一种UHPLC特征图谱联合多指标成分含量测定控制清肺达原颗粒质量的方法技术

本发明专利技术涉及一种UHPLC特征图谱联合多指标成分含量测定控制清肺达原颗粒质量的方法，包括如下步骤：(1)供试品溶液的制备：制备清肺达原颗粒供试品溶液；(2)对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a、黄芩苷、黄芩素、党参炔苷、氢溴酸槟榔碱、厚朴酚、和厚朴酚、芒果苷、芍药苷、甘草苷、甘草酸铵、橙皮苷、大黄素及白藜芦醇，配成对照品溶液；(3)特征图谱的制定：分别吸取供试品溶液和对照品溶液，注入UHPLC色谱仪，以最小峰面积≥0.5

【技术实现步骤摘要】
一种UHPLC特征图谱联合多指标成分含量测定控制清肺达原颗粒质量的方法


[0001]本专利技术属于中药检测及质量控制
，具体地说，涉及一种UHPLC特征图谱联合多指标成分含量测定控制清肺达原颗粒质量的方法。

技术介绍

[0002]中药复方制剂均为多组分复杂体系，质量控制难度较大。特征图谱是一种综合的可量化的质量控制手段，能较全面地反映复方制剂中所含成分类型与种类。当特征图谱结合标志成分含量测定时，能从定性、定量等两方面对药品质量进行整体描述和评价，对于阐明药效物质基础，促进中药现代化具有重要意义。
[0003]然而，因中药复方成分复杂性及各成分之间理化性质差异性，通常很难通过一个色谱条件同时进行中药制剂特征图谱、多指标含量检测，通常需要针对特征图谱、各指标成分含量建立多个检测方法，这样建立的质量标准虽然能对药品质量进行整体描述和评价，实际检测工作量则非常大，检测成本也普遍成倍增加。另一方面，目前中药指纹图谱使用较多仍然以普通HPLC色谱法为主，为了得到更多色谱信息，通过每一个样品检测时间需要1
‑
2小时，检测效率较低。
[0004]CN111467451A和CN 113181124A是专利技术人在先申请的专利，主要公开了本专利技术所述清肺达原颗粒由柴胡18
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25份、黄芩8
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15份、法半夏8
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15份、全瓜蒌8
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15份、党参15
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20份、槟榔8
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15份、草果15<br/>‑
20份、厚朴15
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20份、知母8
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15份、赤芍8
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15份、甘草8
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15份、陈皮8
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15份、虎杖8
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15份组成，所述清肺达原颗粒在治疗新型冠状病毒肺炎及其他呼吸道病毒作用，以及通过普通HPLC含量测定方法。目前关于清肺达原颗粒特征图谱、多指标含量检测质量控制方法方面尚无研究报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的就是提供一种UHPLC特征图谱联合多指标成分含量测定控制清肺达原颗粒质量的方法，解决现有技术中对清肺达原颗粒质量缺乏精准的质量控制方法问题，提高分析效率。
[0006]本专利技术的技术方案为：
[0007]一种UHPLC特征图谱联合多指标成分含量测定控制清肺达原颗粒质量的方法，所述清肺达原颗粒柴胡18
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25份、黄芩8
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15份、法半夏8
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15份、全瓜蒌8
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15份、党参15
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20份、槟榔8
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15份、草果15
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20份、厚朴15
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20份、知母8
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15份、赤芍8
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15份、甘草8
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15份、陈皮8
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15份、虎杖8
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15份组成；所述质量控制方法包括如下步骤：
[0008](1)供试品溶液的制备：取待测清肺达原颗粒制剂，制成供试品溶液；
[0009](2)对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a、黄芩苷、黄芩素、党参炔苷、氢溴酸槟榔碱、厚朴酚、和厚朴酚、芒果苷、芍药苷、甘草苷、甘草酸铵、橙皮苷、大黄素及白藜芦醇，配成混合对照品溶液；
[0010](3)特征图谱的制定：分别吸取供试品溶液和对照品溶液，注入UHPLC色谱仪，以最小峰面积≥0.5
‰
总峰面积积分，依据15批供试品所测得的图谱中的共有峰，得到特征图谱；
[0011](4)选择分离度Ri≥1.5的9个成分标志性成分，即黄芩苷、黄芩素、甘草酸、芒果苷、和厚朴酚、芍药苷、橙皮苷、大黄素、柴胡皂苷a，进行含量测定，通过各成分含量进行产品质量控制。
[0012]优选地，所述的步骤(1)中，供试品溶液的制备方法为：取本品粉末0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇10ml，密塞，称定重量，在功率为250W、频率为40kHz条件下超声处理20分钟，自然冷却，再称定重量，用体积浓度为50％的乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0013]优选地，所述的步骤(3)中，色谱条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为乙腈A、流动相B为0.12％甲酸溶液，进行梯度洗脱；检测波长为200
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280nm，柱温为25
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35℃；流速为0.25
