可快速崩解的微载体聚集体及其制备方法技术

本发明专利技术公开了可快速崩解的微载体聚集体及其制备方法。该方法是先提供遇水可生成二氧化碳的崩解剂，再与微载体混合均匀，最后与有机试剂混合，经成型、干燥，即获得干燥坚实稳固的微载体聚集体。该方法利用崩解剂遇水迅速生成大量二氧化碳的特性，使其加入培养液中后快速生成大量二氧化碳，从而加速崩解过程，获得更为均匀分散的微载体悬液。利用该方法可制备质量和体积较大的微载体聚集体，其复水后的崩解速度和分散性依旧相当优异。解速度和分散性依旧相当优异。解速度和分散性依旧相当优异。

【技术实现步骤摘要】
可快速崩解的微载体聚集体及其制备方法


[0001]本专利技术属于医药材料
更具体地，涉及可快速崩解的微载体聚集体及其制备方法。

技术介绍

[0002]微载体由于合适的尺寸、密度、较大的比表面积和可控的孔隙率，可轻易实现贴壁细胞的悬浮培养(如百科词条定义，微载体培养：微载体以微小颗粒作为细胞贴附的载体，可提供相当大的贴附面积，由于载体体积很小，比重较轻，在轻度搅拌下即可使得细胞悬浮在培养液内，最终能够使细胞在载体表面繁殖成单层的一种细胞培养技术)，目前已经在各类细胞的规模化制备以及重组细胞产物收集等领域有了较大范围的应用。目前常用的商品化微载体如cytodex1和cytodex3，其产品的最终形态均为干燥粉末，在使用前需先称量出特定质量，然后进行水化和灭菌，方能进行细胞接种，这种复杂繁琐的操作在使用过程中造成了极大的不便。
[0003]中国专利申请提出了一种不添加任何其他成分制备细胞载体颗粒聚集体的方法，所述细胞载体颗粒聚集体由细胞载体颗粒聚集而成，具有如片状、块状的特定形状，使其以类似于药片的方式存在且每片具有恒定的质量，封装后进行终端灭菌即可储存、售卖，在使用前，按照使用量数出相应片剂的数量即可，简化了操作过程。但是其在制备质量较小的聚集体时效果尚可，但若制备的聚集体质量较大，聚集体复水后的分散性即会随之迅速变差，从而严重影响细胞的接种和扩增效果。

