一种猪分类样本采集方法技术

本发明专利技术公开了一种猪分类样本采集方法，该收集方法包括以下步骤：采集样本前准备，血液的采集，各类组织器官的采集，肠道内容物的采集，粪便的采集，拭子类样本的采集。本发明专利技术的一种猪分类样本采集方法有利于减少病猪与环境和人的直接接触，避免造成环境污染以及威胁人的健康，有利于促进我国生猪养殖业的健康发展。展。展。

【技术实现步骤摘要】
一种猪分类样本采集方法


[0001]本专利技术属于样本采集
，具体涉及一种猪分类样本采集方法。

技术介绍

[0002]我国是世界上的生猪饲养大国和猪肉消费大国，养猪业的健康发展关乎国计民生。但随着生猪养殖规模的扩大，猪疫病日益呈高发趋势，如2018年8月首次传入我国的非洲猪瘟，严重威胁了生猪健康和稳定生产，造成了巨大的经济损失。但目前对病猪的处理是进行扑杀，容易造成环境污染以及威胁人的健康。合理的病猪样本采集可减少病猪与环境和人的直接接触，因此急需出现更加完善、更加规范的生猪样本采集方式。
[0003]经检索，中国专利公开了一种动物血清采集方法，更具体地说涉及一种牛血清采集方法。包括以下步骤：采血、接血、离心和分装，关键是在接血瓶内按接血瓶总容积1％的比例加入0.9％氯化钠注射液，在离心前将接血瓶放到38℃水浴箱中，直到血清开始析出后才可进行离心。该专利技术的优点是在接血瓶内加入氯化钠注射液，人为制造了一个等渗环境，血液的渗透压不会发生改变，不会因红细胞破裂而溶血。接血瓶在38℃水浴箱内，使血液均匀受热，这样有利于不稳定蛋白的析出，有利于血清的析出、离心和分离，采集的血清外观为黄色且透亮。但是该方法仅仅描述了动物血清的采集方法，关于其他类型的动物样本如何采集并未提及。此外，该方法需手动在接血瓶中加入0.9％氯化钠注射液以防止红细胞破裂，过程复杂。

