绿茶中L-茶氨酸、咖啡因、茶多酚和十六烷酸同时测定的方法技术

本发明专利技术属于分析检测技术领域，涉及绿茶中L

【技术实现步骤摘要】
绿茶中L
‑
茶氨酸、咖啡因、茶多酚和十六烷酸同时测定的方法


[0001]本专利技术属于分析检测
，具体涉及绿茶中L
‑
茶氨酸、咖啡因、茶多酚和十六烷酸同时测定的方法。

技术介绍

[0002]我国绿茶品种繁多，茶树品种不同，其茶多酚、氨基酸和咖啡碱等品质化学成分含量不同，酶的特性和芳香物质等的化学特性也不同，各理化成分种类和含量不一，而绿茶的风味是茶叶内含物相互作用、不断变化的结果，因此各类绿茶品质滋味均有差异，不同品种茶叶,各具特色的“品种香”。茶多酚是茶叶滋味和色泽的主要成分，是构成茶叶品质的关键性物质，绿茶鲜爽性的主要贡献物。茶叶氨基酸中，以茶氨酸含量最多，占氨基酸总量一半以上，是构成茶汤鲜味的主要成分，也是衡量茶叶品质优劣的重要生化成分。
[0003]近年来，诸多研究人员利用不同方法开展了茶叶品质鉴别分析研究。利用计算机视觉图像处理技术结合感官审评结果进行茶叶筛选评级，利用各种类型的电子舌结合不同的化学计量法和模式识别法对茶叶组分定性，电子鼻同样用于茶叶香气识别与品质等级的划分以及加工过程样的监测，气相色谱－嗅觉－质谱测定法(GC
‑
O
‑
MS)等通过定量描述感官分析，GC
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MS和GC
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O技术在四种功夫红茶中鉴定出64种挥发性化合物，在鉴定绿茶、普洱茶、乌龙茶的特征香气中也取得了较好的效果。
[0004]上述方法对茶叶进行品质分析仍以感官评定方法为基础，仪器分析多采用NIST库定性、归一法定量。然而，茶叶品质物理检验结果受主观因素影响，缺乏可参照的标准，重复性较差，常规色质联用分析采用NIST库定性、归一法定量，定性定量均存在不足。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种绿茶中L
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茶氨酸、咖啡因、茶多酚和十六烷酸同时测定的方法，对绿茶品质特征化合物及其含量进行准确定性定量分析，并将北方绿茶与南方绿茶成分对比差异，综合分析以期明确各地绿茶茶叶品质特征，为各地绿茶品质鉴别提供理论依据。
[0006]本专利技术所述的绿茶中L
‑
茶氨酸、咖啡因、茶多酚和十六烷酸同时快速测定的方法，其特征在于，采用气相色谱/串联三重四级杆质谱法对样品进行检测，包括以下步骤：
[0007]绿茶中L
‑
茶氨酸、咖啡因、茶多酚和十六烷酸同时测定的方法，其特征在于，采用气相色谱/串联三重四级杆质谱法对样品进行检测，包括以下步骤：
[0008](1)检测条件：
[0009](1
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1)色谱条件
[0010]色谱柱：HP
‑
5MS，30m
×
0.25mm i.d.,0.25μm，弹性石英毛细管柱；载气：高纯氦气；碰撞气：高纯氮；流速：1.1ml/min；进样方式：不分流进样；进样口温度：250℃；柱温：初始50℃保持1min，再以10℃/min程序升温至150℃，再以20℃/min程序升温至280℃；进样口温度：260℃；进样量1.0μL；
[0011](1
‑
2)质谱条件
[0012]离子源：电子电离源；离子源温度：230℃；四级杆质量分析器温度150℃；传输线温度280℃；溶剂延迟：3min；检测方法：多反应监测模式：运行时间23.5min，后运行5min；
[0013](2)标准溶液配制
[0014](2
‑
1)准确称取各化合物标准品，用甲醇溶解，配制质量浓度为1000mg/L的标准储备液，于
‑
18℃保存；移取各化合物的标准储备液1mL，用丙酮+正己烷溶解，配置成浓度为10mg/L的中间液，于0～4℃避光保存；
[0015](2
‑
2)标准工作液的配制：
[0016]准确移取各化合物的标准储备液，用丙酮+正己烷稀释成0.01，0.02，0.050，0.10，0.50，1.0，5.0，10.0mg/L标准工作液，现配现用；
[0017](3)待检样品前处理