技术实现思路

[0004]本专利技术目的是克服上述现有细胞载体颗粒聚集体的缺陷和不足，提供一种可快速崩解的微载体聚集体及其制备方法。r/>[0005]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0006]可快速崩解的微载体聚集体的制备方法，包括如下步骤：
[0007]S1.提供遇水可生成二氧化碳的崩解剂；
[0008]S2.将微载体和崩解剂混合均匀，得混合物；
[0009]S3.将S2的混合物与有机试剂混合，经成型、干燥，获得干燥坚实稳固的微载体聚集体。
[0010]优选地，单次压片所使用的干燥微载体粉末颗粒的质量不高于800mg。
[0011]所制备的微载体聚集体可为圆柱形(圆片形)、立方体形(方片形)、棱柱形、锥形等。
[0012]优选地，所述混合后遇水可生成二氧化碳的崩解剂包括酸源物质和碱源物质。
[0013]进一步优选地，所述酸源物质选自酒石酸、奎宁酸、柠檬酸、硼酸、苹果酸、羧甲酸、富马酸、抗坏血酸、乙酸、丁二酸、草酸、水杨酸、枸橼酸、咖啡酸、齐墩果酸、盐酸中的至少一种；
[0014]进一步优选地，所述碱源物质选自碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸镁、碳酸锶、碳酸锂、碳酸氢锂、碳酸锌、碳酸钙、碳酸钡中的至少一种。
[0015]酸源物质和碱源物质的质量比计算标准为：以酸源物质和碱源物质混合反应生成二氧化碳的最佳匹配用量为准。
[0016]本专利技术利用酸源物质和碱源物质混合遇水迅速生成大量二氧化碳的特性，在制备微载体聚集体时加入酸源物质和碱源物质混合物，使其加入培养液中后快速生成大量二氧化碳，从而加速崩解过程，获得更为均匀分散的微载体悬液。利用此方法制备的质量和体积较大的聚集体，其复水后的崩解速度和分散性依旧相当优异。
[0017]在该制备方法中，优选地，步骤S2中所述崩解剂的质量为微载体质量的0.01
‑
80％。
[0018]优选地，步骤S3中有机试剂的体积用量为微载体质量的20
‑
8000％。
[0019]优选地，步骤S3中所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙二醇、丙酮、叔丁醇、异丙醇、二甲基亚砜、乙醚、乙酸酐、卤代烃中的至少一种。
[0020]优选地，步骤S3中所述成型为冲压成型，所述干燥为室温挥发干燥、烘干、真空干燥或冷冻干燥。
[0021]优选地，步骤S2的混合物中还混合有活性离子或/或小分子药物。优选地，活性离子或/或小分子药物的质量为微载体质量的0
‑
50％。
[0022]优选地，所述小分子药物选自抗坏血酸、多巴胺、姜黄素、蛋黄磷脂酰胆碱、雷帕霉素、阿司匹林、烟酰胺单核苷酸、二甲双胍、MLN4924、去甲肾上腺素、福司可林、n
‑
甲基多巴胺、美芬新、莫能菌素中的一种。
[0023]另外，步骤S2中所述微载体由天然高分子材料、人工合成高分子材料、基因重组胶原蛋白中的一种或几种混合物制备而得。
[0024]另外，由上述方法制备得到的可快速崩解的微载体聚集体，也应在本专利技术保护范围之内。
[0025]本专利技术具有以下有益效果：
[0026]1、本专利技术制备的微载体聚集体为片剂形式，每片具有恒定质量，封装后进行辐照灭菌存储，使用前按照使用量数出相应数量的片剂即可，无需称量、水化、灭菌的繁琐步骤，省时方便；
[0027]2、同时，本专利技术的微载体聚集体由于制备时加入了崩解剂，遇到培养液后会快速释放出大量二氧化碳，从而加速微载体聚集体的崩解过程，获得更为均匀分散的微载体悬液，因此即使制备质量或体积较大的聚集体，其复水后的崩解速度和分散性依旧相当优异，且球状形貌和多孔结构保持良好，不影响其细胞接种和扩增；即本专利技术方法可制备质量或体积较大的聚集体；
[0028]3、本专利技术制备微载体聚集体的工艺中，使用的酸源物质和碱源物质还可包含利于干细胞贴壁与增殖的微量元素(如镁、锶等)，有助于提升收获的干细胞的数量与质量，或亦可包含利于促进细胞外泌体分泌的物质(如活性离子、小分子药物、生长因子、RNA和激素等)。
附图说明
[0029]图1为用于压片的微载体粉末。
[0030]图2为成型后的微载体聚集体。
[0031]图3为经过72h连续震荡后的微载体聚集体。
[0032]图4为质量为20mg的微载体聚集体遇水15s后的分散情况。
[0033]图5为质量为20mg的微载体聚集体遇水30s后的分散情况。
[0034]图6为质量为20mg的微载体聚集体遇水分散后显微镜下拍的照片。
[0035]图7为质量为20mg的微载体聚集体遇水分散后的SEM(扫描电子显微镜)照片。
[0036]图8为不同质量的微载体聚集体。
[0037]图9为质量为50mg的微载体聚集体遇水45s后的分散情况。
[0038]图10为质量为50mg的微载体聚集体遇水分散后显微镜下拍的照片。
[0039]图11为质量为50mg的微载体聚集体遇水分散后的SEM(扫描电子显微镜)照片。
[0040]图12为质量为10mg的微载体聚集体遇水15s后的分散情况。
[0041]图13为质量为50mg的市购微载体(cytodex3)制备的微载体聚集体。
[0042]图14为质量为50mg的市购微载体(cytodex3)制备的微载体聚集体遇水20s后的分散情况。
[0043]图15为质量为50mg的市购微载体(cytodex3)制备的微载体聚集体遇水分散后显微镜下拍的照片。
[004本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.可快速崩解的微载体聚集体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.提供遇水后生成二氧化碳的崩解剂；S2.将微载体和崩解剂混合均匀，得混合物；S3.将S2的混合物与有机试剂混合，经成型、干燥，获得微载体聚集体。2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤S2中所述崩解剂的质量为微载体质量的0.01
‑
80％。3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述崩解剂由混合后遇水可生成二氧化碳的两种物质组成，包括酸源物质和碱源物质；优选地，所述酸源物质选自酒石酸、奎宁酸、柠檬酸、硼酸、苹果酸、羧甲酸、富马酸、抗坏血酸、乙酸、丁二酸、草酸、水杨酸、枸橼酸、咖啡酸、齐墩果酸、盐酸中的至少一种；优选地，所述碱源物质选自碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸镁、碳酸锶、碳酸锂、碳酸氢锂、碳酸锌、碳酸钙、碳酸钡中的至少一种。4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤S3中所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙二醇、丙酮、叔丁醇、异丙醇、二甲基亚砜、乙醚、乙酸酐、卤代烃中的至少一种。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：张智勇，宋李治，王文浩，
申请(专利权)人：中科睿极深圳医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：