本发明专利技术公开了一株产透明质酸的鼠李糖乳杆菌E2及其应用，属于微生物技术领域。本发明专利技术公开的一株产透明质酸的鼠李糖乳杆菌E2，保藏编号为CGMCC No.21770，其在发酵条件下可产透明质酸。本发明专利技术公开的鼠李糖乳杆菌E2的发酵上清液、菌悬液，在体内氧化应激模型中均能显著降低斑马鱼体内活性氧水平，和显著提高斑马鱼体内超氧物歧化酶活性，具备应用于体内抗氧化延缓衰老的潜能；且在斑马鱼损伤模型中也能显著促进斑马鱼尾鳍损伤修复，表现出良好的促进组织损伤修复的潜力。本发明专利技术公开的一株鼠李糖乳杆菌E2在抗氧化延缓衰老、促进组织损伤修复方面有巨大的潜在应用前景。方面有巨大的潜在应用前景。方面有巨大的潜在应用前景。
【技术实现步骤摘要】
一株产透明质酸的鼠李糖乳杆菌E2及其应用
[0001]本专利技术涉及微生物
，更具体的说是涉及一株产透明质酸的鼠李糖乳杆菌E2及其应用。
技术介绍
[0002]透明质酸(hyaluronic acid,HA)，又称玻璃酸，是一种以乙酰氨基葡萄糖与葡萄糖醛酸双糖单元交替连接而成的直链酸性黏多糖。透明质酸作为人体自有物质，广泛存在于人体的关节腔、皮肤、眼玻璃体、软骨、脐带等组织中。随着年龄的增长，透明质酸在人体内的含量会逐渐降低。这是导致关节僵化、皮肤老化、皱纹增多、眼花等诸多问题的主要原因之一。多项研究证明，通过口服透明质酸可以促进人体自身合成新的透明质酸，增加体内透明质酸的含量，进而可改善人体皮肤水分，具有体内抗氧化、改善关节功能、修复胃黏膜损伤等作用。因此，透明质酸是一种在日化、医药、生化与保健食品等领域内用途极为广泛、性能优良的功能性生化物质。
[0003]现阶段可食用的透明质酸主要来自于鸡冠以及C群链球菌的发酵。从鸡冠提取的透明质酸在食用安全上有人畜共通疾病病毒感染的疑虑。同时，透明质酸经过胃消化液之后会被酶分解，因而无法经由直接摄取透明质酸食品达到显著的效果。因此，通过食用可分泌透明质酸的菌株，使其在肠道定植，并持续分泌透明质酸，从而避免胃消化液对透明质酸的降解作用。然而，C群链球菌为不可用于食品的菌种。迄今为止，已知只有少数可食用的菌株具有分泌透明质酸的能力，例如嗜热链球菌YIT2084和格氏乳杆菌FTDC8131。另外，目前益生菌在抗衰老、促进组织修复中的研究和应用较少。国内生产企业所用益生菌菌种长期依赖进口，而且国外菌株未必适合我国居民胃肠道生理状况。另外，益生菌的功能缺乏有力的科学研究证据，严重影响了益生菌及其制品的推广。基于此，针对菌种资源的功能深入挖掘，筛选出拥有自主知识产权、具有特定功能性质、适合中国人群生理特性的新型益生菌菌株，对提高我国益生菌生产企业的核心竞争力，促进我国益生菌制品发展尤为重要。
[0004]因此，提供一株产透明质酸的鼠李糖乳杆菌E2及其应用是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
[0005]有鉴于此，本专利技术提供了一株产透明质酸的鼠李糖乳杆菌E2及其应用。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一株鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)E2，其保藏编号为CGMCCNo.21770，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称 CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2021年01月29日，分类命名为鼠李糖乳杆菌Lactobacillusrhamnosus。
[0008]进一步，所述的一株鼠李糖乳杆菌E2在制备抗衰老、促进组织损伤修复产品中的应用。
[0009]所述一株产透明质酸的鼠李糖乳杆菌E2在体内氧化应激模型中具有降低斑马鱼体内ROS水平，和提高斑马鱼体内SOD活性的作用，表现出良好的抗氧化延缓衰老的益生功效。
[0010]所述一株产透明质酸的鼠李糖乳杆菌E2在斑马鱼损伤模型中，可显著促进斑马鱼尾鳍损伤修复，表现出良好的促进组织损伤修复的潜力。
[0011]进一步，所述产品为食品、化妆品、药品。
[0012]进一步，所述的一株鼠李糖乳杆菌E2在产透明质酸中的应用。
