一种MT1-MMP可激活的前药型天花粉蛋白药物递送系统及应用技术方案

本发明专利技术属于药物领域，涉及一种MT1

【技术实现步骤摘要】
一种MT1
‑
MMP可激活的前药型天花粉蛋白药物递送系统及应用


[0001]本专利技术属于药物领域，具体地，涉及一种MT1
‑
MMP可激活的前药型天花粉蛋白药物递送系统及应用。

技术介绍

[0002]卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤，其中上皮性卵巢癌是最常见的类型。卵巢癌的发病率低于宫颈癌和子宫体癌，但其死亡率位于妇科肿瘤疾病之首。据报道，2020年全球有313959名女性患病，207252名患者因此死亡。卵巢癌患者在五年内的总生存率低于50％，如此高的死亡率主要归因于卵巢癌患者发病早期无明显症状，缺乏早期诊断手段，超过70％的卵巢癌患者确诊时已处于卵巢癌晚期。目前，卵巢癌的临床治疗方案一般采用手术切除肿瘤组织并辅以铂药/紫杉醇为后续治疗药物。尽管随着治疗水平的提高，卵巢癌患者生存率有所提升，但提升幅度远低于其他癌种。大多数患者经过初期治疗后会再次复发，并产生耐药性，治疗难度大。因此，对于卵巢癌的高复发、难治疗、预后性差的治疗现状，寻求新型药物改善卵巢癌患者生存水平至关重要。
[0003]天花粉蛋白(Trichosanthin，TCS)是一种Ⅰ型核糖体失活蛋白，TCS可通过裂解真核细胞中的28SrRNA的4324位碱基腺嘌呤的N
‑
C糖苷键，改变rRNA的构象并影响延伸因子与GTPase相关中心的结合，从而抑制蛋白质合成。TCS在中国有一百多年的使用历史，早期临床上将其用于终止早期、中期妊娠。后期研究发现，TCS具有免疫调节、抗病毒及抗肿瘤等作用。
[0004]研究表明，TCS的细胞毒性取决于细胞内浓度，所以TCS的细胞跨膜运输是其发挥生物活性的关键步骤。TCS虽然可通过受体介导的内吞或非特异性结合跨过细胞膜，但其跨膜效率较低，并且，当TCS经细胞内吞进入细胞后，在细胞内容易被溶酶体降解而失活，使其细胞内浓度降低。因此，提高TCS跨膜效率，增加其在肿瘤细胞内浓度可有效提高TCS的增殖抑制作用。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是针对上述问题，构建一种MT1
‑
MMP可激活的前药型天花粉蛋白药物递送系统，借助CPP和靶向肽，提高天花粉蛋白的胞内递送效率，增强其抗肿瘤活性。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术提供一种MT1
‑
MMP可激活的前药型天花粉蛋白药物递送系统，该药物递送系统包括由N端至C端的：天花粉蛋白TCS、细胞穿膜肽CPP、MT1
‑
MMP特异性酶切位点、氨基酸连接体、MT1
‑
MMP特异性结合肽；所述天花粉蛋白TCS的序列为SEQ ID NO：1所示，所述细胞穿膜肽CPP的序列为SEQ ID NO：2所示，所述MT1
‑
MMP特异性酶切位点的序列为SEQ ID NO：3所示，所述氨基酸连接体的序列为SEQ ID NO：4所示，所述MT1
‑
MMP特异性结合肽的序列为SEQ ID NO：5所示。
[0007]MDVSFRLSGATSSSYGVFISNLRKALPNERKLYDIPLLRSSLPGSQRYALIHLTNYADETISVAIDVT
NVYIMGYRAGDTSYFFNEASATEAAKYVFKDAMRKVTLPYSGNYERLQTAAGKIRENIPLGLPALDSAITTLFYYNANSAASALMVLIQSTSEAARYKFIEQQIGKRVDKTFLPSLAIISLENSWSALSKQIQIASTNNGQFESPVVLINAQNQRVTITNVDAGVVTSNIALLLNRNNMALEG(SEQ ID NO：1)
[0008]VSRRRRRRGGRRRRGG(SEQ ID NO：2)
