白细胞介素16在制备乳腺癌免疫治疗药物中的应用制造技术

本申请提出了白细胞介素16在制备乳腺癌免疫治疗药物中的应用，涉及分子生物学及免疫学领域。白细胞介素16在制备乳腺癌免疫治疗药物中的应用，本申请的白细胞介素16可通过增强CD4阳性T细胞的抗肿瘤效应功能，抑制乳腺癌肿瘤的生长，从而可能作为乳腺癌免疫治疗的新策略。略。略。

【技术实现步骤摘要】
白细胞介素16在制备乳腺癌免疫治疗药物中的应用


[0001]本申请涉及分子生物学及免疫学领域，具体而言，涉及白细胞介素16在制备乳腺癌免疫治疗药物中的应用。

技术介绍

[0002]根据国际共识诊疗指南，目前乳腺癌的治疗方法主要包括术前或术后的放疗、化疗、靶向治疗、免疫治疗以及内分泌治疗等。乳腺癌的免疫治疗作为一种新兴的治疗理念，已成为乳腺癌的有效治疗手段之一。所谓免疫治疗，即是通过增强患者自身的免疫系统，使其对手术无法完全切除的肿瘤进行针对性清除，从而达到治疗的目的。相较于放化疗，免疫治疗毒副作用小，特异性强，具有很好的应用前景。然而，肿瘤细胞往往通过直接作用或分泌各种细胞因子，对免疫系统进行驯化，使肿瘤微环境处于免疫抑制的状态，导致免疫逃逸的产生，影响免疫治疗的效果，因此如何通过调节肿瘤微环境的组分，从而破除其免疫抑制的状态，对免疫治疗有重要影响。
[0003]肿瘤微环境由各种基质细胞、如免疫细胞和成纤维细胞等，以及其分泌的可溶性因子构成，通过细胞
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细胞接触或自分泌、旁分泌等方式，各组分之间通过直接和间接作用共同影响肿瘤的发展。其中，效应性T细胞，特别是CD8
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T细胞和Th1型CD4
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T细胞在肿瘤微环境中的浸润情况及其功能常常代表了免疫系统的激活程度，与治疗效果呈正相关；而调节性T细胞和B细胞往往抑制肿瘤免疫，与治疗效果呈负相关。T细胞从外周迁移到肿瘤微环境后，被树突状细胞(DCs)表面提呈的MHC
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肿瘤特异抗原肽复合物和共刺激分子激活，成为效应性T细胞(effector T cells,Teff)。其中，早期的效应性T细胞会进一步分化为前体记忆T细胞，这些细胞拥有分化为中心记忆T细胞(central memory T cells,Tcm)和效应记忆T细胞(effector memory T cells,TeM)。Th1型效应T细胞会分泌以IFN
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γ为主导的细胞因子促进巨噬细胞的活化并上调iNOS，促进细胞内抗原的杀伤；CD8
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效应T细胞在被激活后，会特异性识别肿瘤抗原，并通过表达颗粒酶和穿孔素等效应分子对肿瘤细胞进行特异性杀伤。为了躲避这种特异性杀伤，肿瘤细胞除了降低自身的抗原表达之外，还分泌一系列的抑制性因子对免疫微环境进行驯化，上调肿瘤微环境中的抑制性免疫细胞，如肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)、调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)、髓系来源的抑制性细胞(myeloid
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derived suppressive cells,MDSCs)等，通过其表面和分泌的一系列抑制性因子，使T细胞处于免疫抑制和衰竭的状态，抑制了效应T细胞的正常分化和功能，导致影响免疫系统对肿瘤的特异性杀伤能力。比如肿瘤细胞和TAMs表面表达高水平的PD
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L1，诱导T细胞衰竭和功能抑制；MDSCs通过分泌Arg
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1和活性氧抑制T细胞的增殖并促进其凋亡；同时，来源于TAMs和MDSCs的IL
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10和TGF
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β等细胞因子还可以诱导Treg的产生，进一步产生免疫抑制环境，抑制效应T细胞的增殖及其对肿瘤的杀伤功能，因此如何提高肿瘤微环境中效应性T细胞的比例和活性，对肿瘤的免疫治疗有重要意义。

