发生体系。体细胞胚胎发生体系具有遗传稳定性强、再生率高、不受自然条件限制等优点。体胚发生过程通常包括胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体细胞胚的分化成熟和体胚萌发及植株再生等几个阶段。而胚性愈伤组织诱导作为体胚发生的第一步在香蕉体胚发生体系中具有重要地位。
[0004]有关香蕉胚性愈伤组织的诱导方法、继代增殖、体胚再生和遗传转化等相关文章虽然也有不少报道，但是都或多或少存在一些缺陷，如胚性愈伤组织诱导率低、诱导时间长、具有品种基因型局限性等问题。而导致前期研究中胚性愈伤组织诱导率低的主要原因是培养过程中容易褐化、以及诱导出的胚性愈伤比例极低。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种香蕉胚性愈伤组织的诱导方法及其培养基，以解决现有技术中香蕉胚性愈伤组织诱导效果较差的问题。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了一种香蕉胚性愈伤组织前体的诱导培养基，以水为溶剂，包含如下浓度的组分：
[0008]KNO32800～2850mg/L、(NH4)2SO4400～500mg/L、KH2PO4300～500mg/L、MgSO4·
7H2O 150～200mg/L、CaCl2·
2H2O 100～200mg/L、Na2EDTA 35～40mg/L、FeSO4·
7H2O 25～30mg/L、肌醇80～120mg/L、盐酸硫胺素5～15mg/L、盐酸吡哆素0.5～1.5mg/L、烟酸0.5～1.5mg/L、MnSO4·
4H2O 5～15mg/L、ZnSO4·
7H2O 1.5～2.5mg/L、H3BO32.5～3.5mg/L、KI 0.5～1.0mg/L、Na2MoO4·
2H2O 0.1～0.5mg/L、CuSO4·
5H2O 0.01～0.05mg/L、CoCl2·
6H2O 0.01～0.05mg/L、2,4
‑
D 2～6mg/L、生物素0.5～1.5mg/L、NAA 0.5～1.5mg/L、IAA0.5～1.5mg/L、谷氨酰胺80～120mg/L、麦芽提取物50～150mg/L、活性炭0.3～0.8g/L、蔗糖20～50g/L、卡拉胶5～10g/L。
[0009]本专利技术还提供了一种香蕉胚性愈伤组织的诱导培养基，包含如下浓度的组分：
[0010]KNO32800～2850mg/L、(NH4)2SO4400～500mg/L、KH2PO4300～500mg/L、MgSO4·
7H2O 150～200mg/L、CaCl2·
2H2O 100～200mg/L、甘氨酸1.5～2.5mg/L、肌醇80～120mg/L、盐酸硫胺素0.2～0.6mg/L、盐酸吡哆素0.3～0.8mg/L、烟酸0.2～0.8mg/L、Na2EDTA35～40mg/L、FeSO4·
7H2O 25～30mg/L、MnSO4·
4H2O 20～25mg/L、ZnSO4·
7H2O 5～10mg/L、H3BO35～10mg/L、KI 0.5～1.0mg/L、Na2MoO4·
2H2O 0.1～0.5mg/L、CuSO4·
5H2O 0.01～0.05mg/L、CoCl2·
6H2O 0.01～0.05mg/L、6
‑
BA 0.05～0.15mg/L、谷氨酰胺150～250mg/L、活性炭0.1～0.3g/L、蔗糖20～50g/L、卡拉胶5～10g/L。
[0011]本专利技术还提供了一种香蕉胚性愈伤组织的诱导方法，包括以下步骤：
[0012]将香蕉离体材料接入上述的香蕉胚性愈伤组织前体的诱导培养基中，培养30～45d，得到香蕉胚性愈伤组织前体；
[0013]将所得香蕉胚性愈伤组织前体接入上述的香蕉胚性愈伤组织的诱导培养基中，培养45～90d，得到香蕉胚性愈伤组织。
[0014]优选的，所述香蕉离体材料来自幼嫩吸芽、多芽体或组培苗茎段基部。
