含胰岛胶囊的制造方法技术

本发明专利技术提供经改良的含胰岛胶囊的制造方法。一种含胰岛胶囊的制造方法，其包括下述工序：工序(a)，制备以10,000IEQ/mL以上的浓度含有胰岛的海藻酸钠溶液A；工序(b)，将该海藻酸钠溶液滴加至二价阳离子溶液中，回收经凝胶化而成的粒子；工序(c)，将工序(b)中回收的粒子添加至聚L

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含胰岛胶囊的制造方法


[0001]公开了关于胶囊化胰岛的技术。

技术介绍

[0002]胰岛移植是对人体的负担较小的糖尿病的治疗手段，但为了使所移植的胰岛长期成活，有时需要强效的免疫抑制。研究了将大量的微小的微胶囊化胰岛向腹腔内移植的方法，在该情况下，无需免疫抑制，但尚未获得充分的治疗成果。
[0003]现有技术文献
[0004]专利文献
[0005]专利文献1：WO2001/052871
[0006]非专利文献
[0007]非专利文献1：METHODS IN ENZYMOLOGY(酶学方法),VOL.137,575
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580,1988
[0008]非专利文献2：TRANSPLANTATION(移植),Vol.53,1180
‑
1183,No.6,1992年6月
[0009]非专利文献3：Bioartificial Pancreas(生物人工胰腺),Vol.,98,No.6,1996,1417
‑
1422
[0010]非专利文献4：Drug Delivery System(药物传递系统),Vol.,12,No.2,1997
[0011]非专利文献5：JOURNAL OF BIOMEDICAL MATERIALS RESEARCH B:APPLIED BIOMATERIALS(生物医学材料研究杂志，B辑：应用生物材料),2013VOL.,101B,第2期,258
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268
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技术实现思路

