一种采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法，运用于化学检测领域；将预设的短肽抑制剂缀合至预设的金纳米粒子的表面，进行化学修饰得到优化肽纳米粒子（tACE2

【技术实现步骤摘要】
一种采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法


[0001]本专利技术涉及化学检测领域，特别涉及为一种采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法。

技术介绍

[0002]如申请号为《CN202110353115.9》公开了一种具体涉及采用PtPd合金纳米颗粒标记的免疫层析法制备的新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒及其检测方法和应用。一种检测新冠病毒的试剂盒，含有新冠病毒SARSCoV2中和抗体PtPd合金纳米颗粒试纸条。所述新冠病毒SARSCoV2中和抗体PtPd合金纳米颗粒试纸条的制备方法为用合金纳米颗粒标记新冠病毒SARSCoV2抗原作为捕获抗体纳米标记物，再将纯化的A型表达抗原及其抗体包被在纤维素膜上，分别作为检测线T线和质控线C线，经条件优化，建立新冠病毒中和抗体PtPd合金纳米颗粒试纸条。
[0003]但是这种对于新冠病毒的检测方法由于无法测试出现有新冠病毒的不同变种，无法实现对不同病毒变种的分辨。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在解决无法测试出现有新冠病毒的不同变种，无法实现对不同病毒变种的分辨问题，提供一种采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法。
[0005]本专利技术为解决技术问题采用如下技术手段：本专利技术提供一种采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法，包括：将预设的短肽抑制剂缀合至预设的金纳米粒子的表面，进行化学修饰以得到优化肽纳米粒子；将预设的新型冠状病毒刺突蛋白加入至所述优化肽纳米粒子中，得到优化肽纳米蛋白；采用预设的动态光散射仪对所述优化肽纳米蛋白进行照射，以获取第一照射图像；判断所述第一照射图像中的优化肽纳米粒子的蛋白是否与新型冠状病毒刺突蛋白的受体结合区域结合，并达到预设的亲和力结合长度值；若是，则根据所述亲和力结合长度的具体值确认所述新型冠状病毒刺突蛋白对应的病毒变种。
[0006]进一步地，判断所述第一照射图像中的优化肽纳米粒子的蛋白是否与新型冠状病毒刺突蛋白的受体结合区域结合，并达到预设的亲和力结合长度值的步骤中，包括：根据预设的时间测量所述优化肽纳米粒子的粒径分布；判断所述粒径分布是否为预设的聚沉状态；若是，则将所述粒径的直径和浓度代入至预设的希尔公式中，得到粒径的短蛋白和新冠病毒突刺蛋白的受体结合区域的亲和性。
[0007]进一步地，将预设的短肽抑制剂缀合至预设的金纳米粒子的表面，进行化学修饰以得到优化肽纳米粒子的步骤后，包括：将预设的牛血清白蛋白加入至所述优化肽纳米蛋白中，并采用预设的动态光散射仪进行照射，以获取第二照射图像；判断所述第二照射图像中的所述牛血清白蛋白是否与优化肽纳米粒子产生反应；若是，则所述牛血清白蛋白与优化肽纳米粒子的蛋白产生反应并吸收新型冠状病毒刺突蛋白。
[0008]进一步地，若是，则根据所述亲和力结合长度的具体值确认所述新型冠状病毒刺突蛋白对应的病毒变种的步骤中，包括：根据粒径的短蛋白和新冠病毒突刺蛋白的受体结合区域的亲和性和所述亲和力结合长度，匹配预设的对应一种或多种新冠病毒变种的蛋白。
[0009]进一步地，一种或多种新冠病毒变种的蛋白选自禽流感病毒蛋白、猪流感病毒蛋白。
[0010]进一步地，预设的金纳米粒子的制备过程包括：将氯金酸和抗坏血酸溶液加入到双蒸水中，加热的同时进行搅拌，直至溶液颜色由起始的黄色变换为红色，得到金纳米颗粒溶液；将所述金纳米颗粒溶液添加至溶有氯化铵的水溶液中，再加入冰乙酸进行搅拌，搅拌过程中调节温度到20℃
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30℃，直至固体析出，对所述固体进行真空抽滤，真空度≥0.08MPa，以获取到金纳米粒子粗制品；将所述金纳米粒子粗制品加入到预制备的甲醇中，升温至60℃等待反应，直至产生浓缩反应后获取到浓缩的化合物，将所述浓缩的化合物加入至乙醇中，继续升温至80℃，停止升温并进行过滤，以获取到金纳米粒子成品。
[0011]进一步地，将所述金纳米颗粒溶液添加至溶有氯化铵的水溶液中，再加入冰乙酸进行搅拌，搅拌过程中调节温度到20℃
‑
30℃，直至固体析出，对所述固体进行真空抽滤，真空度≥0.08MPa，以获取到金纳米粒子粗制品的步骤中，还包括：所述固体用水搅拌洗涤后抽滤，重复两次，在45
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60℃的环境中用2
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3小时烘干，得到活化固体；将所述活化固体溶于2
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5倍的二氯甲烷中，加入1
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4倍氯化苄，将反应液置于30℃
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45℃水溶液中，反应2
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3小时后取出，以获取到活化固体的粗品；将所述活化固体的粗品添加至具有10％醋酸钠甲醇的溶液中，用甲醇搅拌洗涤后抽滤，将所述粗品洗至抽滤液遇水不变色，在45
‑
60℃的环境中烘干，以获取到活化粗体的精品。
[0012]进一步地，短肽抑制剂氨基酸序列包括Ac
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Leu
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Val
‑
Phe
‑
Phe
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Ala
‑
Arg
