一种治疗大肠癌的靶向药物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种治疗大肠癌的靶向药物组合物，所述药物组合物由左金丸水提物与西妥昔单抗组成，所述左金丸水提物与西妥昔单抗的比例为：22.5:1。本发明专利技术还提供了药物组合物在制备治疗大肠癌的靶向药物中的应用。本发明专利技术的靶向药物组合物，在体内荷瘤裸鼠模型水平协同多靶点抗EGFR的药效学、药理学和早期安全性的研究，证明能够改善大肠癌动物模型的一般情况及抑制大肠癌生长和转移。本发明专利技术的靶向药物组合物，能阻断与EGFR密切相关的信号蛋白的激活，抑制下游转录因子的表达。采用左金丸联合CET干预后的大肠癌细胞中p

【技术实现步骤摘要】
一种治疗大肠癌的靶向药物组合物及其应用


[0001]本专利技术涉及药物
，具体地说，是关于治疗大肠癌的靶向药物组合物及其应用。

技术介绍

[0002]结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是全球发病率、病死率均较高的恶性肿瘤。表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor，EGFR)是上皮肿瘤中最重要的原癌基因之一，72％～89％的CRC组织中存在EGFR的高表达。因此，以表皮生长受体为靶点的西妥昔单抗(Cetuximab，CET)取得了较好的临床疗效。CET是IgG单克隆抗体，可与细胞表面的表皮生长因子EGF受体EGFR特异性结合，竞争性阻断EGF和其他配体的结合，从而阻断EGFR依赖的肿瘤细胞增殖、转移、侵袭以及血管生成等生物学效应。然而，随着CET的临床应用，其耐药问题日益突出，不仅增加患者的经济负担，更缩短了患者的总生存期，已成为转移性结直肠癌患者从CET治疗中获益的最大阻碍。
[0003]随着肿瘤代谢的特殊性在肿瘤发生、发展中的作用逐渐明了，耐药细胞的能量代谢表型也越来越被人们所重视，并很可能是诱导肿瘤耐药产生的关键因素。近期多项研究表明，糖酵解与肿瘤耐药直接相关，耐药细胞有氧糖酵解较非耐药细胞显著增强。1920年Otto Warburg首次提出肿瘤细胞即使在氧气充足的情况下，依旧以糖酵解方式提供能量，即：“Warburg效应”，是肿瘤细胞维持生物学功能的重要机制，也是逆转肿瘤耐药的重要治疗靶标。
[0004]长期的临床实践证明，中医药联合靶向药物在提高疗效、降低药物毒副作用方面具有显著优势，是结直肠癌综合治疗的有效手段之一。课题组前期研究证实左金丸具有逆转肿瘤多药耐药，改善大肠癌患者生存质量，延长生存期的临床疗效，但是具体作用机制仍未明确。
[0005]左金丸(ZJW)，最早源自明代《丹溪心法》一书，是应用“寒者热之，热者寒之”中医理论的经典方剂。黄连苦寒，清心泻肝，吴茱萸辛热，引热下行，二药一主一辅，一寒一热，相反相成。对于左金丸的适应证，原书只有“治肝火”之用，现代应用却非常广泛。现代药效药性学认为，肿瘤耐药多是因为化疗药物往往偏于“热性”的原因，因此采用偏于“寒性”的左金丸或者反左金丸配合化疗，在药物微热量学研究上获得突破性收获。祖国医学认为“火热当清，气逆当降”，方中重用苦寒之黄连为君，清泻肝火，亦善清泻胃热，肝火清则不横逆犯胃，胃火降则其气自和。佐以辛热之吴茱萸，既能疏肝解郁使肝气条达，又能反制黄连之寒，保护脾阳。
[0006]而目前关于一种治疗大肠癌的靶向药物组合物还未见报道。

