一种解鸟氨酸拉乌尔菌E315及其应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，尤其涉及一种解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315及其应用。本发明专利技术从蚯蚓肠道中分离得到一种解鸟氨酸拉乌尔菌E315，其具备较好的耐盐性能和溶磷效果，同时还可以产生吲哚乙酸，将解鸟氨酸拉乌尔菌E315用于盐胁迫的植物种植过程中有利于土壤中有效磷含量的增高，对玉米幼苗生长具有显著促进作用。本发明专利技术提供的解鸟氨酸拉乌尔菌E315可以用于促进种子提前萌发，促进菌剂在农作物根系定殖，并改善农作物根际土壤的理化性质，降低玉米叶片和和根系抗氧化酶活性，缓解盐胁迫的危害，这对盐碱地生物改良提高土壤生态系统稳定性具有重要意义。具有重要意义。具有重要意义。

A strain of L. ornithinum e315 and its application

【技术实现步骤摘要】
一种解鸟氨酸拉乌尔菌E315及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，尤其涉及一种解鸟氨酸拉乌尔菌E315及其应用。

技术介绍

[0002]土壤盐渍化是现有较为严重且持续恶化的生态问题之一，广泛分布在干旱半干旱地区，是阻碍农业生产和发展的关键问题。盐碱地的肥力特征主要表现为“瘦、板、生、冷”，有机质和土壤养分含量相对较低，严重影响农田经济作物产量。盐碱化导致土壤中盐离子过多会造成植物产生生理性干旱，同时还会降低土壤中磷元素可利用性，限制植物对磷素的直接吸收利用，导致植物正常生理代谢紊乱，抑制植物生长。
[0003]蚯蚓掘穴、吞食、排泄等活动提高了土壤中微生物丰度和多样性，直接或间接促进了土壤中磷循环过程，增强了土壤
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植物生态系统的稳定性。且蚯蚓前肠氧气充足，不仅富含大量对土壤物理、化学、生物特性有益的微生物，而且蚯蚓吞食、消化、排泄过程中，经过消化道的选择，肠道内有益微生物群体大量繁殖并通过粪便排放到土壤中改变了土壤化学、生物特性，形成独特微域，对土壤养分循环、植物生长发育等方面具有重要作用。
[0004]微生物改良是盐碱土生物改良的重要措施之一，盐碱土中施用微生物菌剂可以活化土壤中被固定的养分改善土壤化学特性，改良土壤物理结构，为盐碱地中微生物的生长繁殖创造了有利条件。
[0005]耐盐溶磷微生物是一种植物根际促生菌，既能在高盐分条件下生存繁殖，又能将难溶性磷转变为可溶态磷，又能通过直接方式/间接方式涉及植物抗氧化系统、调节离子平衡等多种生理机制的过程，对缓解植物所受盐胁迫、促进植物生长和维持根际微生物群落稳定具有重要作用。
[0006]目前针对盐碱土生物改良的菌株大多是盐土中直接筛选出来可培养微生物耐盐促生菌，但是盐土中可培养细菌仍存在一定局限。