[0009]SLAPLGLQRR(SEQ ID NO：3)
[0010]GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO：4)
[0011]HWKRLHNTKTFL(SEQ ID NO：5)
[0012]根据本专利技术一种优选实施方式，所述药物递送系统的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。
[0013]MDVSFRLSGATSSSYGVFISNLRKALPNERKLYDIPLLRSSLPGSQRYALIHLTNYADETISVAIDVTNVYIMGYRAGDTSYFFNEASATEAAKYVFKDAMRKVTLPYSGNYERLQTAAGKIRENIPLGLPALDSAITTLFYYNANSAASALMVLIQSTSEAARYKFIEQQIGKRVDKTFLPSLAIISLENSWSALSKQIQIASTNNGQFESPVVLINAQNQRVTITNVDAGVVTSNIALLLNRNNMALEG
‑
VSRRRRRRGGRRRRGG
‑
SLAPLGLQRR
‑
GGGGSGGGGSGGGGS
‑
HWKRLHNTKTFL(SEQ ID NO：6)
[0014]本专利技术MT1
‑
MMP激活的前药型天花粉蛋白递送系统(简称TCCLB)的结构及细胞选择性递送机理如下：递送系统由任选的6
×
His标签、TCS、CPP、MT1
‑
MMP特异性酶切位点、Linker、MT1
‑
MMP结合肽组成，如，6
×
His
‑
TCS
‑
CPP
‑
SLAPLGLQRR
‑
(GGGGS)3‑
HWKRLHNTKTFL。TCCLB以对MT1
‑
MMP有较高的亲和力的HWKHLHNTKL为结合肽提高蛋白递送体系对卵巢癌细胞的选择性，以对MT1
‑
MMP特异性较强SLAPLGLQRR作为底物肽，通过MT1
‑
MMP对底物肽的特异性酶切作用释放CPP，由CPP携载TCS跨过肿瘤细胞膜。当递送系统进入体循环后，MT1
‑
MMP结合肽与卵巢癌细胞膜表面的MTI
‑
MMP选择性结合，之后在MT1
‑
MMP的酶切作用下，暴露CPP，激活CPP的细胞跨膜作用，进而由CPP携载TCS跨过肿瘤细胞膜，提高其细胞内浓度，增强TCS的肿瘤抑制效果。
[0015]根据本专利技术一种优选实施方式，所述药物递送系统的N端还包括6
×
His标签。CPPs主要入胞机制是细胞内吞，通过内吞途径进入细胞的CPPs主要聚集在囊泡中，囊泡中的CPPs及其携载的药物容易被溶酶体降解。组氨酸残基在细胞内可产生内体缓冲作用(endosomal buffering effect)，造成溶酶体破裂，从而释放内容物，因此，优选利用组氨酸残基6
×
His标签作为蛋白的纯化收集标签，同时实现溶酶体逃逸，减少溶酶体对蛋白药物的降解。
[0016]本专利技术的第二方面提供所述前药型天本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种MT1
‑
MMP可激活的前药型天花粉蛋白药物递送系统，其特征在于，该药物递送系统包括由N端至C端的：天花粉蛋白TCS、细胞穿膜肽CPP、MT1
‑
MMP特异性酶切位点、氨基酸连接体、MT1
‑
MMP特异性结合肽；所述天花粉蛋白TCS的序列为SEQ ID NO：1所示，所述细胞穿膜肽CPP的序列为SEQ ID NO：2所示，所述MT1
‑
MMP特异性酶切位点的序列为SEQ ID NO：3所示，所述氨基酸连接体的序列为SEQ ID NO：4所示，所述MT1
‑
MMP特异性结合肽的序列为SEQ ID NO：5所示。2.根据权利要求1所述的MT1<...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙璐，贺慧宁，焦燕，
申请(专利权)人：天津医科大学，
类型：发明
国别省市：