技术实现思路

[0007]本专利技术的第一个目的是，针对现有技术中的不足，提供一种治疗大肠癌的靶向药物组合物。
[0008]本专利技术的第二个目的是，提供药物组合物用途。
[0009]为实现上述第一个目的，本专利技术采取的技术方案是：
[0010]一种治疗大肠癌的靶向药物组合物，所述药物组合物由左金丸水提物与西妥昔单抗组成。
[0011]作为一个优选例，所述左金丸水提物与西妥昔单抗的比例为：22.5:1。
[0012]作为一个优选例，所述左金丸水提物是由以下方法得到：取黄连：吴茱萸6:1提取，左金丸水提物得率为1g生药/0.071g水提物。
[0013]为实现上述第二个目的，本专利技术采取的技术方案是：药物组合物在制备治疗大肠癌的靶向药物中的应用。
[0014]本专利技术优点在于：本专利技术的靶向药物组合物，在体内荷瘤裸鼠模型水平协同多靶点抗EGFR的药效学、药理学和早期安全性的研究，证明能够改善大肠癌动物模型的一般情况及抑制大肠癌生长和转移。本专利技术的靶向药物组合物，能阻断与EGFR密切相关的信号蛋白的激活，抑制下游转录因子的表达。采用左金丸联合CET干预后的大肠癌细胞中p
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EGFR、p
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Akt、p
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mTOR等蛋白活性降低，与单用CET相比，左金丸联合CET能够抑制大肠癌细胞中EGFR信号通路相关的EGFR、Akt、mTOR等蛋白磷酸化的表达。本研究也观察到左金丸联合西妥昔单抗能够明显降低细胞中葡萄糖摄取量、乳酸产生量、ATP含量及ECAR，进一步证明左金丸逆转西妥昔单抗的靶向耐药可能是通过抑制耐药细胞的糖酵解途径发挥作用的。
附图说明
[0015]图1：左金丸提取物联合西妥昔对大肠癌原位移植瘤裸鼠体重的影响。
[0016]图2：左金丸提取物联合西妥昔对大肠癌原位移植瘤裸鼠肺转移的作用。
[0017]图3：左金丸水提物对SW620细胞存活率的影响。
[0018]图4：左金丸联合CET对SW620细胞增殖的抑制作用。
[0019]图5：左金丸水提物联合CET对SW620细胞EGFR、Akt、mTOR蛋白及其磷酸化的作用。与SW620组比较**P<0.01。
[0020]图6A：各组葡萄糖摄取比较。与Control组比较**P<0.01；与CET组比较#P<0.05。
[0021]图6B：各组乳酸含量比较。与Control组比较**P<0.01；与CET组比较##P<0.01。
[0022]图6C：各组ATP含量比较。与Control组比较**P<0.01；与CET组比较##P<0.01。
[0023]图6D：各组细胞外酸度比较。
[0024]图6E：各组细胞基础耗氧率比较。
具体实施方式
[0025]下面结合具体实施方式，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术记载的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
[0026]实施例1
[0027]为了达到上述目的，本专利技术提供的技术方案为：
[0028]1.左金丸提取物的制备
[0029]左金丸(黄连：吴茱萸6:1)水提物提取方法：称取充分干燥过的黄连药材粉末30g，吴茱萸药材5g，以0.2％的硫酸温水浸泡提取3小时，提取三次，每次350ml，提取液减压浓缩至100ml，加石灰乳调pH至10，冰箱静置2小时，离心弃去沉淀，水层以氯仿萃取五次，每次100ml，回收氯仿至干，得粉末
①
。水层继续加盐酸调pH＝2，加入8g食盐，冰箱放置24小时，收集沉淀，干燥得粉末
②
。合并粉末
①
和粉末
②
，得干燥总粉末2.50g。左金丸水提物得率为1g生药/0.071g水提物。对于细胞实验，实验前称取适量水提物干粉，经涡旋、超声、水浴等方法使其充分溶解于L
‑
15培养基后，0.22μm滤器过滤并配制成所需浓度的溶液，4℃保存备用。
[0030]2.大肠癌原位移植瘤裸小鼠模型...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种治疗大肠癌的靶向药物组合物，其特征在于，所述药物组合物由左金丸水提物与西妥昔单抗组成。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述左金丸水提物与西妥昔单抗的比例为：22.5:1。3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：隋华，朱惠蓉，邓皖利，王子元，卫真真，柴琼，王婷，
申请(专利权)人：上海中医药大学附属曙光医院，
类型：发明
国别省市：