一种卵清多肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种卵清多肽的制备方法。包括将卵清蛋白稀释混匀调pH至酸性后离心沉淀，分离得到上清和沉淀；将所得上清进行酸性蛋白酶处理，得到酶处理液A；将所得沉淀进行碱性溶液溶解，再碱性蛋白酶处理，得到酶处理液B；将所得酶处理液A和酶处理液B混合后调pH为6.5

【技术实现步骤摘要】
一种卵清多肽的制备方法


[0001]本专利技术涉及蛋白多肽制备技术，尤其涉及一种卵清多肽的制备方法。

技术介绍

[0002]鸡蛋清也被称为“蛋白”或“卵白”、“卵清”、“蛋清”，是鸡蛋里围绕蛋黄的透明液体部分。蛋清起初是单细胞卵子细胞质，其目的是给发育中的胚胎提供全方位的营养。这也是卵清蛋白作为理想营养滋补品的原因所在。鸡蛋清是最纯最丰富的蛋白质来源之一。许多健美运动员使用的蛋白质营养品都是由蛋清分离而得。研究发现，卵清蛋白氨基酸比例非常均衡，与人体非常一致，根据世界健康组织报道,鸡卵白蛋白是日常食物中消化率最高，是天然食物中人体利用率最高的优质蛋白质。
[0003]食物蛋白质的生物价(英文为：biological value，BV)，是一种反映食物蛋白质消化吸收后，被机体利用程度的一项指标，生物价越高，说明蛋白质被机体利用率越高，即蛋白质的营养价值越高，最高值为100％。比较不同来源的蛋白质的生物价，发现：鸡蛋蛋白的生物价高达94％，脱脂牛奶为85％，鱼肉为83％，牛肉76％，猪肉74％，大豆57％，大米77％，小麦67％；也就是说，鸡蛋蛋白被机体利用率最高，营养价值也最高。
[0004]虽然鸡蛋蛋白富含优质蛋白质，目前还局限于餐桌上的美味佳肴，没有得到高价值应用开发。究其原因，主要制约因素是：1)生鲜鸡蛋蛋白有一股腥味难以被普通人接受，2)卵清蛋白为含有超大分子粘蛋白，为非水溶性蛋白，不利于制备液体类体产品，3)卵清中含有蛋白酶抑制剂对蛋白酶水解有抵抗作用，并不利于消化吸收。