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0.45ml/min；理论板数按黄芩苷计算应不低于2800。
[0014]进一步的，所述色谱柱为ACQUITYHSS T3；流动相为乙腈A
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0.12％甲酸溶液B，所述梯度洗脱条件为，0
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4min,90
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88％B；4
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11min,88
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80％B；11
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21min,80
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60％B；21
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25min,60
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20％B；25
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29min,20％B；检测波长为230nm；柱温为30℃；流速为0.4ml/min。在该色谱条件下，峰7(芒果苷)、峰10(芍药苷)、峰18(橙皮苷)、峰23(黄芩苷)、峰30(黄芩素)分离效果更佳，可用于含量测定。
[0015]更进一步的，所述流速为0
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21min,0.4ml/min；21
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29min,0.3ml/min。在该色谱条件下，峰37(甘草酸)、峰38(柴胡皂苷a)、峰39(大黄素)、峰40(和厚朴酚)分离效果更佳，可用于含量测定。
[0016]本专利技术所述特征图谱有42个共有峰，其中能完全分离(Ri≥1.5)12个，不能完全分离(0.75≤Ri≤1.5)15个，分离效果不佳(Ri≤0.75)15个。以参照物色谱峰保留时间为基准，计算其他共有色谱峰的相对保留时间，其相对保留时间不超过平均值的
±
10％，优选为
±
5％；待测制剂的特征图谱与对照特征图谱的相似度，为0.9
‑
1.0。
[0017]本专利技术所述的步骤(4)中9个标志性成分的含量为：黄芩苷≥130μg/mL、黄芩素≥35μg/mL、甘草酸≥20μg/mL、芒果苷≥5μg/mL、和厚朴酚≥4μg/mL、芍药苷≥20μg/mL、橙皮苷≥10μg/mL、大黄素≥3μg/mL、柴胡皂苷a≥1.5μg/mL。
[0018]本专利技术利用超高效液相色谱(UHPLC)法提供了一种既能通过一个色谱条件实现特征图谱，多指标含量测定，同时又能缩短检测周期的清肺达原颗粒质量的方法。从特征图谱联合多指标成分含量测定进行定性、定量等两方面对本专利技术所述中药复方颗粒质量进行整体描述和评价。同普通HPLC法相比，本专利技术提供的方法选择性更高、分析速本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种UHPLC特征图谱联合多指标成分含量测定控制清肺达原颗粒质量的方法，所述清肺达原颗粒由柴胡18
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25份、黄芩8
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15份、法半夏8
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15份、全瓜蒌8
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15份、党参15
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20份、槟榔8
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15份、草果15
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20份、厚朴15
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20份、知母8
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15份、赤芍8
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15份、甘草8
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15份、陈皮8
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15份、虎杖8
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15份组成，其特征在于，所述质量控制方法包括如下步骤：(1)供试品溶液的制备：取待测清肺达原颗粒，制成供试品溶液；(2)对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a、黄芩苷、黄芩素、党参炔苷、氢溴酸槟榔碱、厚朴酚、和厚朴酚、芒果苷、芍药苷、甘草苷、甘草酸铵、橙皮苷、大黄素及白藜芦醇，配成混合对照品溶液；(3)特征图谱的制定：分别吸取供试品溶液和对照品溶液，注入UHPLC色谱仪，以最小峰面积≥0.5
‰
总峰面积积分，依据15批供试品所测得的图谱中的共有峰，得到特征图谱；(4)选择分离度Ri≥1.5的9个标志性成分，即黄芩苷、黄芩素、甘草酸、芒果苷、和厚朴酚、芍药苷、橙皮苷、大黄素、柴胡皂苷a，进行含量测定，通过各成分含量进行产品质量控制。2.根据权利要求1所述的一种UHPLC特征图谱联合多指标含量测定控制清肺达原颗粒质量的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中，供试品溶液的制备方法为：取本品粉末0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇10ml，密塞，称定重量，在功率为250W、频率为40kHz的条件下超声处理20分钟，自然冷却，再称定重量，用体积浓度为50％的乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。3.根据权利要求1所述的一种UHPLC特征图谱联合多指标含量测定控制清肺达原颗粒质量的方法，其特征在于，所述的步骤(3)中，色谱条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为乙腈，流动相B为0.12％甲酸溶液，进行梯度洗脱；检测波长为200
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280nm，柱温为25
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35℃；流速为0....

【专利技术属性】
技术研发人员：成焕波，翟红伟，石瑞雪，胡辉，孙代华，李清安，
申请(专利权)人：劲牌持正堂药业有限公司，
类型：发明
国别省市：