一株互隔交链孢霉、除草剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株互隔交链孢霉、除草剂及其应用，所述互隔交链孢霉被命名为互隔交链孢霉(Alternaria alternata)JM，在2021年11月10日，该互隔交链孢霉JM被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No 23848。该菌株对播娘蒿具有高侵染性，致病率高，可将该菌作为除草剂的活性成分应用于田间播娘蒿的防治。互隔交链孢霉JM菌的致病性具有高选择性，对小麦、芝麻、油菜、红豆、绿豆常见经济等非常安全，其具有使用安全、不会诱发播娘蒿的抗药性、环境安全性高的优点，在播娘蒿的防治方面具有很好的发展前景。在播娘蒿的防治方面具有很好的发展前景。在播娘蒿的防治方面具有很好的发展前景。

A strain of Alternaria alternata, herbicide and its application

【技术实现步骤摘要】
一株互隔交链孢霉、除草剂及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，尤其涉及一株互隔交链孢霉、除草剂及其应用。

技术介绍

[0002]播娘蒿(Descurainia sophia)又名麦蒿，属于十字花科播娘蒿属植物，其抗酸耐盐碱、耐寒，具有高度的环境适应性，在我国除华南地区外各地区均有分布，是黄河中下游地区麦田数量最大的阔叶类杂草，也是麦田里常见的恶性杂草。其生长迅速、植株高大，极易与小麦竞争有效资源，还可引起植株倒伏，严重影响小麦质量和产量，最高可使小麦产量损失53.96％。
[0003]目前，叶面喷施化学除草剂是我国防治播娘蒿的最主要的方法，受除草剂对小麦的安全性的影响，化学防治窗口期短暂，小麦拔节后无法使用除草剂防治播娘蒿。此外，播娘蒿已普遍对化学除草剂产生了严重的抗药性，导致防效明显下降。开发播娘蒿生防菌无疑可弥补化学除草剂对作物和环境安全性不高、容易诱发抗药性等的缺点，成为综合治理播娘蒿的重要手段。
[0004]相对于化学防治，生物防治具有毒性低、选择性强、无农药残留、不产生抗药性等优点，具有很好的发展前景。但是目前，尚无可用于有效防治播娘蒿的微生物菌种被报道。
[0005]因此，现有技术有待进一步改进。