[0018]称取茶叶试样，置于离心管中，加入85℃水浸泡后加入乙腈振荡提取，涡旋，离心，取上清液，加入净化粉末，涡旋，过滤，蒸除溶剂，准确加入丙酮+正己烷定容后，过滤膜，得滤液，供上机分析；
[0019](4)待检样品检测
[0020]将步骤(3)获得的滤液进行检测，测定滤液中L
‑
茶氨酸、咖啡因、茶多酚和十六烷酸的含量。
[0021]本专利技术所述的绿茶中L
‑
茶氨酸、咖啡因、茶多酚和十六烷酸同时快速测定的方法，丙酮与正己烷的体积比为3:7。
[0022]优选的，待检样品前处理的具体过程为：称取2.0g茶叶试样，置于50mL离心管中，加入20ml 85℃水浸泡30min后加入20mL乙腈振荡提取30min，加入5g氯化钠涡旋1min，以5000r/min离心5min，取上清液10mL，加入400mgPSA、400mgC18QuEChERS净化粉末，涡旋30s，过滤，旋转蒸发蒸除溶剂，准确加入2.0mL丙酮+正己烷定容后，过0.22um滤膜，得滤液，供上机分析。
[0023]本专利技术采用的仪器与设备为：7000B GC
‑
MS/MS气相色谱/串联三重四级杆质谱仪美国安捷伦科技有限公司、IKAK S260振荡器德国IKA公司、Buchi旋转蒸发仪瑞士Buchi公司、TDL
‑
40B离心机上海安亭科学仪器厂、IKAMS3 basic涡旋混匀器德国IKA公司。
[0024]本专利技术采用的材料与试剂为：茶叶样品：日照绿茶(日照百润茶行)、南京绿茶(市售)、杭州龙井(市售)乙腈(色谱纯)美国TEDIA；丙酮(色谱纯)德国Merck；正己烷(色谱纯)德国Merck；氯化钠(分析纯)西陇化工股份有限公司；十六烷酸、L
‑
茶氨酸、茶多酚、上海麦克林生化科技有限公司；咖啡因，质量浓度为1000ug/mL，北京坛墨质检科技有限公司；QuEChERS dSPE美国安捷伦科技有限公司。
[0025]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0026]1.该方法的建立可以对绿茶品质组分L
‑
茶氨酸、十六烷酸、咖啡因、茶多酚进行更准确定性定量，克服了传统绿茶品质分析方法受人为因素影响及定性定量准确性差等缺点，且操作简单、准确、快速、方法学参数良好，可用于各地绿茶品质组分准确定性和定量分析。
[0027]2.该方法的建立可以对绿茶品质组分L
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茶氨酸、十六烷酸、咖啡因、茶多酚进行更准确定性定量，能够将日照绿茶与南方绿茶品质进行准确区分，解决了绿茶市场出现以次
充好、以假乱真等问题，为各地绿茶品质鉴别提供技术支持，对绿茶贸易发展具有重要价值。
附图说明
[0028]图1为不同溶剂对茶多酚、咖啡因提取含量的影响本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.绿茶中L
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茶氨酸、咖啡因、茶多酚和十六烷酸同时测定的方法，其特征在于，采用气相色谱/串联三重四级杆质谱法对样品进行检测，包括以下步骤：(1)检测条件：(1
‑
1)色谱条件色谱柱：HP
‑
5MS，30m
×
0.25mm i.d.,0.25μm，弹性石英毛细管柱；载气：高纯氦气；碰撞气：高纯氮；流速：1.1ml/min；进样方式：不分流进样；进样口温度：250℃；柱温：初始50℃保持1min，再以10℃/min程序升温至150℃，再以20℃/min程序升温至280℃；进样口温度：260℃；进样量1.0μL；(1
‑
2)质谱条件离子源：电子电离源；离子源温度：230℃；四级杆质量分析器温度150℃；传输线温度280℃；溶剂延迟：3min；检测方法：多反应监测模式：运行时间23.5min，后运行5min；(2)标准溶液配制(2
‑
1)准确称取各化合物标准品，用甲醇溶解，配制质量浓度为1000mg/L的标准储备液，于
‑
18℃保存；移取各化合物的标准储备液1mL，用丙酮+正己烷溶解，配置成浓度为10mg/L的中间液，于0～4℃避光保存；(2
‑
2)标准工作液的配...

【专利技术属性】
技术研发人员：高尧华，张鸿伟，宋卫得，李林杰，孙灿，
申请(专利权)人：中华人民共和国日照海关，
类型：发明
国别省市：