技术实现思路

[0004]为了解决上述技术问题，本申请的目的在于提供白细胞介素16在制备乳腺癌免疫治疗药物中的应用，本申请的白细胞介素16可通过增强CD4阳性T细胞的抗肿瘤效应功能，抑制乳腺癌肿瘤的生长，从而可能作为乳腺癌免疫治疗的新策略。
[0005]本申请解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
[0006]通过分析癌症基因组图谱(The cancer genome atlas，TCGA)数据库，对其中31种肿瘤中白细胞介素16(IL
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16)的表达模式进行了分析，发现与癌旁组织相比，IL
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16的表达在19种肿瘤组织中都显著下调，且随肿瘤分期的进展(TMN分期及病理分期)有进一步下降的趋势。预后分析发现乳腺癌中IL
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16的表达与生存期呈正相关，即IL
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16高表达组患者的生存期显著长于IL
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16低表达组患者，提示IL
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16在癌症的发生发展中可能起到了抗肿瘤的作用。为了探究IL
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16对肿瘤免疫微环境的调控，对IL
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16表达水平与肿瘤微环境中各免疫细胞亚群的浸润相关性进行了分析，发现其表达与Th1、TfH、Tem、CD8
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T细胞、DCs、巨噬细胞等免疫活性细胞浸润呈正相关；而与Th2细胞浸润程度呈负相关，提示IL
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16可能主要通过调节T细胞的组成来激活免疫反应，但这种活化手段在肿瘤免疫抑制性微环境中被抑制。接着分析了一则单细胞测序数据(GSE114727)，发现IL
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16主要由T细胞和单核/巨噬细胞分泌，提示了IL
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16在肿瘤微环境中的可能来源。随后建立了4T1乳腺癌细胞系皮下荷瘤小鼠模型，用IL
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16进行干预，发现IL
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16处理组较对照组肿瘤生长速度减慢，流式细胞术分析发现IL
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16处理小鼠的肿瘤中Th1型CD4
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T细胞转录因子T
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bet的表达明显上升，Th1细胞特征性细胞因子TNF
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α、IFN
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γ的表达量也明显升高；而Th2型CD4
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T细胞转录因子GATA3下降，在体内水平上初步证实IL
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16可能通过促进Th1细胞的分化来抑制乳腺癌肿瘤的生长，从而可能作为乳腺癌免疫治疗的新策略。基于此，本申请在生物信息学、分子、细胞、动物模型层面进一步探究IL
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16在乳腺癌免疫微环境中对T细胞功能和浸润的调节作用和相关机制，并结合临床样本，阐明IL
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16与肿瘤发展的相关性。研究结果旨在为肿瘤微环境中的细胞相互作用机制提供新的认识，为白细胞介素家族的功能和治疗前景扩展新的思路，为靶向T细胞的肿瘤生物治疗提供新的靶点。
[0007]相对于现有技术，本申请的实施例至少具有如下优点或有益效果：
[0008]1、系统性的分析了白细胞介素家族在乳腺癌中的表达与患者预后的相关性，筛选IL
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16为研究目标，并首次结合数据库结果、临床样本，阐明IL
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16在乳腺癌组织中的表达与患者预后相关性，以及与各类免疫细胞浸润的相关性。
[0009]2、首次通过小鼠荷瘤实验，分别利用IL
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16注射或IL
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16中和抗体处理，从正反两方面在个体水平上阐明I本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.白细胞介素16在制备乳腺癌免疫治疗药物中的应用。2.根据权利要求1所述的白细胞介素16在制备乳腺癌免疫治疗药物中的应用，其特征在于，所述白细胞介素16的作用...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖鹏，徐俊杰，沈舒滢，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：