一种猪δ冠状病毒IgA的检测方法技术

本发明专利技术公开一种猪δ冠状病毒IgA的检测方法，包括以下步骤：制备检测反应板；在所述检测反应板上进行猪δ冠状病毒的一抗孵育；在所述检测反应板上进行HRP标记的抗猪IgA孵育，得标记后的猪δ冠状病毒IgA；向标记后的猪δ冠状病毒IgA加入AEC反应液，在15℃～25℃下显色20min～30min，甩干后判定结果。本发明专利技术提供的猪δ冠状病毒IgA的检测方法，通过使用猪δ冠状病毒全病毒制备检测反应板，能够全面评估猪δ冠状病毒所有的抗原表位在机体粘膜部位产生的总IgA水平。生的总IgA水平。生的总IgA水平。

【技术实现步骤摘要】
一种猪
δ
冠状病毒IgA的检测方法


[0001]本专利技术涉及生物
，特别涉及一种猪δ冠状病毒IgA的检测方法。

技术介绍

[0002]猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)又称猪丁型冠状病毒，是一种新出现的可导致猪发生严重腹泻甚至死亡的冠状病毒。PDCoV可以感染各个阶段的猪群，但主要感染哺乳仔猪，引起严重的萎缩性肠炎，临床症状表现为仔猪腹泻、呕吐、脱水，引起小猪的死亡率30％～40％，给养猪业带来了较重的经济损失。
[0003]2012年在中国香港首次报道了PDCoV，并获得了全基因组序列，命名为 HKU15(WOO et al.,2012)，2014年在美国和加拿大部分地区暴发(LI et al.， 2014；MARTHALER et al.,2014)，接着在(广东、四川、江西等)以及泰国、老挝、越南和日本等地均检测到PDCoV(CHEN et al.，2015；LE etal.,2018；LEE et al.，2014；MADAPONG et al.，2016；SA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪δ冠状病毒IgA的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：制备检测反应板；在所述检测反应板上进行猪δ冠状病毒的一抗孵育；在所述检测反应板上进行HRP标记的抗猪IgA孵育，得标记后的猪δ冠状病毒IgA；向标记后的猪δ冠状病毒IgA加入AEC反应液，在15℃～25℃下显色20min～30min，甩干后判定结果。2.如权利要求1所述的猪δ冠状病毒IgA的检测方法，其特征在于，制备检测反应板的步骤包括：将猪细胞悬液铺到96孔板上培养，用PBS清洗，得细胞培养板；将猪δ冠状病毒用DMEM进行稀释，制成病毒液；以每孔0.1ml将所述病毒液接种到所述细胞培养板上，于二氧化碳培养箱培养1h～1.5h后，弃去孔内液体，每孔加入0.1mlDMEM，于二氧化碳培养箱中培养96h～120h，加入预冷的丙酮与无水乙醇混合的固定液，于25℃～37℃下作用15min～30min，得检测反应板。3.如权利要求2所述的猪δ冠状病毒IgA的检测方法，其特征在于，所述猪细胞包括猪肾...

【专利技术属性】
技术研发人员：于义娟，石宝兰，谢红玲，朱薇，郑良益，王碧群，饶清宜，付宁宁，王威，黄涛，李晶梅，李婷婷，李建，薛霜，闵娟娟，王明哲，胡杨，漆世华，
申请(专利权)人：国药集团动物保健股份有限公司，
类型：发明
国别省市：