一种用于治疗类风湿关节炎的生物制剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗类风湿关节炎的生物制剂及其制备方法，所述生物制剂由如下原料制得：人脐带间充质干细胞外泌体、藻青蛋白、金银花提取物、海藻酸钠和生理盐水。本发明专利技术采用天然的海藻酸钠为聚合物基质，使得制备得到的生物制剂具有良好的生物相容性，且体内易降解，同时能够响应关节炎处钙离子形成水凝胶，实现外泌体、藻青蛋白、金银花提取物缓慢释放，达到持久治疗的效果；此外，经外泌体、藻青蛋白和金银花提取物联合作用，能够有效改善局部炎症细胞因子水平，促进关节部位血液循环和骨关节损伤修复，达到治疗类风湿关节炎的目的。的。的。

【技术实现步骤摘要】
一种用于治疗类风湿关节炎的生物制剂及其制备方法


[0001]本专利技术涉及类风湿关节炎治疗
，具体涉及一种用于治疗类风湿关节炎的生物制剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]类风湿关节炎(RA)是一种慢性、以炎性滑膜炎为主的系统性疾病。其特征是手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，可以导致关节畸形及功能丧失。
[0003]针对类风湿关节炎治疗手段主要包括药物和手术，其中，用于治疗类风湿关节炎的药物包括布洛芬、非甾体抗炎药、甲氨蝶呤、波尼松等药物，上述药物虽具有一定的抗炎、止痛、改善关节功能的作用，但不可避免的会对机体造成一些副作用，比如，非甾体抗炎药会导致胃肠道不适，激素会导致骨质疏松等问题。
[0004]外泌体是由细胞分泌到细胞外液中盘状囊泡(30
‑
150nm)；多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中；研究表明，外泌体涉及多种生物学活性，例如，调节免疫反应，运输蛋白质、RNA等。
[0005]因此，如何提供一种有效治疗类风湿关节炎且无副作用生物制剂尤为关键。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种用于治疗类风湿关节炎的生物制剂及其制备方法，该生物制剂对类风湿关节炎具有显著疗效，且由外泌体复合天然植物成分制得，对人体无任何毒副作用。
[0007]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0008]本专利技术第一方面提供一种用于治疗类风湿关节炎的生物制剂，所述生物制剂由如下原料制得：
[0009]人脐带间充质干细胞外泌体、藻青蛋白、金银花提取物、海藻酸钠和生理盐水。
[0010]本专利技术中藻青蛋白是从蓝绿色藻类提取出的一种深蓝色色素，是自然界中少见的色素蛋白之一，不仅颜色鲜艳，而且本身是一种营养丰富的蛋白质，其氨基酸组成齐全，必需氨基酸含量高；它既是一种蛋白质，又是一种极好的天然食用色素，同时又具有抗氧化、抗肿瘤、调控免疫系统、抗炎特性。
[0011]本专利技术采用天然的海藻酸钠为聚合物基质，使得制备得到的生物制剂具有良好的生物相容性，且体内易降解，同时能够响应关节炎处钙离子形成水凝胶，实现外泌体、藻青蛋白、金银花提取物缓慢释放，达到持久治疗的效果；此外，经外泌体、藻青蛋白和金银花提取物联合作用，能够有效改善局部炎症细胞因子水平，促进关节部位血液循环和骨关节损伤修复，达到治疗类风湿关节炎的目的。
[0012]优选地，所述生物制剂由如下百分含量原料制得：
[0013]人脐带间充质干细胞外泌体0.1％～0.4％、藻青蛋白1％～5％、金银花提取物0.5％～0.8％和海藻酸钠2％～3％，余量为生理盐水。
[0014]更优先地，所述生物制剂由如下百分含量原料制得：
[0015]人脐带间充质干细胞外泌体0.2％、藻青蛋白3％、金银花提取物0.6％和海藻酸钠2.5％，余量为生理盐水。
[0016]在本专利技术中，通过对各原料配比的限定，能够更好的调节各原料协同作用，提高生物制剂的整体疗效。
[0017]优选地，所述人脐带间充质干细胞外泌体通过如下方法制得：
[0018]将原代脐带间充质干细胞进行传代培养，收集脐带间充质干细胞的第三代培养上清液；再将上清液以(3000～4000)
×
g进行离心去除细胞和细胞碎片；
[0019]向上清液中添加外泌体沉淀试剂进行充分混匀、静置，再以(10000～50000)
×
