抗核抗体谱检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种抗核抗体谱检测试剂盒及其检测方法，该检测试剂盒包括平行包被有若干抗原的检测膜条、酶结合物、样本缓冲液及底物液。其中，所述检测膜条包被的抗原包括nRNP/Sm、Sm、SS

【技术实现步骤摘要】
抗核抗体谱检测试剂盒及其检测方法


[0001]本专利技术涉及试剂盒领域，尤其涉及一种抗核抗体谱检测试剂盒及其检测方法。

技术介绍

[0002]自身免疫病(Autoimmune diseases)是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病。抗核抗体(ANA)是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称，其无器官和种属特异性，迄今已有二十余种抗核内不同成分的抗核抗体被相继发现。ANA在未治疗的SLE(系统性红斑狼疮)患者中的滴度较高，在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性，如SLE、 RA(类风湿关节炎)、混合性结缔组织病(MCTD)、干燥综合征(SS)、硬皮病、慢性活动性肝炎。抗核抗体以被美国风湿病学会列为自身免疫性疾病检测的首选项目之一。各种ANA在不同的自身免疫性疾病中出现不同组合，可形成各种疾病或疾病亚群的特征性抗体谱。ANA
‑
谱检测可以区分各亚类ANA抗体，对协助临床诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价都具有重要意义。

技术实现思路

[0003]专利技术目的：本专利技术提供了一种抗核抗体谱检测试剂盒及其检测方法，该检测试剂盒能够通过免疫印迹法进行体外半定量检测人血清或血浆中的抗 nRNP/Sm、Sm、SS
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A(天然SS
‑
A和Ro
‑
52)、SS
‑
B、Scl
‑
70、PM
‑
Scl、Jo
‑
1、 CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P蛋白和AMAM2共14 种不同抗原的抗体。
[0004]技术方案：本专利技术的抗核抗体谱检测试剂盒，包括平行包被有若干抗原的检测膜条、酶结合物、样本缓冲液及底物液。
[0005]其中，所述检测膜条包被的抗原包括nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、SS
‑
B、Scl
‑
70、 PM
‑
Scl、Jo
‑
1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P蛋白和 AMA M2中的至少6种。
[0006]所述抗原SS
‑
A包括天然SS
‑
A和Ro
‑
52中的一种或两种。
[0007]检测膜条包被的抗原优选以下几种组合方式：
[0008](1)nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、Ro
‑
52、SS
‑
B、Scl
‑
70和Jo
‑
1；
[0009](2)nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、Ro
‑
52、SS
‑
B、Scl
‑
70、Jo
‑
1和核糖体P蛋白；
[0010](3)nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、Ro
‑
52、SS
‑
B、Scl
‑
70、PM
‑
Scl、Jo
‑
1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P蛋白和AMA M2；
[0011](4)nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、Ro
‑
52、SS
‑
B、Scl
‑
70、Jo
‑
1、CENP B、dsDNA、核小体、组蛋白和核糖体P蛋白；
[0012](5)nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、Ro
‑
52、SS
‑
B、Scl
‑
70、PM
‑
Scl、Jo
‑
1、CENP B、PCNA、核小体、组蛋白、核糖体P蛋白和AMA M2；
[0013](6)nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、Ro
‑
52、SS
‑
B、Scl
‑
70、Jo
‑
1、CENP B、核小体、组蛋白和核糖体P蛋白；
[0014](7)nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、Ro
‑
52、SS
‑
B、Scl
‑
70、Jo
‑
1、CENP B、PCNA、组蛋白和核糖体P
蛋白；
[0015](8)nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、Ro
‑
52、SS
‑
B、Scl
‑
70、PM
‑
Scl、Jo
‑
1、CENPB、PCNA、组蛋白、核糖体P蛋白和AMA M2。
[0016]所述酶结合物包括碱性磷酸酶标记的羊抗人IgG、IgA和IgM中的一种或几种。
[0017]其中，酶结合物的pH值为7
‑
7.1，还包括三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)、氯化钠、BSA(牛血清白蛋白)、蔗糖、防腐剂(Proclin 300)、Brij 35(月桂醇聚氧乙烯醚)、对乙酰氨基酚、硫酸庆大霉素、吐温20。
[0018]每升酶结合物中各成分的含量为：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)5.451
‑
6.663g、氯化钠8.1
‑
9.9g、BSA(牛血清白蛋白)22.5
‑
27.5g、蔗糖13.5
‑
16.5g、防腐剂(Proclin300)0.9
‑
1.1ml、Brij 35(月桂醇聚氧乙烯醚)0.9
‑
1.1g、对乙酰氨基酚0.45
‑
0.55g、硫酸庆大霉素0.036
‑
0.044g、吐温20 0.45
‑
0.55ml、AP酶羊抗人0.72
‑
0.88mg/L。
[0019]酶结合物的pH值优选7.05，每升酶结合物中各成分含量优选：三(羟甲基) 氨基甲烷(Tris)6.057g、氯化钠9g、BSA(牛血清白蛋白)25g、蔗糖15g、防腐剂(Proclin 300)1ml、Brij 35(月桂醇聚氧乙烯醚)1g、对乙酰氨基酚0.5g、硫酸庆大霉素0.04g、吐温20 0.5ml、AP酶羊抗人0.8mg/L。
[0020]所述酶结合物进行了10倍浓缩，使用时需用样本缓冲液稀释，且稀释后需在一日内使用。
[0021]所述检测试剂盒还包括清洗缓冲液。
[0022]所述清洗缓冲液包括TBST缓冲液(Tris
‑
氯化钠
‑
吐温20)。其中，清洗缓冲液的pH值为7
‑
8，还包括Proclin 300。
[0023]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗核抗体谱检测试剂盒，其特征在于，包括平行包被有若干抗原的检测膜条、酶结合物、样本缓冲液及底物液，其中，所述检测膜条包被的抗原包括nRNP/Sm、Sm、SS
‑
A、SS
‑
B、Scl
‑
70、PM
‑
Scl、Jo
‑
1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P蛋白和AMA M2中的至少6种。2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述抗原SS
‑
A包括天然SS
‑
A和Ro
‑
52中的一种或两种。3.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述酶结合物包括碱性磷酸酶标记的羊抗人IgG、IgA和IgM中的一种或几种。4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述酶结合物进行10倍浓缩，使用时需用样本缓冲液稀释。5.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒还包括清洗缓冲液，所述清洗缓冲液进行了10倍浓缩，包括TBST缓冲液。6.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶瑞，谢红梅，
申请(专利权)人：苏州邦器生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：