技术实现思路

[0004]针对生猪样本采集方法的缺乏，本专利技术的目的是提供一种猪分类样本采集方法。本专利技术提出的一猪分类样本采集方法涉及猪各类样本的采集，更加的全面，而且在采集血液和血清时直接使用一次性真空采血管，更加简便的同时还能保护样本免受污染，也能避免样本污染环境和威胁人类健康。
[0005]本专利技术提出的一种猪分类样本采集方法，包括以下步骤：
[0006]一种猪分类样本采集方法，包括以下步骤：
[0007](1)血液的采集：先在采集管表面粘贴准确无误的样本背景信息，接着将采血部位的猪毛剃干净，然后消毒，待采血部位干燥后用针头穿刺，将血液采集到采血管里后混匀；
[0008](2)各类组织器官的采集：在猪死亡后，剖开体腔，剥离组织器官，然后切取组织块分装，剩余的组织分开存放，并记录好样本背景信息记录表；
[0009](3)肠道内容物的采集：在猪死亡后，在无菌状态下取出整个肠道，然后切取大肠和小肠后，将肠道内容物挤出分装，剩余的肠道分开存放，或用组织剪将肠道从两端剪开，用缓冲液冲洗，冲洗出的内容物分装，记录好样本的背景信息；
[0010](4)粪便的采集；从体外采集粪便，准备好粪便容器收集猪粪便，然后将猪的粪便样本分装，记录好样本的背景信息；
[0011](5)拭子类样本的采集：
[0012]1)肛门拭子
[0013]将肛门周围清洁干净，用无菌棉拭子插入肛门隐窝处旋转后取出，将棉拭子头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息；
[0014]2)呼吸道拭子
[0015]用无菌棉拭子蘸取猪鼻腔、咽喉或气管内的分泌物后取出，将棉拭子头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息；
[0016]3)眼睛拭子
[0017]撑开眼睑，接着用无菌棉拭子蘸取分泌物，应避免接触睫毛和脸缘，采样后将棉拭子头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息；
[0018]4)皮肤拭子
[0019]将无菌棉拭子按在需取样的皮肤表面上擦拭，擦拭完成后，将每个取样点的棉拭子的头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息；
[0020]5)阴道拭子
[0021]用无菌棉拭子插入母猪的阴道中旋转后取出，将棉拭子头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息。
[0022]进一步地，步骤(2)所述血液的采集为采集全血时选用含有抗凝剂的一次性真空采血管；制备血清选用不含任何添加剂的一次性真空采血管或一次性采血器；每头病猪需采集血液至少3个管。
[0023]进一步地，步骤(2)中，所述组织器官为心、肝、脾、肺、肾和淋巴结；所述切取组织块为切取3～5块组织块。
[0024]进一步地，步骤(3)中，内容物分装为分装在至少3管离心管中；所述缓冲液为PBS缓冲液(PH 7.2～PH 7.4)。
[0025]进一步地，步骤(4)中，所述粪便样本分装为粪便样本分装于至少3管离心管中。
[0026]进一步地，步骤(5)所述缓冲液为PBS缓冲液(PH 7.2～PH 7.4)。
[0027]进一步地，步骤(5)中每头猪需分布采集至少3个肛门拭子、呼吸拭子、眼镜拭子、皮肤拭子和阴道拭子。
[0028]进一步地，步骤(1)所述血液的采集应选择早晨未喂食或者停食6h后但饮水充足的生猪进行血液采集，防止血液凝固不完全形成胶冻状样品；步骤(1)中，采血时采血管应倾斜，颠倒混匀时动作要轻柔，避免发生溶血现象；步骤(1)中，针对全血样本，需将采集到的全血保存于2～6℃冰箱中，而分离出的血清样本应放入
‑
15～
‑
20℃冰箱保存。
[0029]进一步地，步骤(4)中，所述采集粪便的粪便取样器应从粪便内部取样，因为接触空气后粪便外部容易污染，且部分细菌的DNA会开始降解。
[0030]进一步地，步骤(2)、步骤(3)、步骤(4)和步骤(5)中，采集的样本存储在
‑
20～
‑
80℃的冰箱中。
[0031]进一步地，一种猪分类样本采集方法具体为：
[0032](1)采集样本前准备；(2)血液的采集；(3)各类组织器官的采集；(4)肠道内容物的采集；(5)粪便的采集；(6)拭子类样本的采集。
[0033]进一步地，步骤(1)所述采集样本前准备的具体步骤为：
[0034]1)应先根据不同的疾病症状或检验目的确认采集样本的类型，如血液、组织器官、
内容物、粪便或各类拭子等，以便提前准备好无菌的操作器械和耗材。在无法估计病因时，可进行全面的采集；
[0035]2)采集样本之前，工作人员必须穿戴实验服、口罩、手套，必要时可带上护目镜，以保证工作人员安全；
[0036]3)为记录详细的样本信息，本方法提出一种样本背景信息记录表，在采样之前将表格打印出来记录信息；
[0037]进一步地，步骤(2)所述血液的采集为根据不同的检测项目选用合适的采集管，如：采集全血时选用含有抗凝剂的一次性真空采血管(EDTA－紫色盖)；制备血清选用不含任何添加剂的一次性真空采血管(红色盖)。先在采集管表面粘贴准确无误的样本背景信息，接着将采血部位的猪毛剃干净，然后用75％(体积百分浓度)的酒精进行消毒，待采血部位干燥后用一次性针头穿刺，将血液采集到采血管里后轻柔颠倒混匀，每头病猪需采集至少3个管。
[0038]进一步地，步骤(3)所述各类组织器官的采集为在猪死亡后，体腔用灭菌的解剖器械剖开，用灭菌的组织剪、手术刀和镊子剥离组织器官(心、肝、脾、肺、肾、淋巴结等)，然后用手本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪分类样本采集方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)血液的采集：先在采集管表面粘贴准确无误的样本背景信息，接着将采血部位的猪毛剃干净，然后消毒，待采血部位干燥后用针头穿刺，将血液采集到采血管里后混匀；(2)各类组织器官的采集：在猪死亡后，剖开体腔，剥离组织器官，然后切取组织块分装，剩余的组织分开存放，并记录好样本背景信息记录表；(3)肠道内容物的采集：在猪死亡后，在无菌状态下取出整个肠道，然后切取大肠和小肠后，将肠道内容物挤出分装，剩余的肠道分开存放，或用组织剪将肠道从两端剪开，用缓冲液冲洗，冲洗出的内容物分装，记录好样本的背景信息；(4)粪便的采集；从体外采集粪便，准备好粪便容器收集猪粪便，然后将猪的粪便样本分装，记录好样本的背景信息；(5)拭子类样本的采集：1)肛门拭子将肛门周围清洁干净，用无菌棉拭子插入肛门隐窝处旋转后取出，将棉拭子头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息；2)呼吸道拭子用无菌棉拭子蘸取猪鼻腔、咽喉或气管内的分泌物后取出，将棉拭子头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息；3)眼睛拭子撑开眼睑，接着用无菌棉拭子蘸取分泌物，应避免接触睫毛和脸缘，采样后将棉拭子头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息；4)皮肤拭子将无菌棉拭子按在需取样的皮肤表面上擦拭，擦拭完成后，将每个取样点的棉拭子的头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息；5)阴道拭子用无菌棉拭子插入母猪的阴道中旋转后取出，将棉拭子头部剪下浸入缓冲液中，记录好样本的背景信息。2.根据权利要求1所述一种猪分类样本采集方法，其特征在于，步骤(2)所述血液的采集为采集全血时选用含有抗凝剂的一次性真空采血管；制备血清选用不含任何添加剂的一次性真空采血管或一次性采血器；每头病猪需采集血液至少3个管。3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫鹤，李小英，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：