一种非洲猪瘟检测试剂、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种非洲猪瘟检测试剂、试剂盒及其应用，该试剂包括裂解液、基因编辑探针及显色探针；所述裂解液由裂解试剂和稳定试剂组成，可将非洲猪瘟病毒裂解释放出非洲猪瘟病毒核酸；所述基因编辑探针由非洲猪瘟核酸特征序列互补RNA序列crRNA、Cas12a蛋白、缓冲溶液NEBuffer2.1、DEPC水组成；所述显色探针为DNA修饰的纳米金探针。本发明专利技术基于CRISPR/Cas12a系统精确识别，通过显色探针在溶液中的稳定性变化即可实现对非洲猪瘟病毒核酸的现场原位快速检测，操作简单，检测流程迅速，灵敏度高，选择性好，具有广阔的应用前景。具有广阔的应用前景。具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种非洲猪瘟检测试剂、试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于比色试剂研究及核酸检测
，具体涉及一种非洲猪瘟检测试剂、试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]自21世纪初以来，由病毒引起的传染病已经对全球公共卫生和经济造成了极大的负担和威胁。非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性的家畜传染病，致死率高达100％。由非洲传播至亚洲和欧洲，对全球养猪业造成了严重影响。控制传染源是控制非洲猪瘟最重要的方法之一。为了实现尽早控制传染源，需要对相关动物进行及时的发现、隔离、处理。因此，开发一种快速、灵敏、准确的检测方法以诊断病毒对于公共卫生和社会经济的稳定发展至关重要。
[0003]基因编辑技术起源于原核生物(包括细菌和古菌)，是原核细胞中的一种入侵防御机制。而近年来，基因编辑技术已成为一种强大的生物工具，除了可以修改生物体内的缺陷基因以进行疾病治疗外，还可用于病原体的快速检测。基因编辑中的成簇规律间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRI本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非洲猪瘟检测试剂，其特征在于，包括裂解液、基因编辑探针及显色探针；所述裂解液由裂解试剂和稳定试剂组成，可将非洲猪瘟病毒裂解释放出非洲猪瘟病毒核酸；所述基因编辑探针由非洲猪瘟核酸特征序列互补RNA序列crRNA、Cas12a蛋白、缓冲溶液NEBuffer2.1、DEPC水组成；所述显色探针为DNA修饰的纳米金探针。2.根据权利要求1所述的一种非洲猪瘟检测试剂，其特征在于，所述显色探针表面DNA数量为10～60；所述显色探针表面核酸序列为任意序列且长度为10～40nt；所述显色探针表面金纳米颗粒的粒径为10～50nm。3.根据权利要求1所述的一种非洲猪瘟检测试剂，其特征在于，所述缓冲溶液NEBuffer2.1为50mM NaCl、10mM Tris
‑
HCl、10mM MgCl2、100μg/ml BSA，其中Mg
2+
浓度为5～40nM；所述Cas12a蛋白的浓度为50～200nM。4.根据权利要求1所述的一种非洲猪瘟检测试剂，其特征在于，所述crRNA具有如SEQ ID No.4所示的序列。5.一种非洲猪瘟检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1
‑
4任一项所述的非洲猪瘟检测试剂。6.权利要求1
‑
4任一项所述的非洲猪瘟检测试剂或权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：张峻诚，孙涛，朱丹，汪联辉，晁洁，
申请(专利权)人：南京邮电大学，
类型：发明
国别省市：