技术实现思路

[0007]为了解决现有技术存在的问题，本专利技术提供一种解鸟氨酸拉乌尔菌E315及其应用。
[0008]蚯蚓肠道中具有大量有益微生物，这些微生物与土壤中微生物群落形成独特微域，维持了土壤生态系统中植物
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土壤
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微生物之间的稳定性。本专利技术尝试直接从蚯蚓肠道内容物中筛选出对提高土壤磷素矿化、缓解植物外界胁迫的危害，促进植物生长的微生物细菌，分离得到了一种具备较好的耐盐和溶磷效果的菌株，进一步对其进行鉴定，经过16SrDNA分子鉴定结果显示该菌株序列与其他已知同种解鸟氨酸拉乌尔菌的16S rDNA序列有99％相似性，因此确定该菌株为解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)，并且命名为解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315。
[0009]本专利技术进一步针对解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315进行了生物保藏，保藏信息如下：
[0010]保藏编号：CGMCC No.24658，分类命名为：解鸟氨酸拉乌尔菌Raoultella ornithinolytica，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号邮编100101，保藏日期：2022年4月08日。
[0011]经过进一步鉴定，解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315在7％NaCl培养基中生长阳性，吲哚乙酸产生筛选培养基中产IAA量为15.54μg/mL，NBRIP无机磷液体培养基中溶磷量为84.51mg/L。
[0012]其形态学及生理生化特征如下：
[0013]在LB培养基上28
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30℃培养1
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3d后，菌落表面湿润且有光泽，呈橙黄色不透明状；经过革兰氏染色结果可知，该菌株为革兰氏阴性菌；菌株生长物向四周呈雾状扩散，具有强运动性，丙二酸利用阳性，柠檬酸盐利用阳性，接触酶阳性、甲基红试验阳性，V
‑
P试验阳性，淀粉水解呈阴性，产吲哚试验阳性，苯丙氨酸脱氨酶试验阳性。
[0014]本专利技术进一步提供一种菌剂，所述菌剂包括所述的解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315或其发酵产物中的至少一种。
[0015]进一步地，所述解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315的发酵产物的制备流程包括种子培养和发酵培养；
[0016]所述种子培养使用的培养基包括：葡萄糖1～40g/L、蛋白胨1～40g/L、酵母提取物1～40g/L、氯化钠1～40g/L，pH为7.0～8.0；
[0017]所述种子培养的条件为：温度25～35℃、摇床转速150～210rpm。
[0018]进一步地，所述发酵培养的培养基为LB液体培养基，所述发酵培养的条件为：温度25～35℃、摇床转速150～210rpm。
[0019]进一步地，所述菌剂还包括磷矿粉；所述磷矿粉的用量优选为每千克标准人工土中施用1～10g磷矿粉，进一步优选为每千克标准人工土中施用2.5
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10g磷矿粉。
[0020]本专利技术进一步提供所述解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315或所述菌剂在提高盐碱地中微生物多样性和稳定性中的应用。
[0021]本专利技术进一步提供所述解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315或所述菌剂在促进植物生长中的应用。
[0022]进一步地，所述解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315或所述菌剂可以应用于以下至少一方面：
[0023](1)预防或缓解盐胁迫对植物造成的损伤；
[0024](2)提升土壤中的酸性磷酸酶、速效钾、有效磷和铵态氮中一种或几种物质的含量；
[0025](3)提高植物根部的生物量；
[0026](4)提高植物地上部脱落酸、赤霉素和吲哚乙酸的含量；
[0027](5)提高植物根系抗氧化酶的活性。
[0028]进一步地，所述植物生长为促进植物在盐胁迫条件下的生长，所述盐胁迫优选为为在NaCl含量为1
‰‑8‰
的条件下生长。
[0029]进一步地，所述应用为将所述解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315施用于所述植物的生长环境中，施用量为109～10
11
cfu/kg，优选为10
10
cfu/kg。
[0030]进一步地，所述植物包括：玉米、小麦、甜高粱或苜蓿中的一种或多种。
[0031]本专利技术进一步提供一种提高植物耐盐能力的方法，包括：在所述植物的生长环境中施加109～10
11
cfu/kg的所述的解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315，优选施用量为10
10...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315，其特征在于，所述解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315的保藏编号为CGMCC No.24658。2.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂包括权利要求1所述的解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315或其发酵产物中的至少一种。3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)E315的发酵产物的制备流程包括种子培养和发酵培养；所述种子培养使用的培养基包括：葡萄糖1～40g/L、蛋白胨1～40g/L、酵母提取物1～40g/L、氯化钠1～40g/L，pH为7.0～8.0；所述种子培养的条件为：温度25～35℃、转速150～210rpm。4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述发酵培养的培养基为LB液体培养基，所述发酵培养的条件为：温度25～35℃、转速150～210rpm。5.根据权利要求2
‑
4任一项所述的菌剂，其特征在于，还包括磷矿粉；所述磷矿粉的用量优选为每千克标准人工土中施用1～10g磷矿粉。6.权利要求1所述的解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ...

【专利技术属性】
技术研发人员：王冲，徐光霞，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：