一种食品中二氧化硫的检测方法技术

本发明专利技术属于食品中对与添加剂的检测分析领域，具体涉及一种利用衍生试剂进行化合物的衍生，利用该化合物的荧光特性，对食品中二氧化硫的检测方法。将待测样品中加入作为荧光指示剂的1

【技术实现步骤摘要】
一种食品中二氧化硫的检测方法


[0001]本专利技术属于食品中对与添加剂的检测分析领域，具体涉及一种利用衍生试剂进行化合物的衍生，利用该化合物的荧光特性，对食品中二氧化硫的检测方法。

技术介绍

[0002]食品安全问题关乎我国广大群众的身心健康，随着人们生活水平的不断提高，对自身的营养要求也越来越高，为此针对食品中的各类物质添加残留量也尤为关注，其中二氧化硫在食品中就被广泛的添加使用。食品中的二氧化硫来源主要有两类:一类是内源性，由其自身产生，并且大部分的含量很低，对人体造成危害很小；另一类是外源性，食品中为了达到漂白、杀菌、增色、保鲜等目的，通过熏蒸浸泡直接加入等方式进行添加，导致在食品中有大量的二氧化硫残留，其中过量的二氧化硫会刺激呼吸道粘膜系统，有可能导致患者咽喉肿痛，对眼睛具有刺激性，更严重者会产生胃部等消化系统不适，进而引发呕吐腹泻等诸多不良反应。
[0003]在二氧化硫的检测中，其中利用亚硫酸盐用来漂白而导致在食品中有残留，均作为二氧化硫残留量的指标，对食品中亚硫酸盐的含量的测定就是对食品中二氧化硫的的测定。食品的种类丰富多样，根据市场的需求，其检测方法也在不断更新发展。
[0004]目前食品中二氧化硫的分析方法主要包含有比色法、滴定法、色谱法。其中，比色法使用的吸收液四氯汞钠是有毒试剂，对实验人员的身体健康具有一定的危险。滴定法是目前国家标准中常用的检测方法，但是实验所用时间较长，不适于大批两的样品检测。色谱法具有操作简单、检测时间缩短，但目标物经过衍生反应后，生成的衍生物稳定性不高，需进一步对衍生物的稳定性进行探讨。
[0005]近些年,随着高灵敏度仪器的出现,传统分析方法中有机溶剂污染、分析效率低下、准确度低的缺点逐渐显现出来。运用现代分析仪器,发展高效的分离分析手段和方法,为解决此类问题提供了一个契机。

