一种用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌及其应用，该内生细菌为路德维希肠杆菌(Enterobacter ludwigii)，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.24763，该路德维希肠杆菌16S rDNA保守序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术通过对耐盐的植物秋茄和木榄以及耐铅的东南景天这3种植物的内生细菌进行分离，得到三者共有的一种内生细菌，即路德维希肠杆菌。该菌具有促进其受体植物在盐碱地和铅污染土壤生长的能力，将其转接到农作物体内可促进其在铅污染盐碱地以及铅污染或盐碱地单一胁迫条件下的生长。通过内生细菌与作物之间的互作，不仅可提高作物自身耐盐和耐铅能力，保证产品的安全性，而且还能缩短育种周期。而且还能缩短育种周期。而且还能缩短育种周期。

【技术实现步骤摘要】
一种用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌及其应用


[0001]本专利技术涉及铅污染盐碱地植物修复
，且特别涉及一种用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌及其应用。

技术介绍

[0002]盐碱地是重要的后备土地资源，利用盐碱地种植可耐盐的经济作物可为人类的粮食供应提供新的保障，同时盐碱地是巨大的碳库，在碳循环中扮演着重要的角色，在生态系统构成中具有不可替代的作用。然而，随着矿产开采和工业废水的排放，重金属镉(Cd)、铅(Pb)等污染物通过水网输入，从而造成严重的土壤污染，其中就包括一部分盐渍化后备土地。Cd、Pb在土壤中滞留时间长，易在表土积累并可被植物吸收，是土壤
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植物生态系统中主要的重金属污染。
[0003]土地资源是很宝贵的，抗盐碱作物发展起来对提高土地增量是很有意义的。到目前为止，人们已经采用各种方法来培育耐盐或耐铅的农作物，以有效利用盐碱地或铅污染的土壤。传统育种和基因工程方法被用于培育耐盐的高产作物或培育耐铅的农作物。但是，一方面传统的育种属于劳动密集型且耗时的育种方式。另一方面其在培育一种性状过程中往往会失去其他有益性状，且单次育种只适用于某种作物，而植物基因工程，特别是转基因作物，虽然技术先进，但其商业化应用也受到时间和劳动力的影响，而且由于不同国家消费者对转基因植物产品的认可度不同，因此不能保证转基因产品在市场上的需求度。此外，现有的耐盐或者耐铅农作物的培育往往只针对单一问题，无法解决耐盐和耐铅二者兼顾的问题。目前用于促进盐碱地或者铅污染地农作物生长的内生细菌的种类少，也尚未见到能促进铅污染盐碱的植物的内生细菌的相关报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌及其应用，通过对耐盐的植物秋茄和木榄以及耐铅的东南景天这3种植物的内生细菌进行分离，得到路德维希肠杆菌，该菌具有促进其受体植物在铅污染盐碱地以及在铅胁迫或盐胁迫单一胁迫条件下生长的能力，从而可提高我国的土地资源的利用率，增加农业生产总值。
[0005]本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
[0006]本专利技术提出一种用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌，所述内生细菌为路德维希肠杆菌（Enterobacterludwigii），其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 24763，所述路德维希肠杆菌16S rDNA保守序列如SEQ ID NO .1所示。
[0007]本专利技术提出一种含有上述的用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌的植物耐铅耐盐促生剂。
[0008]本专利技术还提出上述的用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌在促进铅污染盐碱地植物生长中的应用。
[0009]本专利技术实施例的用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌及其应用的有益效果是：本专利技术设计通过对耐盐的植物秋茄和木榄以及耐铅的东南景天这3种植物的内生细菌进行分离，得到三者共有的一种内生细菌，即路德维希肠杆菌。通过对其耐盐能力、富集铅能力，并对其促进转接的受体植物在铅污染和盐胁迫下促生能力进行分析可知该菌具有促进其受体植物在盐碱地和铅污染土壤生长的能力，将其转接到农作物体内可促进其在铅污染盐碱地以及铅污染或盐碱地单一胁迫条件下的生长。通过内生细菌与作物之间的互作，不仅可提高作物自身耐盐和耐铅能力，保证产品的安全性，而且还能缩短育种周期。此外，还可提高我国土地资源的利用率，增加农业生产总值。
附图说明
[0010]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0011]图1为本专利技术实施例2的路德维希肠杆菌在不同铅离子浓度下的铅吸附量图；图2为本专利技术实施例4铅胁迫下接种路德维希肠杆菌和未接种路德维希肠杆菌时马尾松幼苗中叶绿素含量的对比图；图3为本专利技术实施例5铅胁迫下接种路德维希肠杆菌和未接种路德维希肠杆菌时马尾松幼苗中游离脯氨酸含量的对比图；图4为本专利技术实施例6铅胁迫下接种路德维希肠杆菌和未接种路德维希肠杆菌时马尾松幼苗中丙二醛含量的对比图；图5为本专利技术实施例7铅胁迫下接种路德维希肠杆菌和未接种路德维希肠杆菌时马尾松幼苗中可溶性蛋白含量的对比图；图6为本专利技术实施例8铅胁迫下接种路德维希肠杆菌和未接种路德维希肠杆菌时马尾松幼苗中超氧岐化酶活性的对比图；图7为本专利技术实施例9转接路德维希肠杆菌和未转接路德维希肠杆菌的绿豆生长情况对比图。
[0012]图8为本专利技术实施例10接种路德维希肠杆菌和未接种路德维希肠杆菌的马尾松幼苗松针中铅离子含量的对比图；图9为本专利技术实施例10接种路德维希肠杆菌和未接种路德维希肠杆菌的马尾松幼苗根中铅离子含量的对比图；图10为本专利技术实施例10接种路德维希肠杆菌和未接种路德维希肠杆菌的马尾松幼苗茎中铅离子含量的对比图。
具体实施方式
[0013]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0014]下面对本专利技术实施例的用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌及其应用进行具体说明。
[0015]本专利技术提出一种用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌，所述内生细菌为路德维希肠杆菌（Enterobacterludwigii），其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No. 24763，菌种保藏名为Enterobacter SP.RM
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1，保藏日期为2022年4月24日，所述路德维希肠杆菌16S rDNA保守序列如SEQ ID NO .1所示。
[0016]本专利技术提出一种含有上述的用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌的植物耐铅耐盐促生剂。
[0017]本专利技术还提出上述的用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌在促进铅污染盐碱地植物生长中的应用。
[0018]以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。
[0019]实施例1本实施例提供的一种用于盐碱地铅污染植物修复的内生细菌，其根据以下方法分离得到：（1）将秋茄、木榄和东南景天这3种植物的根、茎、叶用清水洗净，然后用5%洗洁精水浸泡5 min，置于流水下冲洗30 min后，分别装入干净的带盖玻璃瓶，瓶身用75%酒精消毒后放入无菌操作台。
[0020]（2）在无菌操作台上分别向步骤（1）中的三个玻璃瓶中加入75%酒精浸泡5～8min，接着用无菌水洗涤三次，再用无菌镊子取出草珊瑚叶片置于研钵中，然后加入适量无菌PBS缓冲溶液和少量无菌石英沙进行研磨，得到三个研磨液。设置空白对照，用接种环蘸取少量外植体消毒过程中最后一本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于铅污染盐碱地植物修复的内生细菌，其特征在于，所述内生细菌为路德维希肠杆菌(Enterobacter ludwigii)，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.24763，所述路德维希肠杆菌1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘希华，邢建宏，鄢树枫，杨清华，刘彩婷，陈诗涵，陈晓逸，
申请(专利权)人：三明学院，
类型：发明
国别省市：