没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，具体是没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用。没食子酸甲酯可减轻软骨细胞的损伤及改善骨关节炎，直接保护软骨细胞；还可靶向抑制软骨细胞激活的Pi3k/Akt信号通路，从而减少炎症因子释放。此外，没食子酸甲酯还可通过减轻骨关节炎的炎性微环境引起的软骨细胞活力抑制和凋亡，起到间接保护软骨的作用，从而治疗和减缓骨关节炎。本发明专利技术为更好地理解骨关节炎的病理过程，以及今后对治疗骨关节炎药物的开发提供了新的思路与借鉴。的思路与借鉴。

【技术实现步骤摘要】
没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用


[0001]本专利技术涉及医药
，具体地说，是没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用。

技术介绍

[0002]骨关节炎是目前全球范围内致残率、致畸率较高的进行性慢性关节疾病之一，主要以软骨细胞减少、关节基质破坏降解为特征。目前治疗上主要是以缓解临床症状为主，缺乏有效改善软骨退变的药物。在治疗骨关节炎方面，中医药具有疗效确切、副作用小等优点，已经被应用于临床，并且在联合中药治疗后患者康复情况明显好于单纯性常规治疗。说明中医药在治疗骨关节炎中具有良好的疗效。但如何利用中医药防治骨关节炎是我们研究的方向。
[0003]软骨细胞凋亡与膝骨关节炎严重程度之间存在相关性。软骨细胞凋亡可能会导致细胞外基质功能的丧失和软骨破坏。尽管尚不清楚软骨细胞凋亡是软骨退化的诱导剂还是软骨受损后的产物，但软骨细胞凋亡是骨关节炎发病机理的重要方面。因此，关节软骨细胞凋亡及异常炎症反应是导致关节组织发生退行性变化的起始病症之一，如何缓解关节内局部炎症压力及其诱发的软骨细胞凋亡等成为治疗该病症的关键。
[0004]没食子酸甲酯(Methyl gallate，结构式如式I所示)存在与多种中药中，一种具有抗氧化，抗癌和抗炎活性的植物酚类。也有报道没食子酸甲酯可以调节免疫反应、抑制炎症、保护血管。
[0005][0006]中国专利文献CN114028376A公开了MG在制备高尿酸血症肾病和/或痛风性关节炎的NLRP3通路抑制剂中的应用。中国专利文献CN108530314A公开了一种没食子酸甲酯类似物及其用于制备抗炎药物的应用。但是关于没食子酸甲酯在制备型骨关节炎治疗药物中的应用目前还未见报道。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用。本专利技术首次发现，没食子酸甲酯通过抑制Pi3k/Akt信号通路激活，抑制软骨细胞凋亡而保护软骨细胞，从而减缓和治疗骨关节炎。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术基于以下技术方案：
[0009](1)提取大鼠的原代软骨细胞，检测没食子酸甲酯是否直接减轻炎症下的软骨细胞退变；
[0010](2)炎症诱导后同时给予没食子酸甲酯，用PCR、Western Blot、免疫荧光检测凋亡相关的Pi3k/Akt信号通路，探究Pi3k/Akt下游相关凋亡表达改变情况，评估没食子酸甲酯保护软骨细胞的作用；
[0011]具体涉及以下实验过程：
[0012]1.原代软骨细胞的提取与鉴定；
[0013]2.CCK
‑
8法筛选没食子酸甲酯干预的最佳浓度；
[0014]3.没食子酸甲酯抑制骨关节炎模型软骨细胞的分解代谢能力；
[0015]4.没食子酸甲酯缓解骨关节炎模型软骨细胞的合成能力；
[0016]5.没食子酸甲酯下调Pi3k/Akt通路影响软骨细胞功能；
[0017]6.没食子酸甲酯影响软骨细胞凋亡基因的影响。
[0018]基于上述技术方案，本专利技术的第一方面，提供没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用。
[0019]进一步的，所述的骨关节炎包括但不限于白介素
‑
1β型骨关节炎或风寒湿痹型骨关节炎。
[0020]进一步的，所述的应用中，没食子酸甲酯用于制备减缓和治疗因炎症对软骨细胞的损伤而导致的骨关节炎的药物。