[0013]进一步，所述的一株鼠李糖乳杆菌E2在制备发酵乳制品及其他发酵食品中的应用。
[0014]进一步，所述鼠李糖乳杆菌E2为菌悬液或发酵上清液。
[0015]本专利技术所述在体内氧化应激模型中能显著降低斑马鱼体内ROS水平，和显著提高斑马鱼体内SOD活性，以及在斑马鱼损伤模型中也能显著促进斑马鱼尾鳍损伤修复的菌株E2，包括菌株E12的发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)。
[0016]经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术公开提供了一株产透明质酸的鼠李糖乳杆菌E2及其应用，鼠李糖乳杆菌E2是从广东省梅州市蕉岭县的长寿老人粪便中分离筛选得到的，在斑马鱼氧化应激模型中具有显著降低斑马鱼体内ROS水平，和显著提高斑马鱼体内SOD活性，以及在斑马鱼损伤模型中也能显著促进斑马鱼尾鳍损伤修复；具备应用于体内抗衰老、促进组织修复的潜能，此为利用鼠李糖乳杆菌E2开发抗氧化延缓衰老、缓解皮肤老化、促进组织损伤修复的益生菌制剂提供理论参考和指导依据。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0018]图1附图为本专利技术鼠李糖乳杆菌E2在MRS琼脂平板上的菌落形态；
[0019]图2附图为本专利技术鼠李糖乳杆菌E2革兰氏染色后的显微形态观察；
[0020]图3附图为本专利技术鼠李糖乳杆菌E2产透明质酸能力；
[0021]图4附图为本专利技术鼠李糖乳杆菌E2的发酵上清液、菌悬液对甲萘醌诱导斑马鱼氧化应激模型中ROS水平影响的直观图；
[0022]图5附图为本专利技术鼠李糖乳杆菌E2的发酵上清液、菌悬液对甲萘醌诱导斑马鱼氧化应激模型中ROS水平影响的统计图；
[0023]图6附图为本专利技术鼠李糖乳杆菌E2的发酵上清液、菌悬液对甲萘醌诱导斑马鱼氧化应激模型中SOD活性的影响；
[0024]图7附图为本专利技术鼠李糖乳杆菌E2的发酵上清液、菌悬液对斑马鱼尾鳍损伤修复的影响的直观图；
[0025]图8附图为本专利技术鼠李糖乳杆菌E2的发酵上清液、菌悬液对斑马鱼尾鳍损伤修复的影响的统计图。
具体实施方式
[0026]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]实施例1鼠李糖乳杆菌E2分离、鉴定及保藏
[0028](1)分离：将长寿老人粪便经梯度稀释后，分别接种于厌氧血琼脂培养基、MRS固体培养基中，37℃厌氧培养48h，挑取平板上的单菌落划线分离得到纯菌落。将平板上的纯菌落接种于MRS液体培养基中，37℃厌氧培养 12～16h，加入20％甘油，置于
‑
80℃冰箱中保存。
[0029](2)菌株形态学鉴定：对筛选出的菌株革兰氏染色后于显微镜下观察，革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
[0030](3)菌株的分子生物学鉴定：对所获得的菌株提取基因组DNA，通过 PCR技术利用16S rDNA通用引物27F和1492R扩增16S rDNA全长片段，之后进行测序，鉴定菌株的种属。
[0031]其中，通用引物27F和1492R的引物序列如下：
...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)E2，其特征在于，其保藏编号为CGMCC No.21770。2.权利要求1所述的一株鼠李糖乳杆菌E2在制备抗衰老、促进组织损伤修复产品中的应用。3.根据权利要求2所述的一株鼠李糖乳杆菌E2在制备抗衰老、促进组织损伤修复产品中的应用，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌E2为菌悬液或发酵上清液。4.根据权利要求2所述的所述的一株鼠...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑康帝，马燕，刘彦，陈涛，张召，
申请(专利权)人：广东南芯医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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