[0012]专利技术所要解决的课题
[0013]课题之一是提供经改良的含胰岛胶囊的制造方法。
[0014]用于解决课题的手段
[0015]作为所述课题的解决手段，提供了包括下述项的专利技术。
[0016]项1.
[0017]含胰岛胶囊的制造方法，其包括下述工序：
[0018]工序(a)，制备以10,000IEQ/mL以上的浓度含有胰岛的海藻酸钠溶液A；
[0019]工序(b)，将该海藻酸钠溶液滴加至二价阳离子溶液中，回收经凝胶化而成的粒子；
[0020]工序(c)，将工序(b)中回收的粒子添加至聚L
‑
鸟氨酸溶液A中，进行搅拌后，回收粒子；
[0021]工序(d)，将工序(c)中回收的粒子添加至海藻酸钠溶液B中，进行搅拌后，回收粒子；以及
[0022]工序(e)，将工序(d)中回收的粒子添加至柠檬酸钠溶液中，进行搅拌后，回收粒子。
[0023]项2.
[0024]如项1所述的方法，其中，胰岛为从出生后1～3周龄的幼猪取得的胰岛。
[0025]项3.
[0026]如项1或2所述的方法，其中，含胰岛胶囊的平均直径为550～750μm。
[0027]项4.
[0028]如项1～3中任一项所述的方法，其中，海藻酸钠溶液A的海藻酸钠浓度为1w/v％以上3w/v％以下。
[0029]项5.
[0030]如项1～4中任一项所述的方法，其中，聚L
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鸟氨酸溶液A的聚L
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鸟氨酸浓度为0.05w/v％以上3w/v％以下。
[0031]项6.
[0032]如项1～5中任一项所述的方法，其中，海藻酸钠溶液B的海藻酸钠浓度为0.1w/v％以上0.3w/v％以下。
[0033]项7.
[0034]如项1～6中任一项所述的方法，其中，在工序(d)中，将工序(c)中回收的粒子添加至聚L
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鸟氨酸溶液B中，进行搅拌后，进行回收，然后添加至海藻酸钠溶液B中。
[0035]项8.
[0036]如项7所述的方法，其中，聚L
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鸟氨酸溶液B的聚L
‑
鸟氨酸浓度为0.01w/v％以上且低于0.1w/v％。
[0037]专利技术效果
[0038]提供了糖响应性得到改善的胶囊化胰岛。
附图说明
[0039][图1]示出刚刚胶囊化之后的胰岛及胶囊化后培养了25天的胰岛的显微镜照片。a～d为刚刚胶囊化之后，e～h为培养25天后。a及e是使用8,000IEQ/mL的胰岛制作的，b及f是使用12,000IEQ/mL的胰岛制作的，c及g是使用16,000IEQ/mL的胰岛制作的，d及h是使用20,000IEQ/mL的胰岛制作的。
[0040][图2]示出对胶囊化后培养了25天的胰岛的糖响应性进行测定而得的结果。
[0041][图3]将针对胶囊化后培养了25天的胰岛测得的糖响应性以刺激指数(Stimulation Index，SI)的形式示出。
[0042][图4]示出针对尺寸不同的含胰岛胶囊测定糖响应性而得的结果。
[0043][图5]示出针对尺寸不同的含胰岛胶囊测定SI而得的结果。
具体实施方式
[0044]含胰岛胶囊的制造方法优选包括下述的工序(a)～(e)：
[0045]工序(a)，制备以10,000IEQ/mL以上的浓度含有胰岛的海藻酸钠溶液A；
[0046]工序(b)，将该海藻酸钠溶液滴加至二价阳离子溶液中，回收经凝胶化而成的粒子；
[0047]工序(c)，将工序(b)中回收的粒子添加至聚L
‑
鸟氨酸溶液A中，进行搅拌后，回收
粒子；
[0048]工序(d)，将工序(c)中回收的粒子添加至海藻酸钠溶液B中，搅拌后进行回收；以及
[0049]工序(e)，将工序(d)中回收的粒子添加至柠檬酸钠溶液中，搅拌后进行回收。
[0050]工序(a)中使用的胰岛优选包含产生胰岛素的β细胞、含有胰高血糖素的α细胞、分泌生长抑素的δ细胞、及含有胰多肽的细胞(PP细胞)。对于胰岛而言，优选其大部分为产生胰岛素的β细胞。
[0051]胰岛的来源没有特别限制，但优选为人、猪、小鼠、大鼠、猴、或犬。一个实施方式中，胰岛优选来源于猪，优选为幼猪(例如，出生后3天～4周或出生后7天～3周)的胰岛。胰岛可以通过任意地采用本
中已知的方法而得到。例如，可以优选采用使用Liberase作为消化酶的方法(T.J.Cavanagh等.Transplantation Proceedings(移植学会会报),30,367(1998))。
[0052]胰岛的尺寸优选为50μm以上400μm以下。胰岛的尺寸可以使用显微镜的测微计来测定。作为特性而言，优选胰岛包含10％以上的β细胞。β细胞的比例的上限并不特别存在，例如为80％。
[0053]构成海藻酸钠溶液A的海藻酸钠的物性没有特别限定。
[0054]海藻酸钠溶液A的海藻酸钠浓度没有特别限制，例如，优选为1w/v％以上3w/v％以下。
[0055]从使胶囊化后的胰岛的糖响应性良好这样的观点考虑，海藻酸钠溶液A以10,000IEQ/mL以上的浓度含有胰岛是优选的。此处，所谓IEQ本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.含胰岛胶囊的制造方法，其包括下述工序：工序(a)，制备以10,000IEQ/mL以上的浓度含有胰岛的海藻酸钠溶液A；工序(b)，将该海藻酸钠溶液滴加至二价阳离子溶液中，回收经凝胶化而成的粒子；工序(c)，将工序(b)中回收的粒子添加至聚L
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鸟氨酸溶液A中，进行搅拌后，回收粒子；工序(d)，将工序(c)中回收的粒子添加至海藻酸钠溶液B中，进行搅拌后，回收粒子；以及工序(e)，将工序(d)中回收的粒子添加至柠檬酸钠溶液中，进行搅拌后，回收粒子。2.如权利要求1所述的方法，其中，胰岛为从出生后1～3周龄的幼猪取得的胰岛。3.如权利要求1或2所述的方法，其中，含胰岛胶囊的平均直径为550～750μm。4.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，海藻酸钠溶液A的海藻酸钠...

【专利技术属性】
技术研发人员：东宏治，西村益浩，饭冢菜穗，田村浩史，
申请(专利权)人：株式会社大塚制药工场，
类型：发明
国别省市：