技术实现思路

[0005]为了克服上述问题，本专利技术的目的在于提供一种卵清多肽的制备方法，利用该方法制备的卵清多肽具有增强免疫力的功效。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供一种卵清多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，前处理：将卵清蛋白稀释混匀调pH至酸性后离心沉淀，分离得到上清和沉淀；
[0007]上清处理：将所得上清进行酸性蛋白酶处理，得到酶处理液A；
[0008]沉淀处理：将所得沉淀进行碱性溶液溶解，再碱性蛋白酶处理，得到酶处理液B；
[0009]卵清多肽的获得：将所得酶处理液A和酶处理液B混合后调pH为6.5
‑
8.5，比如pH＝6.5,7.0,7.5,8.0,8.5，再用中性蛋白酶处理得到组合处理液，再热处理分离出上清液，该上清液即为卵清多肽。
[0010]进一步，所述前处理是在生卵清液中加水稀释混匀，然后调pH至3
‑
6；优选的pH为3.5
‑
4.5，再打浆后静置，分离得到上清和沉淀；优选的，所述打浆后静置为：5000
‑
20000转/分打浆2
‑
5分钟后，再静置4
‑
8小时。继续优选10000
‑
20000转/分打浆2
‑
5分钟后，再静置4
‑
8小时。
[0011]进一步，所述前处理中稀释是将卵清蛋白用纯净水稀释2
‑
6倍；优选稀释3
‑
4倍。
[0012]进一步，所述前处理中预先将生卵清液在稀释前或稀释后加热至100℃保持1
‑
15
分钟，优选的5分钟，然后再打浆及处理。
[0013]进一步，所述上清处理步骤为，往上清中直接加入酸性蛋白酶至100
‑
50000酶单位30
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45℃保温4
‑
24小时，优选的加入酸性蛋白酶至500
‑
3000酶单位35
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48℃保温8
‑
16小时；得到酶处理液A。
[0014]进一步，所述沉淀处理步骤为，往所得沉淀中加入50mM pH9
‑
11的碳酸钠
‑
碳酸氢钠溶液，加入量按每克10
‑
100ml的量，再加入碱性蛋白酶至100
‑
50000酶单位36
‑
55℃保温4
‑
16小时；优选的，加入碱性蛋白酶至300
‑
1000酶单位45
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50℃保温8
‑
10小时；得到酶处理液B。
[0015]进一步，所述卵清多肽的获得步骤为，将所得酶处理液A和酶处理液B混合后调pH为6.5
‑
8.5，再用中性蛋白酶处理得到组合处理液，其中加中性蛋白酶至100
‑
10000酶单位36
‑
55℃保温2
‑
16小时；优选的，加中性蛋白酶至500
‑
1000酶单位42
‑
50℃保温2
‑
6小时,再加温至80
‑
90℃并保持5
‑
30分钟后进行分离处理，所得到的上清液即为卵清多肽。
[0016]进一步，所述卵清多肽的获得步骤中，酶处理液A和酶处理液B的混合液中两者的体积比例为1:(1
‑
3)；优选的，体积比例为1：2。
[0017]进一步，还包括将由权利要求1
‑
8任一所述制备方法制得的卵清多肽进一步用超滤器或分子筛分离出分子量在1
‑
5KD的卵清多肽；优选的，将所得的卵清多肽用5KD截留膜的超滤器过滤卵清多肽，滤过液进一步用1KD截留膜的超滤器过滤至余液为滤前的1/3
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1/5时收集截留液，便得浓缩的分子量在1
‑
5KD的卵清多肽。
[0018]进一步，还包括将所得的卵清多肽或1
‑
5KD的多肽混合物用磷酸盐缓冲液调配至pH为6
‑
9，优选的pH为7
‑
8，再罐装并经100
‑
120℃灭菌5
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30分钟后常温保存。
[0019]本专利技术还保护所述制备方法制备得到的卵清多肽。
附图说明
[0020]图1是卵清蛋白对小鼠免疫力的影响实验结果图。
[0021]图2是卵清蛋白对小鼠免疫力的影响实验结果图。
[0022]图3是脾脏淋巴细胞增殖反应实验结果图。
具体实施方式
[0023]下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0024]实施例1：卵清多肽的制备
[0025]前处理：在1L生卵清液中加2L体积的纯净水稀释、混匀(记为样品1)，然后加适量柠檬酸/柠檬酸钠，调pH至4.2，再以10000转/分打本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种卵清多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，前处理：将卵清蛋白稀释混匀调pH至酸性后离心沉淀，分离得到上清和沉淀；上清处理：将所得上清进行酸性蛋白酶处理，得到酶处理液A；沉淀处理：将所得沉淀进行碱性溶液溶解，再碱性蛋白酶处理，得到酶处理液B；卵清多肽的获得：将所得酶处理液A和酶处理液B混合后调pH为6.5
‑
8.5，再用中性蛋白酶处理得到组合处理液，再热处理分离出上清液，该上清液即为卵清多肽。2.如权利要求1所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述前处理是在生卵清液中加水稀释混匀，然后调pH至3
‑
6；优选的pH为3.5
‑
4.5，再打浆后静置，分离得到上清和沉淀；优选的，所述打浆后静置为：10000
‑
20000转/分打浆2
‑
5分钟后，再静置4
‑
8小时。3.如权利要求1或2所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述前处理中稀释是将卵清蛋白用纯净水稀释2
‑
6倍；优选稀释3
‑
4倍。4.如权利要求1至3任一所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述前处理中预先将生卵清液在稀释前或稀释后加热至100℃保持1
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15分钟；优选的5分钟，然后再打浆及处理。5.如权利要求1所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述上清处理步骤为，往上清中直接加入酸性蛋白酶至100
‑
50000酶单位30
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45℃保温4
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24小时，优选的加入酸性蛋白酶至500
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3000酶单位35
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48℃保温8
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16小时；得到酶处理液A。6.如权利要求1所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述沉淀处理步骤为，往所得沉淀中加入50mM pH9
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11的碳酸钠
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碳酸氢钠溶液，加入量按每克10
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100ml的量，再加入碱性蛋白酶至100
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50000酶单位36
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5...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹潮，朱征，房小龙，
申请(专利权)人：承功厦门生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：