g离心20～40min，收集沉淀；
[0020]采用PBS重悬沉淀后置于纯化柱中，并将纯化柱置于收集管中，将收集管在4℃下以(3000～4000)
×
g进行离心8～12min，将收集管内溶液进行冷冻干燥，得到所述人脐带间充质干细胞外泌体。
[0021]优选地，所述金银花提取物通过如下方法制得：
[0022]将金银花粉碎后置于水中进行搅拌提取，连续提取2～3次，合并提取液，再经浓缩、冷冻干燥，得到所述金银花提取物。
[0023]优选地，所述金银花粉碎后的目粒度不低于50目。
[0024]优选地，所述搅拌提取温度为50～60℃，提取时间为3～4h。
[0025]本专利技术第二方面提供一种上述生物制剂的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
[0026](a)将人脐带间充质干细胞外泌体置于生理盐水中并混匀，得到混合液；
[0027](b)将金银花提取物和藻青蛋白置于混合液中并搅拌混匀，然后，加入海藻酸钠，震荡混合，即得所述生物制剂。
[0028]与现有技术相比，本专利技术的有益效果至少包括：
[0029]本专利技术采用天然的海藻酸钠为聚合物基质，使得制备得到的生物制剂具有良好的生物相容性，且体内易降解，同时能够响应关节炎处钙离子形成水凝胶，实现外泌体、藻青蛋白、金银花提取物缓慢释放，达到持久治疗的效果；此外，经外泌体、藻青蛋白和金银花提取物联合作用，能够有效改善局部炎症细胞因子水平，促进关节部位血液循环和骨关节损伤修复，达到治疗类风湿关节炎的目的。
附图说明
[0030]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。在所有附图中，类似的元件或部分一般由类似的附图标记标识。附图中，各元件或部分并不一定按照实际的比例绘制。
[0031]图1为本专利技术实验例中第30天对照组小鼠足趾拍照图；
[0032]图2为本专利技术实验例中第30天模型小鼠足趾拍照图；
[0033]图3为本专利技术实验例中第30天EVs
‑
Lj
‑
Phy
‑
SA组小鼠足趾拍照图；
[0034]图4为本专利技术实验例中第30天EVs
‑
Lj
‑
SA组小鼠足趾拍照图；
[0035]图5为本专利技术实验例中第30天EVs
‑
Lj
‑
Phy组小鼠足趾拍照图；
[0036]图6为本专利技术实验例中第30天Lj
‑
Phy
‑
SA组小鼠足趾拍照图。
具体实施方式
[0037]下面将结合实施例对本专利技术技术方案的实施例进行详细的描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本专利技术的技术方案，因此只作为示例，而不能以此来限制本专利技术的保护范围。
[0038]需要注意的是，除非另有说明，本申请使用的技术术语或者科学术语应当为本专利技术所属领域技术人员所理解的通常意义。
[0039]本专利技术实施例提供了一种用于治疗类风湿关节炎的生物制剂，该生物制剂由如下原料制得：
[0040]人脐带间充质干细胞外泌体、藻青蛋白、金银花提取物、海藻酸钠和生理盐水。
[0041]本专利技术采用天然的海藻酸钠为聚合物基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于治疗类风湿关节炎的生物制剂，其特征在于，所述生物制剂由如下原料制得：人脐带间充质干细胞外泌体、藻青蛋白、金银花提取物、海藻酸钠和生理盐水。2.根据权利要求1所述的生物制剂，其特征在于，所述生物制剂由如下百分含量原料制得：人脐带间充质干细胞外泌体0.1％～0.4％、藻青蛋白1％～5％、金银花提取物0.5％～0.8％和海藻酸钠2％～3％，余量为生理盐水。3.根据权利要求1或2所述的生物制剂，其特征在于，所述生物制剂由如下百分含量原料制得：人脐带间充质干细胞外泌体0.2％、藻青蛋白3％、金银花提取物0.6％和海藻酸钠2.5％，余量为生理盐水。4.根据权利要求1或2所述的生物制剂，其特征在于，所述人脐带间充质干细胞外泌体通过如下方法制得：将原代脐带间充质干细胞进行传代培养，收集脐带间充质干细胞的第三代培养上清液；再将上清液以(3000～4000)
×
g进行离心去除细胞和细胞碎片；向上清液中添加外泌体沉淀试剂进行充分混匀、静置，再以(10000～50000)

【专利技术属性】
技术研发人员：丁彬彬，
申请(专利权)人：格莱康美生物医学技术北京有限公司，
类型：发明
国别省市：