‑
Lys
‑
His
‑
His
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NH2中的至少2种所示的氨基酸序列。
[0013]进一步地，优化肽纳米粒子与所述短肽抑制剂的摩尔浓度比为1：0.6。
[0014]进一步地，动态光散射在应用时选用不易受杂质和灰尘影响的场地。
[0015]本专利技术提供了采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法，具有以下有益效果：本专利技术通过tACE2
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AuNPs来优化与SARS
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CoV
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2RBD的结合，作为潜在的抗病毒支架，DLS用于研究有效的共轭因子，以实现tACE2在AuNPs表面的高螺旋倾向垂直排列，更重
要的是，tACE2
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AuNPs和RBD之间的多价结合通过它们在DLS测量中的大小变化来监测，结合亲和力为41.2nM，与天然ACE2
‑
RBD相互作用竞争，总体而言，tACE2
‑
AuNPs提供了高效、与RBD的特异性且持久的结合以潜在地阻止病毒感染。
附图说明
[0016]图1为本专利技术采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法一个实施例的步骤流程示意图；图2为本专利技术采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法一个实施例的希尔方程推算过程；图3为本专利技术采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法一个实施例的细胞感染示意图；图4为本专利技术采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法一个实施例的tACE2
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AuNPs的多价结合示意图；图5为本专利技术采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法一个实施例的tACE2
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AuNPs与SARS
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CoV
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2RBD的结合研究图；图6为本专利技术采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法一个实施例的tACE2
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AuNPs、牛血清白蛋白(BSA)与SARS
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CoV
‑
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将预设的短肽抑制剂缀合至预设的金纳米粒子的表面，进行化学修饰以得到优化肽纳米粒子；将预设的新型冠状病毒刺突蛋白加入至所述优化肽纳米粒子中，得到优化肽纳米蛋白；采用预设的动态光散射仪对所述优化肽纳米蛋白进行照射，以获取第一照射图像；判断所述第一照射图像中的优化肽纳米粒子的蛋白是否与新型冠状病毒刺突蛋白的受体结合区域结合，并达到预设的亲和力结合长度值；若是，则根据所述亲和力结合长度的具体值确认所述新型冠状病毒刺突蛋白对应的病毒变种。2.根据权利要求1所述的采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法，其特征在于，所述判断所述第一照射图像中的优化肽纳米粒子的蛋白是否与新型冠状病毒刺突蛋白的受体结合区域结合，并达到预设的亲和力结合长度值的步骤中，包括：根据预设的时间测量所述优化肽纳米粒子的粒径分布；判断所述粒径分布是否为预设的聚沉状态；若是，则将所述粒径的直径和浓度代入至预设的希尔公式中，得到粒径的短蛋白和新冠病毒突刺蛋白的受体结合区域的亲和性。3.根据权利要求1所述的采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法，其特征在于，所述将预设的短肽抑制剂缀合至预设的金纳米粒子的表面，进行化学修饰以得到优化肽纳米粒子的步骤后，包括：将预设的牛血清白蛋白加入至所述优化肽纳米蛋白中，并采用预设的动态光散射仪进行照射，以获取第二照射图像；判断所述第二照射图像中的所述牛血清白蛋白是否与优化肽纳米粒子产生反应；若是，则所述牛血清白蛋白与优化肽纳米粒子的蛋白产生反应并吸收新型冠状病毒刺突蛋白。4.根据权利要求1所述的采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法，其特征在于，所述若是，则根据所述亲和力结合长度的具体值确认所述新型冠状病毒刺突蛋白对应的病毒变种的步骤中，包括：根据粒径的短蛋白和新冠病毒突刺蛋白的受体结合区域的亲和性和所述亲和力结合长度，匹配预设的对应一种或多种新冠病毒变种的蛋白。5.根据权利要求4所述的采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法，其特征在于，所述一种或多种新冠病毒变种的蛋白选自禽流感病毒蛋白、猪流感病毒蛋白。6.根据权利要求1所述的采用金纳米颗粒测试新冠病毒的检测方法，其特征在于，所述预设的金纳米粒子的制备过程包括：将氯金酸和抗坏血酸溶液加入到双蒸水中，加热的同时进行搅拌，直至溶液颜色由起始的黄色变换为红色，得到金纳米颗粒溶液；将所述金纳米颗粒溶液添加至溶有氯化铵的水溶液中，再加入冰...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱虹霓，
申请(专利权)人：香港科技大学深圳研究院，
类型：发明
国别省市：