[0021]进一步的，所述的应用中，没食子酸甲酯通过减轻炎症对软骨细胞的损伤，直接保护软骨细胞，从而减缓和治疗骨关节炎。
[0022]进一步的，所述的应用中，没食子酸甲酯通过抑制Pi3k/Akt信号通路激活，抑制软骨细胞凋亡而保护软骨细胞，从而减缓和治疗骨关节炎。
[0023]本专利技术的第二方面，提供没食子酸甲酯在制备减轻炎症对软骨细胞损伤的药物中的应用。
[0024]本专利技术的第三方面，提供没食子酸甲酯在制备抑制Pi3k/Akt信号通路激活的药物中的应用。
[0025]本专利技术的第四方面，提供一种骨关节炎治疗药物，所述的药物的活性成分为没食子酸甲酯。
[0026]进一步的，所述的药物还包括药学上可接受的载体或辅料。
[0027]本专利技术优点在于：
[0028]1、本专利技术首次公开了没食子酸甲酯的保护体外软骨细胞作用及其在治疗骨性关节炎中的应用。
[0029]2、本专利技术实验结果证明，没食子酸甲酯可减轻软骨细胞的损伤，直接保护软骨细胞；还可靶向抑制控制软骨细胞激活的Pi3k/Akt信号通路，从而减少炎症因子释放。此外，没食子酸甲酯还可通过减轻骨关节炎的炎性微环境引起的软骨细胞活力抑制和凋亡，起到间接保护软骨的作用，从而治疗和减缓骨关节炎。
[0030]3、本专利技术得到了大量实验数据的支持，表明没食子酸甲酯具有显著的软骨细胞保护作用，并可在未来治疗骨关节炎中发挥重要作用。本专利技术为更好地理解骨关节炎的病理
过程，以及今后对治疗骨关节炎药物的开发提供了新的思路与借鉴。
附图说明
[0031]图1为没食子酸甲酯对大鼠软骨细胞的细胞毒性检测图；其中，A为24小时CCK
‑
8检测评估细胞的生存能力，B为48小时CCK
‑
8检测评估细胞的生存能力。
[0032]图2为没食子酸甲酯抑制骨关节炎模型中软骨细胞的分解代谢能力图；其中，A为RT
‑
PCR检测SD新生大鼠软骨细胞经处理后的促炎因子(IL
‑
6、IL
‑
1β)和分解代谢能力(ADAMTS5、MMP13)的mRNA表达。B为Western Blot检测SD新生大鼠软骨细胞经处理后的iNos、Cox
‑
2和MMP9的蛋白表达。
[0033]图3为没食子酸甲酯缓解骨关节炎模型软骨细胞的合成能力图；其中，A为Col2α1与DAPI(细胞核)的各组免疫荧光图像。B为各组的Col
‑
2α1的荧光强度情况。C为Western Blot检测各组的Col2α1、Acan和Sox
‑
9的蛋白表达。
[0034]图4为没食子酸甲酯对软骨细胞Pi3k/Akt通路情况图。
[0035]图5为没食子酸甲酯对软骨细胞凋亡基因的影响图。
具体实施方式
[0036]下面结合实施例对本专利技术提供的具体实施方式作详细说明。
[0037]实施例1：没食子酸甲酯对大鼠软骨细胞的细胞毒性
[0038]取出生24h的SD大鼠四肢关节处软骨，提取软骨细胞。P1
‑
2代细胞进行研究。CCK8法检测没食子酸甲酯对大鼠软骨细胞的细胞毒性。
[0039]不同浓度没食子酸甲酯在不同时间点对软骨细胞活力的影响(图1)。不同浓度没食子酸甲酯单体干预P1代软骨细胞后，分别于24小时和48小时两个时间点检测450nm处的吸光度值。如图1显示，100μM的没食子酸甲酯干预软骨细胞24、48h时，细胞出现明显本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用。2.根据权利要求1所述的没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用，其特征在于，没食子酸甲酯用于制备减缓和治疗因炎症对软骨细胞的损伤而导致的骨关节炎的药物。3.根据权利要求1所述的没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用，其特征在于，没食子酸甲酯通过减轻炎症对软骨细胞的损伤，直接保护软骨细胞，从而减缓和治疗骨关节炎。4.根据权利要求1所述的没食子酸甲酯在制备骨关节炎治疗药物中的应用，其特征在于，没食子酸甲酯通过抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹月龙，陈龑，郑昱新，陈博，丁道芳，庞坚，詹红生，
申请(专利权)人：上海中医药大学附属曙光医院，
类型：发明
国别省市：