技术实现思路

[0006]针对上述问题，本专利技术提供了一株播娘蒿致病菌
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互隔交链孢霉(Alternaria alternata)JM，其对播娘蒿具有优异的防治效果，可用于制备播娘蒿除草剂，具有使用安全、选择性强、无农药残留、不产生抗药性等优点。
[0007]申请人在偶然田间发现：播娘蒿的茎、幼嫩角果及果梗可被真菌侵染，使角果干枯，无法结实(见图1)。因此，从该染病的播娘蒿中分离得到所述互隔交链孢霉(Alternaria alternata)JM，并对其生物学特性以及除草活性进行充分研究，发现：该菌种的菌丝和孢子都对播娘蒿具有侵染作用；接种该菌的菌丝体24h后就可在播娘蒿叶片上观察到大量绒毛状菌丝，10d后播娘蒿完全死亡。
[0008]基于上述研究成果，本专利技术提供以下的技术方案：
[0009]第一方面，本专利技术提供一株互隔交链孢霉，其特征在于，其被命名为互隔交链孢霉(Alternaria alternata)JM，其保藏号为CGMCC NO.23848。
[0010]经鉴定，该互隔交链孢霉(Alternaria alternata)JM是属于半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、暗色科、链格孢属、互隔交链孢霉种。在2021年11月10日，该互隔交链孢霉JM被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为：CGMCC No23848，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0011]经实验发现，该互隔交链孢霉JM在7种培养基(PSA、PDA、OMA、CMA、SDA、CA和WA培养基)上均能生长，其中，在PSA和PDA培养基上生长最快。这说明该菌株对培养条件要求不严
格，培养成本低。
[0012]JM菌株在5～35℃范围内均能生长，适宜生长温度为15～30℃，最适温度为28℃。JM菌株在pH5～12均能较快生长，JM菌株在连续光照、12h光暗交替、全黑暗3种光照条件下均可生长。此外，互隔交链孢菌在16
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37℃的温度范围内均可产孢子，22
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25℃产孢量最大。这说明JM菌株对环境的适应能力强，在田间应用时其存活能力强，有效延长该菌制备的除草剂的持效期，提高其除草效率。
[0013]第二方面，本专利技术还提供一种微生物菌剂，其活性成分包括上述的互隔交链孢霉JM。优选地，所述微生物菌剂为互隔交链孢霉JM的菌丝体和/或孢子或其发酵上清液。所述菌丝体和/或孢子为菌丝体和/或孢子的悬液或进一步进行剂型处理后得到的粉剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、干悬浮剂、泡腾剂或冻干粉。
[0014]所述微生物菌剂可作为活性成分用于制备除草剂、复合型微生物菌肥或复合杀虫剂(具有杀虫、除草多种活性)等各个应用方面。
[0015]第三方面，本专利技术还提供上述微生物菌剂的制备方法，该制备方法包括以下步骤：
[0016]S1、将权利要求1所述的互隔交链孢霉接种到液体培养基中，26～30℃，振荡培养5～7d；
[0017]S2、将得到的培养液进行过滤，收集菌丝体或收集菌丝体和孢子后，以电磨机粉碎10min，获得菌丝体片段，接着用无菌水稀释，得到菌丝体片段的悬浊液，直接作为微生物菌剂；或进一步进行剂型处理微生物菌剂。
[0018]该方法是利用互隔交链孢霉的菌丝体片段制备微生物菌剂。
[0019]或者，微生物菌剂的制备方法包括以下制备步骤：
[0020]S01、将所述互隔交链孢霉接种到固体培养基中，黑暗条件下培养6～8d；
[0021]S02、将得到的固体培养基加入到带玻璃珠的灭菌水中，静置后震荡，再进行过滤，得到互隔交链孢霉孢子悬浮液，将其直接作为微生物菌剂；或进一步进行剂型处理微生物菌剂。
[0022]该方法是利用互隔交链孢霉的孢子悬浮液制备微生物菌剂。
[0023]优选地，所述固体培养基为水稻固体培养基、麦麸固体培养基、玉米粉固体培养基、小麦固体培养基、燕麦片固体培养基、PSA、PCA、PDA、CA、玉米粉培养基或燕麦片培养基。培养条件为：25℃，黑暗培养7d。实验证明，水稻培养基的产孢效果最好，麦麸、燕麦片、小麦和玉米粉培养基也可用于互隔交链孢霉的产孢，产孢都超过1
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106。优选地，所述固体培养基为水稻固体培养基。
[0024]优选地，S02步骤的条件具体为：将得到的固体培养基加入到50mL带玻璃珠的灭菌水中，静置30分钟，200rpm震荡30分钟，四层纱布过滤，得到孢子悬浮液，将其直接作为微生物菌剂；或进一步进行剂型处理微生物菌剂。
[0025]为降低成本，可直接将得到的菌丝体片段的悬浊液或孢子悬浮液作为微生物菌剂进行使用；在此基础上，为了便于存储或达到缓释效果，可对菌丝体片段的悬浊液或孢子悬浮液与载体、其他助剂混合进行进一步的剂型加工(采用现有技术)，得到不同剂型的微生物菌剂，如粉剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、干悬浮剂、泡腾剂等。
[0026]优选地，所述S1步骤中的液体培养基为：PD液体培养基。
[0027]优选地，上述S1步骤最佳的制备条件为：取互隔交链孢霉JM菌株的2块直径10mm的
菌块，接种于培养基中，25℃恒温暗培养7d。
[0028]第四方面，本专利技术还提供一种除草剂，其活性成分包括上述的互隔交链孢霉。所述除草剂的剂型为粉剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、干悬浮剂、泡腾剂等。优选地，所述除草剂还包括其他各种助剂，用以延长除草剂的持效期和稳定性。
[0029]优选地，为了进一步提高除草剂的除草活性或拓宽除草谱，所述除草剂还包括其他化学除草剂或微生物除草成分，如苯磺隆、噻吩磺隆、甲基二磺隆、氟唑磺隆、氯吡嘧磺隆、啶磺草胺、双氟磺草胺、2,4
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株互隔交链孢霉，其特征在于，被命名为互隔交链孢霉(Alternaria alternata)JM，其保藏号为CGMCC NO.23848。2.一种微生物菌剂，其特征在于，其活性成分包括如权利要求1所述的互隔交链孢霉。3.一种如权利要求2所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将权利要求1所述的互隔交链孢霉接种到液体培养基中，26～30℃，振荡培养5～7d；S2、将得到的培养液进行过滤，收集菌丝体或收集菌丝体和孢子后，以电磨机粉碎，获得菌丝体片段，接着用无菌水稀释，得到菌丝体片段的悬浊液，将其直接作为微生物菌剂；或进一步对菌丝体片段的悬浊液进行剂型加工，得到微生物菌剂；或者，所述制备方法包括以下步骤：S01、将权利要求1所述的互隔交链孢霉接种到固体培养基中，25℃，黑暗培养7d；S02、将得到的固体培养基加入到带玻璃珠的灭菌水中，静置后震荡，再进行过滤，得到互隔交链...

【专利技术属性】
技术研发人员：李凌绪，姜波，白霜，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：