将DNA或突变精确引入小麦基因组制造技术

本发明专利技术属于基因组编辑领域，涉及用于在小麦基因组DNA中无缝引入靶向精确修饰的方法。麦基因组DNA中无缝引入靶向精确修饰的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】将DNA或突变精确引入小麦基因组


[0001]本专利技术属于基因组编辑领域，涉及用于在小麦基因组DNA中无缝引入靶向精确修饰的方法。

技术介绍

[0002]小麦是世界上最重要的农作物之一。2017年，世界小麦产量为7.3亿吨，预计2019年产量为7.66亿吨，成为仅次于玉米的第二大谷物。自1960年以来，世界小麦和其他粮食作物的产量增加了两倍，预计到21世纪中叶还会进一步增长。由于世界人口的增加以及面筋蛋白独特的粘弹性和粘附特性，全球对小麦的需求正在增加。
[0003]为了进一步提高小麦产量，需要将使用最近开发的CRISPR Cas技术的基因编辑、基因替换(gene replacement)或基因堆叠(gene stacking)等技术应用于小麦。
[0004]然而，由于硬粒小麦和面包小麦的倍性，分别是四倍体和六倍体，并且小麦在转化和再生方面的不适宜(reluctance)，应用这些技术很麻烦。
[0005]尽管本领域中很少有出版物描述通过诱导双链DNA断裂将插入缺失(InDels)引入小麦基因组，但没有出版物描述基因编本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于将至少一个供体DNA分子精确引入小麦基因组的靶区域的方法，包括以下步骤a.向小麦细胞引入i.至少一个供体DNA分子和ii.至少一种RNA引导的核酸酶或RNA引导的切口酶和iii.至少一个单指导RNA(sgRNA)或tracrRNA和crRNA，和b.孵育所述小麦细胞以允许将所述至少一个供体DNA引入所述基因组的靶区域和c.选择包含所述靶区域的所述供体DNA分子序列的小麦细胞，其中所述供体DNA在其5
’
和/或3
’
端与至少30个碱基功能性连接，所述碱基各自与所述靶区域中的序列至少80％相同。2.一种产生小麦植物的方法，所述小麦植物包含基因组的靶区域的供体DNA，包括以下步骤a.向小麦细胞引入i.至少一个供体DNA和ii.至少一种RNA引导的核酸酶或RNA引导的切口酶和iii.至少一个单引导RNA(sgRNA)或tracrRNA和crRNA，和b.孵育所述小麦细胞以允许将所述至少一个供体DNA引入所述基因组的靶区域c.选择包含所述靶区域的所述供体DNA分子序列的所述小麦细胞，和d.从所述选定的小麦细胞再生出小麦植物，其中所述供体DNA在其5
’
和/或3
’
端与至少30个碱基功能性连接，所述碱基各自与所述靶区域中的序列至少80％相同。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中在步骤b之后，所述小麦细胞在包含选择剂的培养基上孵育。4.根据权利要求1至3所述的方法，其中所述RNA引导的核酸酶或RNA引导的切口酶是Cas核酸酶或Cas切口酶。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：T，
申请(专利权)人：巴斯夫农业种子解决方案美国有限责任公司，
类型：发明
国别省市：