[0015]优选的，所述香蕉离体材料的厚度为1～3mm。
[0016]优选的，所述培养的温度为25～28℃。
[0017]优选的，所述培养在黑暗中进行。
[0018]本专利技术的技术方案和优点：
[0019]本专利技术通过外植体的选择、特定的两步诱导处理，结合设计的诱导培养基配方等，建立了高效稳定的胚性愈伤组织诱导体系，本专利技术明显降低了诱导培养过程中的褐化问题、提高了胚性愈伤组织诱导率、缩短了诱导时间，且适合多种不同基因型香蕉品种，可为香蕉的体胚发生体系的建立奠定基础，也为香蕉的生物技术育种提供一种有力的技术保障。
附图说明
[0020]图1为“香粉1号”多芽体的胚性愈伤组织前体；
[0021]图2为“香粉1号”多芽体的胚性愈伤组织；
[0022]图3为“香粉1号”组培苗茎段基部的胚性愈伤组织前体；
[0023]图4为“8818
‑
1”多芽体的胚性愈伤组织前体；
[0024]图5为“巴西蕉”多芽体的胚性愈伤组织前体；
[0025]图6为“广粉1号”多芽体的胚性愈伤组织；
[0026]图7为不同培养基得到的褐化程度；
[0027]图8为本专利技术胚性愈伤组织诱导流程图。
具体实施方式
[0028]本专利技术提供了一种香蕉胚性愈伤组织前体的诱导培养基，以水为溶剂，包含如下浓度的组分：
[0029]KNO32800～2850mg/L、(NH4)2SO4400～500mg/L、KH2PO4300～500mg/L、MgSO4·
7H2O 150～200mg/L、CaCl2·
2H2O 100～200mg/L、Na2EDTA 35～40mg/L、FeSO4·
7H2O 25～30mg/L、肌醇80～120mg/L、盐酸硫胺素5～15mg/L、盐酸吡哆素0.5～1.5mg/L、烟酸0.5～1.5mg/
150～200mg/L、CaCl2·
2H2O 100～200mg/L、甘氨酸1.5～2.5mg/L、肌醇80～120mg/L、盐酸硫胺本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种香蕉胚性愈伤组织前体的诱导培养基，其特征在于，以水为溶剂，包含如下浓度的组分：KNO32800～2850mg/L、(NH4)2SO4400～500mg/L、KH2PO4300～500mg/L、MgSO4·
7H2O 150～200mg/L、CaCl2·
2H2O 100～200mg/L、Na2EDTA 35～40mg/L、FeSO4·
7H2O 25～30mg/L、肌醇80～120mg/L、盐酸硫胺素5～15mg/L、盐酸吡哆素0.5～1.5mg/L、烟酸0.5～1.5mg/L、MnSO4·
4H2O 5～15mg/L、ZnSO4·
7H2O 1.5～2.5mg/L、H3BO32.5～3.5mg/L、KI 0.5～1.0mg/L、Na2MoO4·
2H2O 0.1～0.5mg/L、CuSO4·
5H2O 0.01～0.05mg/L、CoCl2·
6H2O 0.01～0.05mg/L、2,4
‑
D 2～6mg/L、生物素0.5～1.5mg/L、NAA 0.5～1.5mg/L、IAA0.5～1.5mg/L、谷氨酰胺80～120mg/L、麦芽提取物50～150mg/L、活性炭0.3～0.8g/L、蔗糖20～50g/L、卡拉胶5～10g/L。2.一种香蕉胚性愈伤组织的诱导培养基，其特征在于，包含如下浓度的组分：KNO32800～2850mg/L、(NH4)2SO4400～500mg/L、KH2PO4300～500mg/L、MgSO4·
7H2O 150～200mg/L、CaCl2·
2H2O 100～200mg/...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡玉林，胡会刚，谢江辉，孙德权，肖伟军，梁桂琼，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院南亚热带作物研究所，
类型：发明
国别省市：