技术实现思路

[0006]为了克服现有技术的问题，本专利技术目的在于建立一种基于液相色谱进行衍生化合物分离的对食品中二氧化硫的检测方法。
[0007]为实现上述目的，本专利技术通过如下技术方案实现的：
[0008]一种食品中二氧化硫的检测方法，将待测样品中加入作为荧光指示剂的1
‑
磺酸基
‑
异吲哚化合物，通过高效液相色谱检测进而定性/或定量的检测样品中的二氧化硫。
[0009]通过氢氧化钠对待检测样品中二氧化硫提取，提取液与衍生反应体系混合进行衍生反应，反应液通过高效液相色谱对进行目标化合物的分离，进而定性/或定量的检测样品中的二氧化硫。
[0010]所述样品中二氧化硫提取：将待检测样品均匀粉碎后加入氢氧化钠，至体系内氢氧化钠浓度达到0.4mmol/L，摇匀30
‑
40℃恒温振荡150
‑
300r/min，反应30
‑
40min，而后离心
收集上清液，待用。
[0011]所述衍生反应：向PH值为5.0
‑
7.0的缓冲溶液中加入邻苯二甲醛溶液和乙酸铵溶液，而后再加入样品的提取液，在40
‑
80℃恒温水浴锅中，衍生1
‑
10min，取出，立即放入0℃的冰水中，冷却终止反应，静置1h。
[0012]所述荧光波长范围在224nm
‑
386nm之间；高效液相条件：色谱柱：Agilent Eclipse XDB
‑
C18 5um 4.6
×
250mm；检测波长：激发波长为323nm,发射波长为386nm；流动相：磷酸和乙腈；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；进样量：20uL。
[0013]所述通过高效液相色谱检测分离目标化合物，若在荧光分光光度计的波长扫描中，其具有特定的激发波长和发射波长，范围在224nm
‑
386nm之间，在该波长下，流速：1.0mL/min，液相色图谱中出现峰值，即为样品中含二氧化硫；若在该波长下，液相色谱图谱中无峰值，即为样品中不含二氧化硫。
[0014]所述样品中含二氧化硫通过对积峰处理，利用所积的峰面积进行浓度换算，即可定量测定样品中二氧化硫的含量。进一步的说，通过建立标准曲线，对分离的目标化和物进行积峰处理，利用所积的峰面积进行浓度换算，即可定量测定样品中二氧化硫的含量。
[0015]更进一步的检测方法：
[0016]1)衍生方法
[0017]准确移取2mL的pH值为5.5的缓冲溶液，使用移液枪将稀释浓度为100ug/mL的邻苯二甲醛溶液，100ug/mL的乙酸铵溶液依次加入2.5mL、1.5mL，取样品上清液1mL，利用超纯水定容至10mL，在50℃恒温水浴锅中，衍生5min，取出，立即放入0
°
的冰水中，冷却终止反应，静置1h。将待测溶液过孔径为0.45μm的微孔过滤器过滤，过滤液收集于高效液相色谱注射瓶中，待上机用。
[0018]2)荧光波长的确定
[0019]利用荧光分光光度计，对待测液进行吸收波长和发射波长的光谱扫描，移取衍生后的待测液于荧光比色皿中，约比色皿的三分之二，扣除空白进行Scan全波长扫描，确定最大发射波长,固定发射波长，扫描激发波长，最终确定样品的最佳波长。
[0020]3)标准曲线的建立
[0021]将亚硫酸钠储备液稀释成浓度为100ug/mL溶液，用移液器枪精确移取稀释后的亚硫酸钠溶液0.0、0.1、0.2、0.5、0.8、1.0mL，加入pH值为5.5的缓冲溶液2mL、100ug/mL的邻苯二甲醛溶液2.5mL、100ug/mL的乙酸铵溶液1.5mL放于10mL的容量瓶，用超纯水定容，按照3.2.2.1的衍生方法进行衍生化反应，静置结束后过0.45um的有机膜，利用高效液相色谱分离测定，绘制标准曲线。
[0022]4)液相方法的优化
[0023]优化液相色谱柱以及流动相的选用，并建立梯度洗脱的方式对目标化合物进行分离确定，对衍生物进行积峰处理，进行定量分析。
[0024]本专利技术所具有的优点：
[0025]1.本专利技术通过特定荧光衍生试剂，利用该衍生试剂建立具有荧光化合物生成的衍生化反应，并且进行衍生化反应的优化，进而使得本专利技术方法能够有效地针根据其荧光特性的专属性质对食品中二氧化硫检测。
[0026]2.利用高效液相对生成的衍生化合物进行分离，并进行定量、定性的分析检测以
及方法学的验证实验；本方法选用灵敏度较高的液相色谱法，避免人为实验带来的偏差。
[0027]3.本专利技术方法运用于实际样品的检测中，检测二氧化硫的量，检出范围广，可以很好的适用在各种食品，操作简单，耗时短比传统方法更具有优势，对以后市场中针对二氧化硫残留量的检测提供理论依据考察该方法的适用性范围。
附图说明
[0028]图1
‑
1为荧光激发波长光谱图。
[0029]图1
‑
2为荧光发射波长光谱图。
[003本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种食品中二氧化硫的检测方法，其特征在于：将待测样品中加入作为荧光指示剂的1
‑
磺酸基
‑
异吲哚化合物，通过高效液相色谱检测进而定性/或定量的检测样品中的二氧化硫。2.按权利要求1所述的食品中二氧化硫的检测方法，其特征在于：通过氢氧化钠对待检测样品中二氧化硫提取，提取液与衍生反应体系混合进行衍生反应，反应液通过高效液相色谱对进行目标化合物的分离，进而定性/或定量的检测样品中的二氧化硫。3.按权利要求2所述的食品中二氧化硫的检测方法，其特征在于：所述样品中二氧化硫提取：将待检测样品均匀粉碎后加入氢氧化钠，至体系内氢氧化钠浓度达到0.4mmol/L，摇匀30
‑
40℃恒温振荡150
‑
300r/min，反应30
‑
40min，而后离心收集上清液，待用。4.按权利要求2所述的食品中二氧化硫的检测方法，其特征在于：所述衍生反应：向PH值为5.0
‑
7.0的缓冲溶液中加入邻苯二甲醛溶液和乙酸铵溶液，而后再加入样品的提取液，在40
‑
80℃恒温水浴锅中，衍生1
‑
10min，取出，立即放入0℃的冰...

【专利技术属性】
技术研发人员：牟莉，康琴，许莹，付垚，何玮宁，何创展，
申请(专利权)人：长春大学，
类型：发明
国别省市：